实验报告

 课程名称：                     指导老师：                 成绩：                    

实验名称：                    

实验类型： 分离鉴定实验               同组学生姓名：         

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实验六 酶作用的专一性

一、目的：了解酶的一种催化特性―对底物的选择性及检查酶的专一性原理与方法。

二、原理

酶作用的专一住是酶与一般催化剂的主要区别之一，所谓酶作用的专一性，即酶仅与一种或一类相似的物质起一定的催化作用，而对其它物质则不能起催化作用。本实验以蔗糖酶（来源于酵母）及枯草杆菌α ―淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶作用的专一性。

淀粉和蔗糖缺乏自由醛基（苷羟基），无还原性，但在α ―淀粉酶的作用下，淀粉很容易水解成为糊精及少量麦芽糖，葡萄糖，使之具有还原性。在同祥的条件下，α ―淀粉酶不能催化蔗糖的水解，蔗糖酶能催化水解蔗糖生成具有还原性的葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉水解．

本实验采用本尼迪克特（Benedict）试剂检测还原糖。

三、试剂与器材

试剂：

1. 2% 蔗糖溶液。

2. 1%可溶性淀粉淀液。

称取可溶性淀粉1克，加水10 ml搅成糊状，倾入90 ml预先煮沸的蒸馏水中，搅拌均匀，再煮沸2～3分钟,冷却后定容至100 ml此溶液需新鲜配制。

3．枯草杆菌。α ―淀粉酶的稀释液。

4. 蔗糖酶液：取适量干酵母100 克，置于研钵内，加少量细砂及50 ml蒸馏水，用力研磨提取约l 小时，再加蒸馏水使总体积为500 ml左右，过滤。滤液保存于冰箱内备用。

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实验一 酶的专一性实验

实验原理

淀粉在唾液淀粉酶的催化作用下，能够水解成麦芽糖。在煮沸的条件下，斐林试剂能使麦芽糖氧化，自身还原成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此，斐林试剂可以用来鉴定溶液中是否有麦芽糖，进而可以看出唾液淀粉酶是否只能催化淀粉水解，不能催化其他糖类（如蔗糖）水解。

目的要求

1．初步学会做酶的专一性实验的方法。

2．理解酶具有专一性的特点。

材料用具

新鲜的唾液。

消过毒的脱脂棉，镊子，试管，小烧杯，量简，玻璃棒，酒精灯，火柴。 可溶性淀粉的质量分数为州的溶液①，蔗糖的质量浓度为3g／InL（克每毫升的溶液，斐林试剂，清水。

方法步骤

1．用清水将口漱净，口内含一块消过毒的脱脂棉。用镊子取出脱脂棉，使其中的唾液收集到小烧杯中。

2．取3mL唾液，注入另一个小烧杯中，加入30mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀，制成稀释的唾液备用。

1． 取两支洁净的试管，编号， 按下表加入试剂：

1 2

3%淀粉溶液 2mL —

3%蔗糖溶液 — 2mL

2%淀粉酶溶液 2mL 2mL

摇匀，37℃保温5 min

斐林试剂 2mL 2mL

摇匀，100℃保温3 min

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实验七 酶的活性及专一性测定

一、实验目的

通过本实验，了解酶的活性测定方法及其对底物催化的专一性。

二、实验原理

唾液淀粉酶能专一的催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖、葡萄糖等。麦芽糖或葡萄糖都属于还原糖，能使班氏试剂中的二价铜离子还原成亚铜，并生成砖红色的氧化亚铜。淀粉酶不能催化蔗糖水解，且蔗糖本身不是还原糖，所以不能与班氏试剂作用呈色，以此证明酶催化底物的专一性。

三、器材及试剂

1. 器材：试管、试管夹、样品杯、滴瓶、温度计、恒温水浴锅，冰箱等。

2. 试剂：

（1）0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）：称取可溶性淀粉0.5g，加5ml蒸馏水调成糊状，徐徐倒入80ml煮沸的蒸馏水中，不断搅拌，待其溶解后，加0.3gNaCl，加蒸馏水至100ml。此液应新鲜配制，防止细菌污染。

（2）2%蔗糖溶液：称2g蔗糖，加蒸馏水至100ml溶解。

（3）班氏试剂：溶解结晶硫酸铜17.3g于100ml热的蒸馏水中，冷却后加水至150ml为A液。取柠檬酸钠173g和无水碳酸钠100g，加蒸馏水600ml ,加热溶解，冷却后加水至850ml为B液。将A液缓慢倒入B液中，混合即可。

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本科学生实验报告[n1] 

学号    104120440   姓名      孙永升      

学院  生命科学学院   专业、班级  10生物技术    

实验课程名称      酶  工  程  < 实验 >      

教师及职称       李俊俊    < 讲师 >      

         开课学期  20##  至   2013  学年   第二学期   

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说明：本实验由四个小实验组成，其中第一个实验（酶的专一性）必做，其他三个小实验选做（至少做一个）

写实验报告时，可以只写需要做的实验内容！

实验四 酶的特性实验

一、实验目的

酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。

二、实验内容

本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。

（一）酶的专一性

1、实验原理

本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜，能氧化具还原性的糖，生成砖红色沉淀氧化亚铜。

2、材料、仪器与试剂

(1)材料：新鲜配制的唾液及其稀释液

(2)仪器：恒温水浴；沸水浴；试管及试管架；

(3)试剂：2%蔗糖溶液；溶于0.3% NaCl的0.5%淀粉溶液；班氏试剂。

3、实验操作

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实验15 酶的特性——酶的专一性

【实验目的】

（1）掌握酶的专一性概念

（2）熟悉还原糖稳定性检测方法

【实验原理】酶具有高度专一性（特异性），即酶对底物有严格的选择性。唾液淀粉酶和蔗糖酶都能催化糖苷键水解，但唾液淀粉酶只能水解淀粉，生成具有还原性的麦芽糖；蔗糖酶只能水解蔗糖生成具有还原性的果糖和葡萄糖。利用这些水解产物的还原性（可使Cu2+还原成Cu+，即生成Cu2O砖红色沉淀），可证实淀粉或蔗糖是否水解，从而阐明酶的专一性。 【实验步骤】 （1)制备稀唾液：用清水漱口，含蒸馏水少量，行咀嚼动作以刺激唾液分泌。取小漏斗1个，垫小块薄层脱脂棉，下接10ml量筒，直接将一口唾液吐入漏斗中，加蒸馏水，过滤，定容至10ml。

各管混匀，置于40 ℃水浴中保温10min。

（3)在以上各管中加入班氏试剂15~20滴，摇匀。沸水浴煮沸3min，观察各管颜色变化，并记录结果。 【实验结果】

1、5号试管出现砖红色沉淀；2号浅绿；3号绿色；4、6蓝色 【实验讨论】

酶对所作用的底物有严格的选择性。一种酶仅能作用于一种物质，或一类分子结构相似的物质，促其进行一定的化学反应，产生一定的反应产物，这种选择性作用称为酶的专一性。

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探究酶的专一性

一、 教学目标

比较唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用。

二、 实验原理

含有自由醛基或酮基的单糖和双糖叫还原性糖。在碱性溶液中，还原糖能将金属离子（铜、铋、汞、银等）还原，糖本身被氧化成酸性化合物。此性质常用于检验糖的还原性，并且常称为测定还原糖含量的各种方法的依据。还原糖与碱性硫酸铜可生成砖红色沉淀物。

本尼迪特试剂内含有硫酸铜，因此淀粉水解生成的麦芽糖和蔗糖水解生成的葡萄糖、果糖等还原糖在煮沸的条件下，与本尼迪特试剂会有砖红色沉淀物产生，淀粉和蔗糖（非还原糖）无此反应。本尼迪特试剂可以用来鉴定淀粉和蔗糖溶液中是否有麦芽糖、葡萄糖及果糖，进而推测淀粉和蔗糖是否被水解。

三、 教学重难点

1、教学重点：建构酶的特性知识体系，探究酶的专一性。

2、教学难点：实验设计与实施。

四、 实验材料与用具

（一）实验材料

稀释200倍的新鲜唾液，质量分数为2%的蔗糖溶液，溶于质量分数为0.3%氯化钠溶液中的淀粉溶液（其中淀粉含量为1%），蔗糖酶溶液，本尼迪特试剂

（二）实验用具

试管，试管架

五、 教学过程

【提问】我们已经学习过酶的相关知识，那么它具有哪些特性呢？

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