细胞计数实验报告
一、目的
培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数
二、原理
细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。显微镜直接计数法是将一定稀释的菌体或孢子悬液注入血球计数板的计数室中，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。因为计数板是一块特别的载玻片。其上由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格，无论哪种每个大方格中的小方格都是400个。每一个大方格边长为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。计数时，通常只用4个四周大方格内的细胞数即可。然后求出每个大方格的平均值，即得出一个大方格中的平均细胞数，再换算成lml菌液中的总细胞数。若设大方格中平均细胞数为N，菌液稀释倍数为M，则计算方法为：
lml菌液中的总菌数=平均每个中格中菌的个数=10000xMxN=10000MN(个)
三、实验材料
普通显微镜、血球计数板、试管、吸管，微量移液管、细胞悬浮液
四、实验步骤
1、将血球计数板及盖片用擦试干净，并将盖片盖在计数板上。
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白细胞计数和分类计数
第一临床医学院 08中七（2）班 董盼攀 20081150226
一、实验目的
1.1掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法数的方法
1.2掌握显微镜外周血白细胞分类的方法及各种白细胞的正常形态
二、实验方法
2.1白细胞计数
2.1.1加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。
2.1.2吸取血液 用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次
2.1.3混匀 将试管中血液与稀释液混匀，待细胞悬液完全变为棕褐色
2.1.4冲池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。用滴棒蘸取细胞悬液1滴，充入改良Neubauer计数板的计数池中，室温静置2-3min，待白细胞完全下沉。
2.1.5计数 在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数
2.1
计算 4个大方格内白细胞数（N）*10*20白细胞??N*50（109/L）4
2.2白细胞分类
2.2.1染色 将血涂片用瑞氏染液染色，冲洗干净，自然干燥后待用
2.2.2低倍镜观察 低倍镜下观察白细胞的分布和染色情况
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白细胞计数和分类
目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态
特点、
原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏（Wright’s）
染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。
实验器材： 香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞
氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针 1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片
实验步骤
白细胞分类
1．血片制作：
取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜（血膜不可过厚、过薄）。将制好的血涂片晾干，不可加热。
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《实验诊断学》实验报告
实验一 红细胞、白细胞计数
一. 实验原理
一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数。用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的白细胞数。根据稀释倍数和计数的容积，换算求得每升血液中的红细胞数量以及白细胞数量。
二. 实验内容与步骤
实验材料：
显微镜、微量吸管、毛细吸管、改良Neubauer计数板、盖玻片、小试管、RBC稀释液、WBC稀释液、正常人的全血、纱布
实验步骤：
1、红细胞计数准备：
① 加稀释液，用微量吸管吸取RBC稀释液蒸馏水2.0 ml加到小试管内。 ② 取血，毛细吸管取血10 μl。
③ 用纱布擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2-3次，立即混匀。
2、白细胞计数准备：
WBC稀释液:
冰醋酸3.0 mL（破坏红细胞）
蒸馏水97.0 mL
亚甲蓝（染色）
① 小试管加WBC稀释液0.38 mL。
② 采血，微量吸管取血20 μL。
③ 擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2-3次，立即混匀。
3、充池、观察：
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一. 实验原理
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血红细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。
二. 实验内容与步骤
1、红细胞计数
（1）器材：显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板
（2）试剂：RBC稀释液 ①Hayem 稀释液：NaCl, Na2SO4，HgCl2 ②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠，甲醛，NaCl ③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用
（3）标本：外周血或抗凝血（EDTA抗凝)
（4）操作步骤：①小试管加RBC稀释液2.0 ml。
②采血，取血10 μl。
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细胞实验报告
一 细胞显微形态的观察
实验目的：
观察各种组织装片，了解各种细胞的形态结构特点，注意细胞形态与功能的联系。
实验原理：
细胞是生物体结构和功能的基本单位。由于其内在结构、自身表面张力及其外部机械压力等因素的存在，细胞呈现出多种多样的形态，有球形、圆柱形、立方形、多边形的等。细胞的形态结构和它的功能是相适应的，如人血红细胞为双面凹的圆饼形，利于进行气体的交换及在血管中的流动。执行不同生理功能的细胞往往具有不同的形态，在不同的生物体中，之行同一种功能的细胞也可能具有不同的形态，甚至有些细胞在其不同的发育阶段也呈现出不同的形态。
虽然细胞的大小及形态有很大的差距，但是都具有共同的基本结构，即都是由细胞膜、细胞质和细胞核组成的。生活状态下的大多数细胞及其内部结构都是无色的，故在进行观察的时候，需要对组织细胞进行染色。
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细胞生物学实验报告
细胞死活鉴定
1. 实验目的：观察上次实验培养的小鼠脾细胞，掌握细胞死活鉴定的方法。
2. 实验用品：
（1） 仪器及器材：显微镜、血细胞鉴定板、盖玻片、胶头滴管、试管
（2）
（3）
3. 实验原理： （1） 活细胞特征：细胞边缘清晰，细胞透明度高，整体立体感强，核区域明显，细胞质内颗粒物质较少，无空泡。培养数天后，可观察到正在分裂的细胞。
（2） 肉眼观察鉴定细胞死活：正常生长的细胞培养液微微发黄，透明度高；如发现培养液微混，则说明细胞量太大需进行传代培养，或者培养液被污染；如果培养液仍呈现清亮的粉红色，则说明细胞未生长。
（3） 细胞凋亡特征过程：首先，细胞膜绒毛消失；然后，细胞收缩，细胞核高度浓缩，边缘化；最后，细胞核片段化，形成凋亡小体。细胞核片段化时，如果对此类细胞进行DNA电泳，则会发现电泳条带呈梯状分布。
（4） 细胞死活鉴定方法 实验药品：蒸馏水、台盼蓝染液、生理盐水、伊红染液 实验材料：小鼠脾细胞
① 染色排除法：细胞死亡后，细胞膜的通透性变大，染料可以通过细胞膜进入细胞。因此，死细胞可以被染料染色，而活细胞由于细胞膜的选择透过性而呈无色。
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