实验一人染色体核型特征及其分析
实验目的:掌握正常人染色体核型特征及其分析方法。
实验准备 1 、材料:正常人体细胞中期分裂相照片
2 、器材:剪刀、镊子、培养皿、浆糊、牙签。
实验原理 人类正常体细胞染色体数为 46 条,其中 22 对为常染色体, 1 对为性染色体。根据染色体的相对长度和着丝粒的位置,将其中 44 条常染色体两两配合成对,形成同源染色体,共 22 对,同时将它们按大小顺序编号( No.1—22 )并分成 A 、 B 、 C 、 D 、 E 、 F 、 G7 组,其中性染色体 X 放在 C 组, Y 放在 G 组,每组染色体都有其特定的形态特征。
A 组 (No. 1---3) :是最大一组染色体
No.1 是一对最大型的中央着丝粒染色体;
No.2 较 No.1 稍短,是一对最大型的亚中央着丝粒染色体;
No.3 是该组中最短的一对中央着丝粒染色体。
B 组 ( No.4—5) :比 A 组短,是二对亚中央着丝粒染色体,长短臂区分明显,组内两号不易辨别。
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实验九?染色体核型分析
【实验目的】
1. 观察测量照片上每条染色体,进行配对排列和剪贴成核型分析图;
2. 掌握染色体组型分析的各种数据指标,学习和掌握核型分析的方法;
3. 正确理解生物的遗传多样性——染色体多样性。
【实验原理】
核型(Karyotype)亦称染色体组型,是指体细胞有丝分裂中期细胞核(或染色体组)的表型,是染色体数目、大小、形态特征的总和。每一个体细胞含有两组同样的染色体,用2n表示。其中与性别直接有关的染色体,即性染色体,可以不成对。每一个配子带有一组染色体,叫做单倍体,用n表示。两性配子结合后,具有两组染色体,成为二倍体的体细胞。在对染色体进行测量计算的基础上,进行分组、排队、配对,并进行形态分析的过程叫核型分析(如图1所示)。将一个染色体组的全部染色体逐条按其长短、形态、类型等特征排列起来的图称为核型图,它代表一个物种的核型模式。核型分析通常包括两方面的内容:⑴ 确定一物种的染色体数目;⑵ 辨析每条染色体的特征。
图1 人类中期细胞染色体核型分析(2n=46)
染色体在复制以后,纵向并列的两个染色单体,通过着丝粒联结在一起。着丝粒在染色体上的位置是固定的。由于着丝粒位置的不同,染色体可分成相等或不相等的两臂,造成中部着丝粒(m),亚中部着丝粒(sm)、亚端部着丝粒(st)和端部着丝粒(t)等形态不同的染色体(如图2所示)。此外,有的染色体还含有随体或次级缢痕,所有这些染色体的特异性构成一个物种的核型。细胞分裂中期是染色体的形态结构最典型的时期,通过显微镜摄影,将选取伸展良好,形态清晰,有代表性的细胞分裂相进行高倍拍摄放大,得到用于核型分析的照片。
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1.制片
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人体外周血淋巴细胞培养、染色体制备及染色体核型分析
09级一班 3组
摘要:细胞培养是指在体外模拟体内的生理环境,培养从机体中取出的细胞,并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期的非增殖状态。体外培养时经一定剂量的植物血凝素(PHA)刺激,T淋巴细胞可转变为淋巴母细胞,重新进入增殖周期,进行有丝分裂。处于增殖期的培养淋巴细胞经过秋水仙素处理,可停留在分裂中期或早中期,这一时期的染色体形态为棒状结构,是观察分析染色体的最佳时期
一、实验目的
1.学习人体细胞离体培养的方法;
2.掌握制作人染色体标本的方法;
3.观察人类染色体的形态和染色体数目;
4.熟悉染色体核型分析。
二、实验原理
细胞培养是一种程序复杂而又要求十分严谨的实验技术。要使细胞在体外长期生存,必须模拟体内环境,共给细胞存活所必需的条件。如供给适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖以及有关的生长因子;氧气及适宜的温度;注意调节其外环境的酸碱度(pH)与渗透压;以及为排除细胞代谢产物的危害,保持良好适宜的外环境而进行必需的传代等等。所有这一切条件与操作都要保持在无菌条件下进行。
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【实验项目】染色体核型分析
1.制片
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一、实验目的
学习和掌握核型分析的方法。
二、实验原理
核型亦称染色体组型,是指体细胞有丝分裂中期细胞核(或染色体组)的表型。每一个体细胞含有两组同样的染色体,用2n表示。其中与性别直接有关的染色体,即性染色体,可以不成对。每一个配子带有一组染色体,叫做单倍体,用n表示。两性配子结合后,具有两组染色体,成为二倍体的体细胞。如蚕豆的体细胞2n=12,它的配子n=6;玉米的体细胞2n=20,配子n=10;人类体细胞2n=46,配子n=23。
染色体在复制以后,纵向并列的两个染色单体,通过着丝粒联结在一起。着丝粒在染色体上的位置是固定的。由于着丝粒位置的不同,染色体可分成相等或不相等的两臂,造成中间着丝粒,亚中间着丝粒、亚端部着丝粒和端部着丝粒等形态不同的染色体。此外,有的染色体还含有随体或次级缢痕。所有这些染色体的特异性构成一个物种的染色体组型。染色体核型分析是细胞遗传学、染色体工程、现代分类学和进化理论的重要研究手段,也是一种简便的方法。
三、实验材料
蚕豆或蛙类染色体标本制片10张,或10个分裂中期细胞的染色体照片。
四、实验器具和药品试剂
放大机、显影盆、游标卡尺、测微尺、剪刀、镊子、计算器、座标纸、绘图纸、胶水、3号放大相纸。
米吐尔、无水亚硫酸钠、对苯二酚、硼砂、炭酸钠、溴化钾、大苏打、钾矾。
五、实验方法和步骤
(一)测量 若用染色体制片标本进行直接测量时,必须利用显微镜与测微尺,事先要用台微尺对目微尺的单位长度进行标定后再进行工作, 仅对染色体长度较大的标本适合。一般标本还是先行拍照放大后进行测量,可得较好数据。首先目测照片上每条染色体长度,按长短顺序初步编号,写在每条染色体短臂的一端,同时确定主缢痕的位置,用游标卡尺逐条测量短臂和长臂长度。根据测量的数据,计算染色体的相对长度,臂比及着丝粒指数。
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实验八 人类染色体核型分析
一、实验原理
在19世纪后半期许多生物学家用显微镜观察到了染色体,1875年Edward Strasburger 描绘了活的植物细胞的有丝分裂,1879年,Walther Flemming随之从两栖类幼体的固定和染色组织中描绘有丝分裂的过程。他创造了今天常用来描述有丝分裂过程的述语,W. Waldeyer将有丝分裂中期可观察到的主要结构命名为染色体,Theodor Boveri和walter S. Sutton在1902年将遗传物质和染色体联系起来。随着细胞学技术的改善,在许多动物和植物细胞内观察和研究了染色体。
尽管如此,人类染色体的研究进展却很慢,因为研究材料不容易得到,还有被应用于植物和动物细胞的技术不能够用于人类,当人类细胞离体培养生长时这些困难就解决了。培养中的分裂细胞能够用碱性的秋水仙素处理, 使染色体不受分裂细胞纺锤体的影响,接着在培养中的细胞暴露在低渗溶液中,这种低渗溶液可以引起细胞膨胀,因此可以单独观察和数出细胞的染色体。
当徐道觉和A.Levan(在1956年)采用这些技术培养人肺胚胎组织细胞时,人类染色体数目被确定为2n=46,在英国,研究生殖巢组织的C.E .Ford不久就确认了这个观察结果,确定人类染色体数目为46的其它研究是以骨髓和皮肤活组织的细胞培养物为基础的,人类染色体的数目有重要意义研究在1959年,那时J. Lejeune和他的合作者将机能失调的唐氏综合症归因于不正常的染色体数目。从此以后,许多主要的生理和精神错乱都与人类染色体的畸变联系起来了。
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