姓名:** 年级专业:20##级生物科学
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实验六 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
一、实验目的
掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。
二、实验原理
维生素C又称抗坏血酸(ascorbic acid)。在1928年,从牛的肾上腺皮质中提取出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐。本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。
因此可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。若无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。
三、实验仪器
1、新鲜水果
2、电子分析天平
3、吸管
4、容量瓶
5、滴定装置
6、锥形瓶
7、研钵
8、漏斗
四、实验试剂
1、2%草酸溶液:草酸2g,溶于100ml蒸馏水。
2、1%草酸溶液:草酸1g,溶于100ml蒸馏水。
3、标准维生素C液:准确称取10.0mg维生素C,溶于1%草酸溶液,并稀释至100ml,贮于棕色瓶中,冷藏,最好临用时配制。此溶液浓度0.1mg/ml.
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生物化学实验报告
维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
一、实验目的
掌握2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理和方法
二、实验原理
维生素C又称抗坏血酸。在1928年从牛的肾上腺皮质中提出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐,本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。
因此,可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。如无其他杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。
三、实验器材
1、松针、菜椒、大枣;
2、取液器
3、容量瓶100ml
4、微量滴定管5ml
5、电子天平
6、研钵、烧杯数只
7、漏斗 两个
四、实验试剂
1、2%草酸溶液:称取草酸8.0311g,溶于400ml蒸馏水中;
2、1%草酸溶液:称取草酸4.0254g,溶于400ml蒸馏水中;
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实验三 维生素C的定量测定
一、研究背景
维生素C的主要作用是提高免疫力,预防癌症、心脏病、中风,保护牙齿和牙龈等。另外,坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少,从而减少黑斑和雀斑,使皮肤白皙。富含维生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等,可以说,在所有的蔬菜、水果中,维生素C含量都不少。美国专家认为,每人每天维生素C的最佳用量应为200~300毫克,最低不少于60毫克,半杯(大约一百毫升)新鲜橙汁便可满足这个最低量。而中国营养学会建议的膳食参考摄入量(RNI),成年人为100mg/日,可耐受最高摄入量(UL)为1000mg/日。维生素C 在维持身体健康方面很重要,因此有必要建立合理的定量测量维生素C的方法,本实验所采用的2,6-二氯酚靛酚钠滴定法就是其中一种。
二、实验原理
维生素C具有很强的还原性,在中性和微酸性环境中能将染料2,6-二氯酚靛酚还原为无色的还原型2,6-二氯酚靛酚,同时自身氧化为脱氢抗坏血酸。由于氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中显红色,在中性或碱性溶液中成蓝色,所以用2,6-二氯酚靛酚滴定维生素C的酸性溶液,滴下的2,6-二氯酚靛酚与维生素C迅速反应呈无色,当维生素C全部反应,滴下的染料使溶液呈现粉红色,此时即为滴定终点。于是可以依据标准2,6-二氯酚靛酚的消耗量求出维生素C的含量。
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饮料中维生素C含量大小比较的测定
一、实验背景
维生素C的功效早已被人们广泛接受,许多食物、保健品都会贴上含有维生素C的标签。德国营养研究会建议,每人每天应摄取50~100mg的维生素C。而30mg的维生素C是人体1天摄取维生素C的最少值,如果低于30mg,身体就会缺乏维生素C,使得部分机能无法正常运作,长期以往,甚至出现坏血症。因此,本实验着手于生活中人们常常饮用的三种饮料和维生素C含片进行测定,比较这四种液体中维生素C含量的大小关系,从而得出哪种饮料适合作为我们日常补充维生素C的来源。
二、实验原理
1.淀粉遇碘变蓝色,而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色。
2.维生素C具有很强的还原性,能将碘还原成碘离子。
三、仪器与药品
仪器:托盘天平、试管架、锥形瓶、玻璃棒、胶头滴管、烧杯、试管、量筒。
药品:碘酒、维生素C含片、美汁源果粒橙、水溶C100、农夫山泉混合果蔬、淀粉。
四、方法与步骤
(一)淀粉溶液的配制
1.用托盘天平称取5g淀粉,用烧杯量取100ml的水。
2.将5g淀粉缓缓倒入盛有100ml水的烧杯中,边加边用玻璃棒搅拌。
(二)维生素C含片的溶解
1.用量筒量取20ml水倒入烧杯中。
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紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量
一、实验目的
1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;
2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理
维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变 ,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH 5~ 6之间稳定)中,在245 nm 波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂
实验仪器:容量瓶(100 ml、1000 ml)、移液管(0.5 ml、5 ml)、烧杯、紫外分光光度计
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实验八 维生素C的定量测定
一、实验目的
1、学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。
2、了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
二、实验原理
维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbic acid)。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来,发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力,并具有化学致癌物的阻断作用。
维生素C是具有L系糖型的不饱和多羟基物,属于水溶性维生素。它分布很广,植物的绿色部分及许多水果(如橘子、苹果、草莓、山楂等)、蔬菜(黄瓜、洋白菜、西红柿等)中的含量更为丰富。维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型。金属铜和酶(抗坏血酸氧化酶)可以催化维生素C氧化为脱氢型。根据它具有还原性质可测定其金属含量。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,还原后变为无色。因此,当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时,维生素C尚未全部被氧化前,则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以,当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化,此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。 本法用于测定还原型抗坏血酸,总抗坏血酸的量常用2,4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。
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