篇一 :醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告

前言

血清蛋白:

血清蛋白是血液中脂肪酸的携带者。当身体需要能量或者需要建造材料时,脂肪细胞就把脂肪酸释放到血液中 ,脂肪酸被血清蛋白获取,并被运送到需要的部位。

牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别,它不是一定的,是多聚物,有的地方测的70 000,这就是一个数据了。在做PCR的时候会用到它。

牛血清蛋白是血液的主要成分,分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。

醋酸纤维薄膜电泳:

醋酸纤维薄膜电泳以醋酸纤维薄膜为支持物。它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。它溶于丙酮等有机溶液中,即可涂布成均一细密的微孔薄膜,厚度以0.1mm—0.15mm为宜。太厚吸水性差,分离效果不好;太薄则膜片缺少应有的机械强度则易碎。

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篇二 :实验三_醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白

生化实验报告 山东大学实验报告 20xx年

3月27日

姓名 张行润 系年级 2009级生科4班 学号 200900140177 同组者 于潜 科目 生物化学实验 题目 醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白 仪器编号 一、 实验目的

掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白的原理和方法。

二、 实验原理

蛋白质是两性电解质。在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白

质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液

中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白

质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带净

电荷不同,故可利用电泳法将它们分离。

血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各

种蛋白质由于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形

状不同,在电场中迁移速度不同。由表可知,血清中5种蛋白质的

等电点大部分低于pH值7.0,所以在pH8.6的缓冲液中,它们都电

离成负离子,在电场中向阳极移动。

实验三醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白

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生化实验报告

实验三醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白

在一定范围内,蛋白质的含量与结合的燃染料量成正比,故可将蛋白质区带剪下,分别用0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进行比色,测定其相对含量。也可以将染色后的薄膜直接用光密度计扫描,测定其相对含量。

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篇三 :实验十:血清醋酸纤维薄膜电泳 实验报告

实验十:血清醋酸纤维薄膜电泳

【实验名称】 :血清醋酸纤维薄膜电泳

09救援一班 第3大组

室温:25°

(一)实验目的:

1.学习醋酸纤维薄膜电泳原理。

2.掌握血清醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质的技术。

3.熟悉血清蛋白组分定量方法,并确定血清中蛋白与球蛋白的比值。

(二)实验原理:

血清绝大多数蛋白质的等电点在pH5.0~7.0。在pH8.6的巴比妥缓冲液中,血清蛋白全部带负电荷,在直流电场中向正电极移动,移动的速度与带电蛋白质颗粒所带电荷成正比,与蛋白质颗粒的大小成反比。如果样品点在醋酸纤维薄膜的同一条线上,电泳相同的时间,不同的蛋白质颗粒移动的距离不同,通过染色,薄膜条上的血清的蛋白质被分离成不同的条带。将此薄膜条透明,可以进行扫描,或将色带剪下,将颜色洗脱,进行比色,都能获得各色带所含蛋白质占血清总蛋白的百分比,并可计算血清中清蛋白/球蛋白比值,正常值为1.5~2.5。

(三)实验材料与仪器:

1.实验仪器材料:1、醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm)2、人血清;3、烧杯及培养皿 数只;4、x光片;5、镊子;6、试管 六只;7、电泳槽;8、直流稳压电泳仪;9、7220型分光光度计;10、剪刀

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篇四 :影响血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验分离效果的因素

影响血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验分离效果的因素:

【1】电泳介质pH的影响:

对于蛋白质及氨基酸等两性物质,电泳介质的pH影响蛋白质的电泳情况 即可决定蛋白质的带电量(Q)。

pI-pH<0,分子带正电荷,向负极泳动;

pI-pH>0,分子到负电荷,向正极泳动;

pI-pH=0,兼性离子,净电荷为零。

pH偏离等电点越远,分子所带净电荷越多,其泳动速度越快。

所以,当┃pI-pH┃接近零时,分子处于等电状态,不移动,影响条带清晰度,从而影响实验分离效果。

【对应注意点】由于血清蛋白质的等电点多在pH 4~6 之间,因此,分离血清

蛋白常用pH 8.6的巴比妥缓冲液或者三羟甲基氨基甲烷(Tris)

缓冲液。

【2】缓冲溶液的离子强度:

离子强度低,电泳速度快,分离区带不易清晰;

离子强度高,电泳速度慢,但区带分离较清晰。

离子强度过低,缓冲溶液的缓冲量小,不易维持pH的恒定;

离子强度过高,则降低蛋白质的带电量使电泳速度减慢。

所以,当离子强度过低时,电泳速度虽快,但易引起分离区带不清晰; 当离子强度过高时,虽分离区带清晰,但点用速度过慢,所以要选择合适

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篇五 :生物化学实验五——醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白 山东大学实验报告

实验五 醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白

13生物基地 201300140059 刘洋 20##-04-29

同组者:张奕

一、实验目的

掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白的原理和方法。

二、实验原理

蛋白质是两性电解质。在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利用电泳法将它们分离。

血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。由表可知,血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH值7.0,所以在pH8.6的缓冲液中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。

在一定范围内,蛋白质的含量与结合的燃染料量成正比,故可将蛋白质区带剪下,分别用0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进行比色,测定其相对含量。也可以将染色后的薄膜直接用光密度计扫描,测定其相对含量。

肾病、弥漫性肝损害、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤、慢性炎症、妊娠等都可以使白蛋白下降。肾病时α1、α2、β球蛋白升高,γ-球蛋白降低。肝硬化时α2、β-球蛋白降低,而α1、γ-球蛋白升高。

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篇六 :实验五 醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白

姓名郭沈杰年级专业2012级生物科学同组者蔡萍萍

学号:12050011012

实验五醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白

   

一、实验目的

掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法。

二、实验原理

蛋白质是两性电解质。当PH>PI时,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动;当PH<PI时,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离集团不同,在同一PH值时,因所带电荷不同,而在电场中的移动速度也不相同,故可用电泳法将其分离。

       本试验以牛血清为材料,醋酸纤维薄膜为支持物,通过点样、电泳、染色、脱色从而得到血清中蛋白质的分离图谱,再进行观察和定量分析。

       血清中含白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等。其等电点低于pH7.0,在缓冲液中(pH8.6)中,电离成负离子,在电场中向阳极移动。

三、实验仪器

1、  牛血清

       2、  醋酸纤维薄膜

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篇七 :醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质(山东大学)

Xxxx

20110014xxxx

生科三班

同组者:xxx

一、 实验目的:

掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法。

二、 实验原理:

蛋白质是两性电解质。在pH小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带静电荷不同,因此在电场中移动速度不同,故可利用电泳法奖它们分离。

血清中含有白蛋白、α-球蛋白,β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同(见表1),在电场中迁移速度不同。由表可知,血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH7.0,所以在缓冲液(pH8.6)中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。

表1 人血清中各种蛋白质的等电点及相对分子质量

蛋白质名称

白蛋白

α1-球蛋白

α2-球蛋白

β-球蛋白

γ-球蛋白

三、 实验器材:

醋酸纤维薄膜(2㎝×8㎝,厚度120μm)、人血清(新鲜、无溶血现象)、培养皿Φ10㎝(×5)、点样器(或玻璃片)、镊子、玻璃棒、电吹风、吸管5.0㎝(×1)、电泳槽、直流稳压电泳仪。

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篇八 :醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白

学号:200900140157  班级:09生科3  姓名:俞华军  时间:2011/03/27

一.实验目的

1.掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法。

2.掌握电泳仪的使用方法。

二.实验原理

     蛋白质是两性电解质。在pH小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极定向移动,在pH大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中想阳极移动。血清中含有书中蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH值得溶液中,所带净电荷不同,因此在电场中的移动速度不同,故可利用电泳法将它们分离。

     血清中含有白蛋白、α—球蛋白、β—球蛋白、γ—球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同(见表一),在电场中迁移速度不同,由表一可知,血清中5中蛋白质的等电点大部分低于pH7.0,所以在缓冲液(pH8.6)中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。

表一 人体血清中各种蛋白质的等电点及相对分子质量

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