实验二 离体蛙心灌流实验
专业: 学号: 姓名:
一、 实验目的
1.学习离体器官(蛙心)灌流的方法。
2.观察理化因素对蛙心活动的影响。
二、 实验原理
蛙心的灌流:蛙心无营养性血管,离体之后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间,心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
心肌:
1.任氏液:正常对照
含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4
和蒸馏水,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2.0.65%NaCl灌流:
3.2%CaCl2灌流:
4.1%KCl灌流:
5.1:10000 E 灌流
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实验名称:
蛙类离体心脏灌流
课程名称: 生理学实验
指导教师:龙天澄张碧鱼陈笑霞
实验人:叶永锋 08344031
学 院: 海洋学院
实验时间: 2009年12月09日
一、【目的要求】
1、学习斯氏离体蛙心灌流法。
2、了解心肌的生理特性。
3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏活动的影响。
二、【原理】
将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。血钾浓度过高时(高于7.9mmol/L),心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降,表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞,严重时心脏可停搏于舒张期。血钙浓度升高时,心脏收缩力增强,过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低,心肌收缩力减弱。血中钠离子浓度的轻微变化,对心肌影响不明显,只有发生明显变化时,才会影响心肌的生理特性。肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强,乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
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蛙心灌流实验
20##级临七3班 廖梦宇 2012021320
一、 实验目的
1. 学习离体蛙心灌流的实验方法。
2. 观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
二、 实验准备
1. 实验对象:蟾蜍
2. 实验器材:BL-420生物信号采集系统、张力换能器、蛙类手术器械1套、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、双凹夹、滴管、小烧杯4个、任氏液。
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实验五 离体蛙心灌流实验
一 实验目的
1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。
2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。
二 实验原理
心脏离体后,如用人工灌流的方法,保持其新陈代谢的顺利进行,则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张,并可维持较长的时间。离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近,因此改变灌流液的理化因素,则可引起心脏活动的变化。
1、任氏液:正常对照
含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4
和蒸馏水,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流:
3、2%CaCl2灌流
4、 1%KCl灌流
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蛙的心脏离体标本制作及观察实验报告
实验动物:牛蛙
实验器材:常用手术器械(手术剪、手术镊),蛙板、蛙钉、探针、培养皿、任氏液
实验步骤与方法:
1. 破坏脑脊髓部位枕骨大孔。
如果蟾蜍四肢松软,呼吸消失,表示脑脊髓已完全破坏,否则按上述方法再进行捣毁。
2. 将其仰卧位固定在蛙板上,用手术镊提起胸骨后端腹部的皮肤,用手术剪剪一小口,然
后由切口将剪刀伸入皮下,向左右两侧锁骨外侧方向剪开皮肤,并向头端掀开皮肤。
3. 用手术镊提起胸骨后端腹肌,在腹肌上剪一小口,将手术剪伸入胸腔内,紧贴胸壁(以
免损伤下面的心脏和血管),沿皮肤切口方向剪开肌肉,再用剪刀剪断左右鸟喙骨和锁骨,使创口呈一个倒三角形。
4. 用手术镊提起心包膜,并用手术剪将心包膜剪开,暴露出心脏。用任氏液进行冲洗。
5. 用手术剪将心脏周围血管剪断,用手术镊提起心脏,将其放入培养皿。
实验观察:(心脏)
在腹面可以看到一个心室,其上方有两个心房。
心室右上角连着一个动脉干,动脉干根部膨大称为动脉圆锥,也称主动脉球。
动脉向上分成左右两支,用玻璃分针从动脉干背面穿过,将心脏翻向头侧。
在心脏背面两心房下端可看到颜色较紫红的膨大部分,为静脉窦。静脉窦是两栖类动物心脏的起搏部位,它与下腔静脉相连。
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一、实验结果
1、正常心搏曲线
2、滴加0.65%NaCl溶液
3、滴加2%CaCl2溶液2滴
4、滴加1%KCl溶液
5、滴加0.01%Adr溶液
6、滴加0.01%Ach溶液
7、加2滴0.01%阿托品和
0.01%Ach
二、分析与讨论
1、正常心搏曲线
从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱,再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点,可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病。
2、滴加0.65%NaCl溶液
滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,灌注液中缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
3、滴加2%CaCl2溶液2滴
加入CaCl2后,心跳略微增强。细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。Ca2+浓度增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。Ca2+浓度增高使Ca2+内流增多,心肌收缩能力增强。
4、滴加1%KCl溶液
滴加1%KCl后,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度也逐渐下降。这是因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。所以心搏曲线振幅减小。
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理化因素对离体心脏活动的影响
实验目的:1.学习离体心脏灌流法;
2.观察不同理化因素对离体心脏活动的影响。
实验原理: 静脉窦能自动产生一定节律的兴奋,是蛙心的正常起博点。在适宜的环境中失去神经支配的离体蛙心在一定的时间内仍可产生规律的节律性兴奋和收缩活动,仍可保持对生物活性物质的反应性。离体心脏和在体心脏相似,其正常节律性活动和正常的反应性,需要一个适宜的理化环境,改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
实验对象:蟾蜍
实验药品和器材:
蛙类手术器械、蛙心插管、蛙心夹、张力换能器、试管夹、双凹夹、万能支架、滑轮、滴管、小杯、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、3%乳酸、1:10000肾上腺素、1:100000乙酰胆碱。
实验步骤:1.离体蛙心的制备:(1)暴露心脏;(2)心脏插管;(3)心脏离体。
2.连接实验装置:(1)用试管夹夹住蛙心插管的上部并固定于支架上,将蛙心夹的连线连接在张力换能器上;(2)将换能器的引线连接于BL-420系统的输入通道。
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大学学生实验报告
开课学院及实验室:生科院生化楼603 2015年3月17日
[实验目的]
1.学习离体蛙心灌流的实验方法。
2.观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
[实验原理]
1.心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境,内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境,观察心脏活动有何变化。
2.心肌细胞的生理特征:
电生理特征:自律性,兴奋性,传导性
机械生理特征:收缩性
[实验对象] 青蛙
[实验器材和药品]
1.器材 生物信号采集系统、张力换能器(10g)、蛙类手术器械1套、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、双凹夹、万能支架、滴管、150ml小烧杯4个、任氏液。
2.药品 0. 65%氯化钠、2%氯化钙、1%氯化钾、1:10 000肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱等。
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