显微镜直接计数法

一、实验目的

1、明确血细胞计数板计数原理；

2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。

二、实验原理

利用血细胞计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。

该计数板（构造如图1所示），是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。

计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。所以无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的即共有400个小格。

每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积为1㎜²，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜³。

其计算方法如下：

设5个中方格中的总菌数为A，菌液稀释倍数为B

1．16×25的计数板计算公式

细胞数/ml=(A/5)×16×10000×B=32000AB个

…… …… 余下全文

南京林业大学实验报告 食品科学与工程专业1201091年级120109112姓名：马天柔日期：2014/04/20

实验六 微生物细胞数量的显微镜直接计数法

一．实验目的：

掌握实用血球计数板进行微生物细胞数量的计数办法。

二．实验器材：

显微镜，血球计数板，盖玻片，酵母菌悬液，滴管。

三．实验方法：

1．将细胞悬液加适量的无菌水充分混匀并稀释至每小格约有5-10个菌体为宜。

2．制片：

先将血球计数板和盖玻片用纱布或绸布擦干净后，把盖玻片盖在计数板的刻度上，用滴管取少量稀释的菌体从盖玻片的一端注入，使菌液沿两玻片空隙间渗入，注意不可有气泡产生，用吸水纸吸干沟槽中流出的多余菌液，切勿将盖玻片抬高。

3．镜检计数：

静置几分钟后，将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后转换成高倍镜进行计数，按对角线方向数5中格即80小格，计数每一小方格细胞的平均数。由于菌体细胞在血球计数室中处于不同的位置，要在不同焦距下才能看到，因为要求观察时要不断调节微调螺旋，防止遗漏，如菌体细胞位于小格的线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。

4．结果计算：

…… …… 余下全文

血球计数板计数法

利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的（0.1㎜³），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。

血球计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。

计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。

每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积为1㎜²，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜³。其计算方法如下：

…… …… 余下全文

实验——微生物细胞大小的测定和显微镜直接计数

目的

1.1  学习接目测微计的校正方法， 了解血球计数板的构造和计数原理

1.2 学习使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小，  掌握用血球计数板测定微生物细胞总数的方法。

2  原理

微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。微生物个体微小，必须借助于显微镜才能观察，要测量微生物细胞大小，也必须借助于特殊的测微计在显微镜下进行测量。

显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组成。后者可直接用于测量细胞大小。它是一块圆形玻片(图7—1)，其中央有精确等分到度，测量时将其放在接目镜中的隔板上。由于目镜测微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小，刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变，所以，使用前须先用镜台测微计进行标定，求出某一放大率下，目镜测微计每一小格所代表的长度，然后用目镜测微计直接测被测对象的大小。镜台测微计是一块中央有精确刻玻片(图7—1)，刻度的总长为lmm，等分为100小格，每小格长10um，专用于对目镜测微计进行标定的。

…… …… 余下全文

实验九  显微镜直接计数法

实验目的

1．明确血细胞计数板计数的原理。

2．掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。

实验内容

1．酵母菌细胞数的测定。

2．酵母菌出芽率的测定。

实验原理

显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。

图9-1 血球计数板构造（一）                 图9-2血球计数板构造（二）

                                  1 血细胞计数板 ；2盖玻片 ；3计数室

…… …… 余下全文

微生物学实验报告

题目：微生物大小的测定及显微镜直接计数法

姓名：      学号：           年级班级：               组别：

同组者：                               时间：

【目的要求】

1．学习并掌握使用显微镜测微尺测定微生物大小的方法。

2．了解血球计数板的构造、明确其计数原理。

3．学习并掌握使用血球计数板测定微生物细胞或孢子数量的方法。

…… …… 余下全文

微生物学实验报告

姓名      年级班级     组别 一组  同组者                           科目 微生物 题目 微生物大小和数量的测定 仪器编号               

一、目的要求

1．学习并掌握使用显微镜测微尺测定微生物大小的方法。

2．了解血球计数板的构造、明确其计数原理。

3．学习并掌握使用血球计数板测定微生物细胞或孢子数量的方法。

二、基本原理

l．  显微测微尺可用于测量微生物细胞或孢子的大小，包括镜台测微尺和目镜测微尺两个部件。镜台测微尺全长1mm，等分为100格，每格0.01mm。用于校正目镜测微尺没小哥的长度.目镜测微尺其中央刻有50等分或100等分的小格.测量前应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大镜下,目镜测微尺每小格所代表的实际长度,再以后作为测量微生物细胞的长度.

…… …… 余下全文

南京林业大学实验报告

实验三 微生物的大小测定和显微镜直接计数法

一实验目的：

学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。

二实验材料;

显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、酵母菌悬液、盖玻片、无菌滴管、吸水纸、擦镜纸。

三实验步骤:测定酵母菌细胞的大小

测定的工具：目镜测微尺 镜台测微尺

目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差，因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。

（一）目镜测微尺的校正：在40×镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动载物台，使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合，然后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10?m，所以可得： 目尺每格长度(?m)=（台尺格数×10）/目尺格数

（二）菌体大小的测定：制作一片酵母菌的盖片，取下镜台测微尺，将盖片置于载物台上，然后在40×镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。 实验结果目镜测微尺标定结果：

__10_×镜下目镜测微尺每格长度是 1.25 μm。

…… …… 余下全文