高中生物必修一实验归纳
实验一 使用高倍显微镜观察几种细胞
1、高倍镜的使用步骤:
(
1)在低倍镜下找到物象,将物象移至视野中央;
(2)转动转换器,换上高倍镜。
(3)调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。如果光线较暗时,可用凹面反光镜来对光,同时选用较大的光圈;如果光线明亮时,可用平面反光镜来对光,同时选用较小的光圈。
(4)调节细准焦螺旋,使物象清晰。换用高倍镜后不能使用粗准焦螺旋。
2、低倍镜和高倍镜的区别:
透镜大小 镜头长短 视野亮度 物像大小 细胞数量
低倍镜 小 短 亮 小 多
高倍镜 大 长 暗 大 少
3、污点位置的判断:用显微镜观察玻片标本时,目镜、物镜、所观察的材料是在同一直线上的,只要分别转动镜头或移动玻片标本,看污物是否随之而动,就可做出正确判断。
实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
(一)可溶性还原糖的检测和观察
1、实验原理及化学试剂:
斐林试剂与可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)反应,生成砖红色沉淀。
Ps:斐林试剂要现配现用。
甲液(质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液)与乙液(质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液)等量均匀混合生成蓝色Cu(OH)2,Cu(OH)2与可溶性还原糖发生反应。
淀粉、蔗糖等不能与斐林试剂发生颜色反应。
2、实验过程:
选材(应选含糖量较高、颜色为白色或浅色的植物组织,以苹果、梨为最好) 研磨过滤
组织样液 加入斐林试剂(现配现用) 摇匀
水浴加热 观察颜色反应(浅蓝色 棕色 砖红色沉淀)。
(二)脂肪的检测和观察
1、实验原理及化学试剂
苏丹Ⅲ染液:把脂肪物质染成橘黄色
苏丹Ⅳ染液:把脂肪物质染成红色
2、实验过程
选材(选含脂肪的种子,以花生种子为较好) 浸泡 制作花生子叶临时转片(徒手切片,切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊) 滴3滴苏丹Ⅲ染液染色 用体积分数为50%的酒精洗浮色 显微镜观察(先用低倍镜,找到子叶最薄处,并移到视野中央,再换高倍镜,调整细焦螺旋观察,可见已着色的脂肪颗粒)。
(三)蛋白质的检测和观察
1、实验原理及化学试剂
双缩脲试剂:与蛋白质发生作用,产生紫色反应。(在碱性溶液中,Cu2+与蛋白质发生反应)
双缩脲试剂A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
双缩脲试剂B液:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
2、实验过程
选材(豆浆或鸡蛋蛋白) 取组织样液加入试管中 加入双缩脲试剂A液
加入双缩脲试剂B液 摇匀观察,出现紫色。
(四)淀粉的检测和观察
1、实验原理及化学试剂:淀粉遇碘变蓝。
2、实验过程:选用富含淀粉的植物组织(如马铃薯) 将组织样液注入试管
滴加碘液 观察颜色反应。
实验三 观察DNA和RNA在细胞中的分布
1、实验原理:甲基绿将细胞核中的DNA染成绿色,吡罗红将细胞质中的RNA染成红色,用甲基绿吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
盐酸的作用:①改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞
②使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
2、实验过程:
取口腔上皮细胞制片 盐酸水解 冲洗涂片
染色 观察(先用低倍镜,后用高倍镜)。
3、实验结果:真核的DNA主要存在于细胞核中,此外,在线粒体和叶绿体中也有少量的DNA分布。RNA主要存在于细胞质中,少量存在于细胞核中。
实验四 通过模拟实验探究膜的透性
(一)实验目的与原理
生物膜(细胞膜、细胞器膜、核膜)具有选择透过性,即对物质的输入和输出有选择性,可以让水分子自由通过,一些小分子和离子也可以通过,而其他的离子、小分子和大分子则不能通过。
玻璃纸(或鸡肠衣、鸡蛋卵壳膜、透析膜)是一种半透膜。
扩散:某种物质的分子从浓度高的地方向浓度低的地方移动的过程。
(二)材料用具
质量分数为15%的硫酸铜溶液,质量分数为30%的蔗糖溶液,蒸馏水,红墨水;250mL烧杯,长颈漏斗,铁架台,玻璃纸(或鸡肠衣、鸡蛋东卵壳膜、透析膜),棉线。
(三)方法步骤
1、取两个长颈漏斗,分别在漏斗口处封上一层玻璃纸;
2、在A漏斗中注入硫酸铜溶液;B漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少许红墨水,使其略呈红色;
3、将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中,在两漏斗的液面处做标记;
4、静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化,并将观察结果填入下表。
(四)讨论
如果将玻璃纸换成塑料膜,装置A、B中的蒸馏水的颜色将都不发生变化。原因是因为塑料膜不是半透膜。
实验五 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
1、实验原理
①高等绿色植物的叶绿体存在于叶片中。
②叶绿体一般是绿色的椭球或球形,它的形态和分布不需要染色就可以用高倍镜观察。
③健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
④线粒体的形态和分布可用高倍镜观察。
2、实验过程
(1)观察叶绿体:制作藓类叶片(或菠菜叶下表皮)临时装片,用显微镜观察叶绿体(低倍显微镜到高倍显微镜),注意观察叶绿体的形态和分布,绘图。
(2)观察线粒体:制作人口腔上皮细胞临时装片,用低倍显微镜观察,找到观察的对象后移到视野中央,再高倍显微镜观察,细胞内蓝绿色小颗粒即是线粒体,观察其形态和分布。
实验六:尝试制作真核细胞的三维结构模型(略)
实验七 植物细胞的吸水和失水
一、实验原理
当细胞液的浓度低于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁逐渐分离,即发生质壁分离。
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水分就透过原生质层进入液泡中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,即植物细胞发生质壁分离复原。
常用的化学试剂:0.3g/mL蔗糖溶液。(试剂浓度越高,发生现象就越明显。但如果试剂浓度过高,则细胞会因为过度失水而死亡,不能发生质壁分离复原。)
二、实验过程
制作洋葱鳞片叶表皮细胞的临时装片 显微镜观察液泡的大小和原生质层的位置 滴入蔗糖溶液 显微镜观察(观察到质壁分离现象) 滴入清水 显微镜观察(发生质壁分离复原)。
实验八:比较过氧化氢在不同条件下的分解
一、操作指南
1.材料:新鲜的质量分数为20%的肝脏(如猪肝、鸡肝)研磨液。
2.用具:量筒,试管,滴管,试管架,卫生香,火柴,酒精灯,
试管夹,大烧杯,三脚架,石棉网,温度计。
3.试剂:新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液,质量分数为3.5%的FeCl3溶液。
4.操作要点
(1)取4支洁净的试管,分别编上序号1、2、3、4,向各试管内分别加入2 mL过氧化氢溶液,按序号依次放置在试管架上。
(2)将2号试管放在90 ℃左右的水浴中加热,观察气泡冒出的情况,并与1号试管作比较。
(3)向3号试管内滴入2滴FeCl3溶液,向4号试管内滴入2滴肝脏研磨液,仔细观察哪支试管产生的气泡多。
(4)2~3 min后,将点燃的卫生香分别放入这两支试管内液面的上方,观察哪支试管中的卫生香燃烧猛烈。
二、需要注意的几个问题
(1)一定要保证肝脏的新鲜程度。新鲜肝脏中含有较多的过氧化氢酶,如果肝脏不新鲜,在微生物的作用下,过氧化氢酶可能被分解。另外,肝脏一定要充分研磨,以保证肝细胞破裂,否则可能影响实验效果。
(2)试管壁一定要清洗干净,否则在温度不高的情况下,会在试管壁上形成小气泡,从而干扰实验结果的观察。
(3)在测定水浴的温度时,温度计的水银球不要接触正在加热升温的烧杯的底部,否则测出的水温会高出所需要的正确温度。
(4)在做“操作要点”的第3步和第4步时,注意不要用拇指堵住试管口并用力振荡,否则4号试管内会产生大量的气泡,而且气泡的体积很大,会在试管中堆积起来,一直堆到试管口,这时,如果将点燃的卫生香放入4号试管中,会将卫生香浸灭。
第3步的操作可以这样进行:滴入催化剂后,将两支试管放在试管架上,仔细观察哪支试管产生的气泡多。这样做的优点是,第3步的现象十分明显,可以看出4号试管明显比3号试管放出的气泡多。同时,4号试管不会堆积大量的气泡,这时,再进行第4步的操作,效果会十分明显。
(5)不要混用滴管。混用滴管的直接后果是实验的现象不一定真实可靠。
三、实验结果
1.90℃时过氧化氢分解释放氧气的速率大于常温下过氧化氢分解释放氧气的速率。
2.过氧化氢酶催化过氧化氢分解释放氧气的速率大于FeCl3催化过氧化氢分解释放氧气的速率。
四、实验结论
加热能够促进过氧化氢的分解;酶的催化效率高于无机催化剂,酶的催化作用具有高效性。
实验九 探究影响酶活性的因素
一、实验原理
淀粉遇碘后,形成紫蓝色络合物。淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,这两种物质遇碘后,形成紫蓝色的复合物,但是能与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色沉淀。
二、实验过程
(一)探究温度对淀粉酶活性的影响
(二)探究pH对淀粉酶活性的影响
三、结论:酶的活性受温度和pH的影响。
实验十 探究酵母菌的呼吸方式
一、实验原理
酵母菌属于真核单细胞生物,在有氧、无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧菌。可用于探究细胞呼吸的不同方式。
通过控制有氧呼吸和无氧呼吸,可以探究酵母菌在不同条件下的呼吸产物。
CO2可使澄清石灰水变浑浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。因此可用这两种溶液来检测酵母菌培养液中的CO2产生情况。
橙色的重铬酸钾在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应,变成灰绿色,可用来检测乙醇的产生情况。
二、实验过程
1、酵母菌培养液的配制:目的是保证酵母菌在整个实验过程中正常生活。
两份:10g新鲜食用酵母菌+240mL质量分数为5%的葡萄糖液。
2、检测CO2的产生
安装好实验装置:如下图
甲 乙
甲图用于检测有氧条件下CO2的产生;乙图用于检测无氧条件下CO2的产生。
装置甲设置左边第一个锥形瓶的目的是吸收通入空气中的CO2。
装置乙的B瓶应封口放置一段时间之后,再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶,这样做的目的是是空气中残余的O2消耗尽。
甲、乙装置石灰水都变混浊,装置甲混浊快且程度高。
得出结论:酵母菌在有氧条件下产生的CO2比无氧条件下产生的CO2多。
3、检测酒精的产生
A试管中的酵母菌培养液滤液+溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液(混合均匀):颜色不变。
B试管中的酵母菌培养液滤液+溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液(混合均匀):颜色变灰绿色。
得出结论:酵母菌在有氧条件下不产生酒精,在无氧条件下产生酒精。
实验十一 绿叶中色素的提取和分离
一、实验原理
剪碎叶片并加入二氧化硅研磨,目的是破坏叶表皮、细胞壁、细胞膜、液泡膜,使研磨充分。
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂如无水乙醇,可以用无水乙醇提取色素。加入碳酸钙可以防止色素被破坏。
绿叶中的各种色素都能溶解于层析液中,但在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢。这样,各种色素会随层析液在滤纸上的扩散,因扩散速度不同而分离开。
二、实验步骤
①提取绿色叶片中的色素(研磨绿叶,同时加入二氧化硅、碳酸钙和无水乙醇,过滤得到色素滤液);
②制备滤纸条;③画滤液细线;④利用层析液分离色素;⑤观察实验结果。
三、实验成功的关键:
①叶片要新鲜,颜色要深绿。②研磨要迅速、充分。③滤液收集后,要及时用棉塞将试管塞紧,以免滤液挥发。④滤液细线不仅细、直,而目含有比较多的色素(可以画二三次)。
⑤滤纸上的滤液细线不能浸入层析液,否则色素会溶解在层析液中。
四、实验结果
滤纸条上色素带有四条,分别是(由上到下)
橙黄色的胡萝卜素;黄色的叶黄素;
蓝绿色的叶绿素a;黄绿色的叶绿素b。
胡萝卜素和叶黄素统称为类胡萝卜素,主要吸收蓝紫光。
叶绿素a和叶绿素b通常为叶绿素,主要吸收红光和蓝紫光。
五、实验说明
四种色素中,含量最多的是③叶绿素a,色素带最宽的也是③叶绿素a;含量最少(色素带最窄)的是①胡萝卜素,扩散速度最快的也是①胡萝卜素;扩散速度最慢的是④叶绿素b;相邻两条色素带之间距离最远的是①胡萝卜素和②叶黄素,最近的是③叶绿素a和④叶绿素b。
实验十三 模拟探究细胞表面积与体积的关系(细胞大小与物质运输的关系)
一、实验原理
在相同时间内,物质扩散进细胞的体积与细胞的总体积之比可以反映细胞的物质运输效率。用含酚酞的不同大小的琼脂块模拟不同大小的细胞,酚酞与NaOH相遇,呈紫红色,以紫红色出现的深度,模拟物质扩散进细胞的快慢。
二、方法步骤
将琼脂块切成三种正方形——用NaOH浸泡10min——观察各块切面上NaOH的深度。
三、实验结论
琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减少;NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比随着琼脂块的增大而减少。
四、相关知识
制约细胞体积的因素有三个方面:
一是细胞的表面积与体积的关系是两者成反比,细胞体积越小,其相对表面积越大,细胞与周围环境交换物质的能力越大。
二是细胞核与细胞质之间有一定的关系,一个细胞中二者体积之比一般为1/3,细胞核所含遗传信息有一定限度,对细胞活动的控制能力有一定限度。
三是细胞内物质的交流受细胞体积制约,细胞体积过大,会影响物质流动速度,细胞内的生命活动就不能灵敏地控制和缓冲。
实验十四:观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
1、材料:洋葱根尖(葱,蒜)
2、步骤:
(一)洋葱根尖的培养
(二)装片的制作
制作流程:解离→漂洗→染色→制片
1. 解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液). 时间: 3~5min .
目的: 使组织中的细胞相互分离开来.
2. 漂洗: 用清水漂洗约3min.
目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min
目的: 使染色体着色,利于观察.
4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片.
目的: 使细胞分散开来,有利于观察.
(三)观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。
2、换高倍镜下观察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。其中,处于分裂间期的细胞数目最多。
必修本
第4课时 实验:生物组织中可溶性
还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
郑梁梅高级中学 朱靖亚
知识精华
一、可溶性还原糖的鉴定原理:
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基,因此叫还原性糖;蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基,因此叫非还原性糖,不具有还原性。实际上本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否,而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
可溶性还原糖与斐林试剂(质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成)混合后,可以生成砖红色沉淀。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,棕色 砖红色
二、脂肪的鉴定原理:
鉴定生物组织中是否含有脂肪时,可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ,苏丹Ⅲ染液遇脂肪的染色反应为橘黄色,苏丹Ⅳ染液遇脂肪的染色反应为红色。
三、蛋白质的鉴定原理:
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。
2在碱性溶液NaOH中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与Cu+ 作用,形成紫色或紫色的络合
物,这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应,从而用来鉴定蛋白质的存在。
题例领悟
例1:用斐林试剂鉴定可溶还原糖时,溶液的颜色变化过程为:
A、浅蓝色 棕色 砖红色 B、无色 浅蓝色 棕色
C、砖红色 浅蓝色 棕色 D、棕色 绿色 无色 解析:斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后,立即生成浅蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此,答案为A
例2:将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是:
A、碘液、苏丹Ⅲ溶液 B、双缩脲试剂、碘液
C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液 D、碘液 、斐林试剂
解析:白浆为淀粉,淀粉遇碘变蓝,黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。因此,答案为B
自我评价
一、选择题:
1、徒手切片时的刀口方向应是 ( )
A、向前 B、向内 C、向左 D、向右
2、在鉴定蛋白质样品时,加双缩脲试剂的正确操作方法是 ( )
A、先加A液,混合后再加B液 B、先加B液,混合后再加A液
C、A、B液混合后立即加入 D、上述方法都可以采用
3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是 ( )
A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定
B、花生种子含脂肪多且肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料
C、大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料
D、鸡蛋清蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料
4、下列关于实验一操作步骤的叙述中,正确的是 ( )
A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定
B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴
C、鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液
D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现用
5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片,当转动细准焦螺旋时,有一部分细胞较清晰,另一部分较模糊,这是由于 ( )
A、反光镜末调好 B、标本切得厚薄不均
C、细准焦螺旋末调好 D、显微镜物镜损坏
6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时,事先留出一些组织样液的目的是 ( )
A、与反应后混合液的颜色做对比 B、失败后再重做一次
C、下次实验再用 D、组织样液过多颜色反应不明显
二、非选择题
在用花生种子做脂肪鉴定实验时,基本步骤是:取一粒浸泡过 h的花生种子,去掉种皮;取花生的 ,进行徒手切片;选取 材料放在载玻片中央;用滴管在材料上滴2~3滴 染液,染色1min;用吸水纸吸去多余的染液,在材料上滴1~2滴体积分数为 溶液,洗去浮色;再用吸水纸吸去多余的洗液,在材料上滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片;在低倍显微镜下观察,会发现材料细胞中存在大量被染成 色的圆形小颗粒。说明材料中存在 。要想进一步看清楚视野右上方的细胞时,应将装片向 移动,使细胞位于视野中央,再转动 换上 ,再调节 就可以看清楚。
自我评价答案:
1、B 2、A 3、A 4、B 5、B 6、A
非选择题
1、3~4 子叶 最薄的一片 苏丹Ⅵ 50%的洒精 脂肪 右上方
转换器 高倍物镜 细准焦螺旋
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