实验一：细菌、放线菌的形态

      观察与革兰氏染色

姓名:陈虹邑

学号：200911233012

系别：生物科学与生物技术

班级：周二第一组

试验日期：20##年9月13日

同组成员：邢悦婷  呼波

一、     实验目的及意义

1、巩固油镜的使用;

2、掌握细菌形态观察的基本方法；

3、了解细菌的基本形态和结构。

4、了解革兰氏染色的原理；

5、初步掌握细菌涂片的方法；

6、掌握革兰氏染色的方法；

7、掌握放线菌的涂片方法；

8、观察基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。

二、     实验材料与方法

【实验材料】

菌种：溶血链球菌(Strptococcus haemolyticus),螺菌(Spirillum sp.) ,巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium), 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis), 普通变形菌(Proteus vulgaris), 丙酮丁酸梭菌(Clostridium acetotylicum), 褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)等细菌永久装片，放线菌5406，金黄色葡萄球菌（staphulococcus aureus），大肠杆菌（E. coli）

试剂：香柏油、无菌水、结晶紫、番红或沙黄、95%酒精、碘液

仪器及用具：显微镜、擦镜纸、吸水纸、小滴管，接种环、载玻片、盖玻片、酒精灯

【实验方法】

细菌的观察

1、在载玻片上滴一小滴水，用接种环，采用无菌操作，将细菌挑起，涂到载玻片上，盖上盖玻片。

2、用显微镜对细菌进行活体观察。观察时先用低倍镜，再用高倍镜，有必要的话，再用油镜观察。

3、观察细菌的永久装片，观察时先用低倍镜，再用高倍镜，有必要的话，再用油镜观察，找到细菌的各种结构。

放线菌的观察

1、玻璃纸法：用剪刀，剪下小块的玻璃纸，压片，放在显微镜下观察放线菌的基内菌丝、气生菌丝。

2、印片法：将盖玻片在火焰上稍加热，然后盖到培养基的玻璃纸上，稍用力压一下。取下盖玻片，放到载玻片上，进行镜检，主要观察放线菌的孢子丝。

革兰氏染色

三、     实验结果

1、观察到各种细菌的形态，以及一些细菌的特殊的结构。如苏云金芽孢杆菌的芽孢、伴胞晶体；固氮菌的荚膜等。具体实验结果见附图。

2、枯草芽孢杆菌被染成紫色，可以清楚看见细菌里芽孢，也有芽孢已经释放出来。变形杆菌和金黄色葡萄球菌均被染成紫色。

3、混合的大肠杆菌部分被染成粉红色，是大肠杆菌，另外染成了紫色的菌是污染菌。

4、玻璃纸观察发观察到了放线菌的基内菌丝、气生菌丝。气生菌丝较粗，颜色较深，基内菌丝较细，颜色较浅。

5、用印片法看到了放线菌的孢子丝。

四、     实验分析与讨论

1、看细菌形态的时候，要注意调节倍数显微镜的倍数以及光线，来看清一些特殊的结构，如：鞭毛等。

2、取菌的时候要注意量一定要少，而且要涂开。否则，在视野里看到的菌都重叠在一起，看不清楚。

3、染色的时候要主要把握好染色和脱色的时间，否则会对结果产生影响。在染色巨大芽孢杆菌的时候，由于脱色时间过长，被染成了粉红色，产生了假阴性的结果。

4、观察放线菌的基内菌丝和气生菌丝的时候要主要调节细准焦螺旋钮，细看。因为它们的结构是立体的。不在一个平面上，所以要调节焦距，以便更好观察。

五、     参考文献

《微生物学实验指导》，黄秀梨，辛明秀，高等教育出版社2008.12，

 

第二篇：发酵实验报告

微生物工程实验报

学 院： 生命科学学院

专 业： 生物技术

年 级：

学 号：

学生姓名：

组 别：第一组 指导老师：郭旭辉老师

时 间：20xx年6月15日

目 录

目 录 ……………………………………………1 摘 要………………………..……………………2

关键词 ………………..…………………………..2 前 言……………………..………………………3

实验材料与方法……………………………………..5

实验结果与分析……………………………………..8

展 望……..………………………………………..11

附 录………..……………………………………..12 原始数据………………………………………….13 参考文献………………………………………….14

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摘要：发酵工程属于生物技术的范畴，生物技术又称生物工艺学现代生物技术作为一门新兴的高科技术产业，在发酵技术中一般包括微生物细胞或动植物细胞的悬浮培养，或利用固定化酶，固定化细胞所做的反应器加工底物，以及培养加工后产物大规模的分离提取等工艺。主要是在生物反应过程中提供各种所需的最适环境条件。试验采用L1523小型发酵罐对枯草芽孢杆菌进行发酵生产，发酵液为液体牛肉膏蛋白胨培养基。运用吸光光度法来表示生物量，绘制此过程枯草芽孢杆菌的生长曲线，通过革兰氏染色确定芽孢产生情况，确定放罐时间等。

Abstract: Fermentation engineering are the areas of biotechnology, biotechnology, also known as biotechnology, modern biotechnology as a new High-Tech Industry.In fermentation technology in general, including microbial cells or animal and plant cell suspension culture, or the use of immobilized enzyme, the immobilized cell reactor made processing of the substrate, as well as a product of the culture after processing large-scale separation and extraction process. Mainly provide all the necessary optimum environmental conditions in the bioreactor process. Using L1523 small fermentation tank fermentation of Bacillus subtilis fermentation broth for the liquid beef extract peptone medium. Then using photometric method to represent the biomass this process is the growth curve of Bacillus subtilis, Gram stain to determine Bacillus produce a situation to determine the time of the release tank.

关键词：发酵工程、生物技术、分离、提取

Keyword：Fermentation engineering、biotechnology、separation、extraction

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前 沿：

发酵工程（Fermentation Engineering）属于生物技术的范畴，生物技术又称生物工艺学现代生物技术作为一门新兴的高科技术产业，它的生命力在于他对社会经济和发展的各个方面都带来了极大冲击和影响。

发酵工程是指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的技术。发酵工程由于涉及到生物催化剂，因而与化学反应有关。由于生物技术的最终目标是建立工业生产过程为社会服务，因而该生产过程可称为生物反应过程（亦称为生化反应过程）。

在发酵技术中一般包括微生物细胞或动植物细胞的悬浮培养，或利用固定化酶，固定化细胞所做的反应器加工底物（即有生化催化剂参加），以及培养加工后产物大规模的分离提取等工艺。主要是在生物反应过程中提供各种所需的最适环境条件。如酸碱度、湿度、底物浓度、通气量以及保证无菌状态等研究内容。

生物技术产品具有多样性，各个学校的教学资源和课时不同，所进行的实验种类不同。本实验内容根据本校的具体条件进行安排。安排的思路是以最简洁有效的方式针对发酵过程的重要要素进行实验，便于学生对教学内容有个较好的认识，理顺学习思路，为进行社会科学实践打下良好基础。

小型发酵罐是实验室进行小规模试验研究的必备装置，瑞士比欧生物工程公司生产的L1523型小型发酵罐主要由罐体、通气系统、搅拌系统、加热及控温系统、监测及控制系统等几个部分组成。

罐体：罐体是发酵生产微生物菌体或代谢产物的场所，一般由不锈钢、陶瓷或特种玻璃制成，其体积根据需要可从0.1升到100升不等。L1523型发酵罐的体积为19升，发酵罐的外形由罐盖、罐体和罐底组成。罐盖：由耐腐蚀的不锈钢构成，其上有十二个圆孔，分别用于安装pH探头、温度探头、溶解氧探头、气压表、调节pH的补酸、补碱管、排气管过滤器、通气管、放样管和安全阀，靠近外侧的两个孔一般用塞子塞住，主要用于接种、加消泡剂等。罐体：由耐高温、高压的特种玻璃制成，其内 3

有各种探头、通气管、放样管、搅拌器和挡板等。罐底：由具夹层的不锈钢制成，夹层内与加热器和冷却水联通，通过此夹层与发酵罐进行热交换，以控制罐内温度。搅拌器也是通过罐底进入罐体的，称为下搅拌，此外在罐底还有空气分布器，能使压缩空气均匀分布于发酵罐中。

通气系统：L1523型发酵罐适用于好气性微生物的发酵生产，其空气来源于空气压缩机。由空压机压缩的高压空气经除油、除水和减压装置减压后，通过预先灭菌的空气过滤器过滤除菌，然后再经空气分布器、搅拌器和挡板等的共同作用，使无菌空气均匀地分布到整个发酵罐。

搅拌系统：发酵罐的搅拌装置可分为上搅拌和下搅拌两种类型，L1523型发酵罐属于下搅拌，其搅拌器由搅拌电机驱动，转速高达1000rpm。

加热与控温系统：L1523发酵罐为原位灭菌发酵罐，利用自带的小型加热器(锅炉)，可进行培养基的灭菌和保温，再借助于冷却水(自来水)可使发酵罐内的灭菌温度和发酵温度精确地保持恒定(误差为±0.1℃)。

监测及控制系统：小型发酵罐一般都配备有监测控制系统，可以监测和控制搅拌器的转速、灭菌和发酵的温度、pH值、溶解氧量等。L1523型发酵罐可通过计算机实现自动控制，中间可借助蠕动泵和补料系统自动补料和调节pH值等。

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正文：

一、实验材料与方法

1、实验材料

1.1菌种

枯草芽孢杆菌V1J，黑曲霉菌株

1. 2 培养基

1.2.1 斜面菌种培养基

牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基：牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，琼脂20.0g，水1000ml，pH7.2~7.4，0.1Mpa，121℃，灭菌30min。

配制500ml固体培养基，分装入20支15×150mm试管(每管约5ml)和3个250ml三角瓶中，包装、灭菌。试管摆成斜面。

1.2.2 三角瓶种子培养基

牛肉膏蛋白胨液体培养基：牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，水1000ml，pH7.2~7.4，0.1Mpa，121℃，灭菌30min。

配制液体培养基1000ml，分装到10个250ml三角瓶中，每瓶100ml，灭菌。

1.2.3 PDA培养基的制备

称取去皮马铃薯200g，切片，放入小锅中，加入1000ml水，加热煮沸10—15分钟，用8层纱布过滤。取滤液加入蔗糖20g、琼脂20g，加热熔化后补足水分（自然pH），然后分装到20支15×150mm试管（5ml/支）和6个250ml三角瓶（150ml/瓶）中，于0.1Mpa，121℃灭菌30min。

1.3试剂及药品

马铃薯、葡萄糖、琼脂、蛋白胨、牛肉膏、蒸馏水、NaCl、NaOH、H2SO4、酒精（75%和95%各一瓶）、消泡剂（豆油）、沙黄、孔雀绿等

2、方法

2.1 灭菌剂实验前准备

2.1.1 1ml无菌吸管：每组30支，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟。

2.1.2 无菌水：18×180mm试管，每支装9ml水，每组40支，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟（作标准曲线10倍稀释法用）；另配3-5个三角瓶无菌水（总1升）；另配10余支4.5ml 15×150mm (稀释、抑菌试验作对照，洗菌（枯草芽孢杆菌洗菌接种、黑曲霉洗菌涂布等）。

2.1.3 无菌培养皿：每组40套，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟。

2.1.4 无菌大试管（18×180mm试管）：每组20个，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟。主要用于发酵液取样方便，量足，取样时接近1/2。不够再灭菌使用。

2.1.5 无菌吸管（可用无菌枪头取代，用于吸少量液体涂布和作抑菌试验等）：1ml吸管，每组20支，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟。

2.1.6 空气过滤器的灭菌：空气过滤器针尖先用纱布包扎好，然后再用包装纸和 5

绳子将空气过滤器整体包装好，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟。

2.1.7 牛津杯的灭菌：将36只牛津杯装入培养皿中，每皿10只，用包装纸包装好，于0.1Mpa，121℃灭菌30分钟。

2.1.8 消泡剂的灭菌：量取100ml豆油倒入250ml三角瓶中（每组3~4瓶），包装好后于0.1Mpa，121℃，灭菌30分钟。

2.1.9 1N H2SO4和1N NaOH溶液灭菌，用来调节发酵过程中的pH。 配制75%和95%的酒精棉球各一瓶

2.2 培养方法

2.2.1 斜面菌种的培养

将已活化两次的试管斜面菌种接种到牛肉膏蛋白胨试管斜面上，30℃培养18~20小时，即为斜面菌种。

2.2.2 种子液的制备

将试管斜面用4.5ml无菌水洗下，然后接种到250ml三角瓶培养基中，每瓶一管，接三瓶，于30℃，150rpm条件下，振荡培养18~20小时（一级种子）。由三角瓶移接入另外500ml三角瓶（或更多的250ml三角瓶）中扩大培养（此为二级种子），保证二级种子接种量7-10%（如13L发酵液则为910-1300ml左右，其中还包括预留一部分作标准曲线用）。

2.2.3 发酵生产

2.2.3.1 细菌细胞浓度的测定（比浊法）

2.2.3.2 标准曲线的制作

取无菌水9支，编号，将在30℃、150rpm条件下培养20~22小时的枯草杆菌细胞按二倍系列稀释法进行适当稀释，使其浓度分别为原液、1/2、1/4、1/6、1/8、1/10、1/12、1/16、1/32、1/64原液，同时以无菌水作为空白对照，利用分光光度计测定其在580nm波长下的O.D.值，并求出原液OD值的平均值；然后，采用平板菌落计数法

-6-7-8-7（注意：这是十倍稀释法）测定其中的细胞数量（大约10、10、10，如太浓则10、

-8-910、10，每一个梯度用三个重复），换算出原液细胞数量的平均值。（注：为保证标

-5-6-7准曲线成功率，加之不知何种浓度稀释适于涂布平板计数，建议学生10、10、10、

-8-9-6-7-810、10各个梯度各3个重复，如果还不成功，则可减少梯度，如选10、10、10三个梯度3重复再作一次，具体情况视前面平板的菌落长相而定其梯度，但保证三个重复以保证其成功率）。以O.D.值作为纵坐标，每ml样品中的细胞数作为横坐标，曲线换算，绘制标准曲线。

2.2.3.3 发酵液细胞浓度的测定

从取样管放出10ml左右的发酵液至无菌大试管（18×180mm试管）中，在580nm波长下，测定发酵液的O.D.值，对照标准曲线，可知该发酵液的细胞浓度。

2.2.3.4 发酵培养基的灭菌

每组配制13L牛肉膏蛋白胨液体培养基（pH7.4），另再加0.1%的酵母膏，用乳胶管小心地加入发酵罐中，然后旋紧塞子，安装好防护罩，按下面的方法灭菌：

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（1）检查水、电、气以及发酵罐的密封性是否正常。如正常即可灭菌。

（2）打开进水阀，调节水压使水压表指针指示在0.2~0.4之间，使水充满加热器，防止烧坏加热器。（出水阀近关闭情况下，达到0.4，此时出水阀虽然关闭，但进水阀打开，此外水压也满足要求，所以水能充满加热器不至于烧坏，当灭菌结束降温时，热水会走另一条旁路（非出水阀的另一条出口）泄压。）

（3）打开发酵罐的总电源。

（4）打开搅拌器的电源开关，使搅拌器转速控制在300rpm，培养时根据要求调整。

（5）适当开启排气口排气，但应注意：排气口不能开得过大，否则，培养基的水分损失严重！！

（6）打开温度控制器的电源开关，将灭菌温度设定为121℃，灭菌时间设定为30min，发酵温度设定为30℃。启动灭菌开关，进行自动灭菌。

（7）灭菌结束后，发酵罐会自动降温，当温度低于95℃时，通过无菌操作，安装好已灭菌的空气过滤器，（即关上门窗，解开绳子，放好95%酒精在安装孔的周围，关上进气口，开大出气口，保证极低正压以保安全和防止杂菌落入罐内，先旋松螺盖，点燃95%酒精，在火上操作装上空气过滤器。工具有：尖嘴钳、镊子、95%和75%的酒精）然后，通入无菌空气，使培养基快速降温，并使发酵罐保持一定的正压，以减少污染。

（8）当温度低于35℃时即可接种发酵。（操作同（7）里类似 ）

2.2.3.5 接种

在发酵罐的罐盖上选择一个塞子，先用75%的酒精棉球在其周围消毒，同时消毒尖嘴钳，然后在塞子周围放置吸满无水酒精的棉花，点燃酒精，用钳子小心打开塞子，取出置于火焰上，将三角瓶种子按5%的接种量迅速倒入发酵罐内，旋紧塞子。

2.2.3.6 发酵

在灭菌达到121℃时校正溶氧电极的读数为零，接种后当温度达到培养温度、搅拌速度稳定、通气量稳定时，校溶氧电极至95%以上。

搅拌速度设定为350rpm，发酵温度设定为28℃，开始计时发酵。发酵时间根据细菌生长情况而定，一般约70小时。

2.2.3.7 绘制枯草杆菌的生长曲线

发酵培养基接种后，从0、1、2、3、4、6、8、10、12、14、16、18、20、24、26、28、30、??小时，分别取样测定发酵液的O.D.值，绘制出枯草杆菌的生长曲线。

枯草杆菌的镜检

发酵接种以后，12，24，36，??每隔12小时芽孢染色镜检一次，观察芽孢和菌体情况（看芽孢何时长出来和芽孢何时脱落），确定是否可下罐（一般芽孢数多，且脱落宜下罐。）

2.2.3.8 抗生素的检测

将黑曲霉用PDA培养基活化，然后接种到PDA试管斜面上，培养36~48h。取3套无菌培养皿倒入PDA培养基，冷凝后置30℃温箱中过夜。将培养好的黑曲霉试管斜面 7

用4.5ml无菌水洗下，然后将菌悬液分别倒入三套PDA平板上，用玻璃涂棒涂匀。（操作：吸0.3ml左右到一平板，涂布，其它平板相同操作）。采用无菌操作，用无菌小镊子将牛津杯轻轻放在培养基上。每皿放两只，并作好标记（参见下图）。

分别将发酵20、30、40、50、60、70h的发酵液用无菌18×180mm大试管取出，用移液枪吸取0.25~0.3ml(0.5ml会溢出)发酵液至一只牛津杯内（发酵液可预先用离心管离心，10000转16分钟，吸中间清液，上层是油层，中层是清液，下层菌细胞，但尽量保证无菌，如离心管先用酒精擦洗一下为好），另一只加入0.25~0.3ml无菌水，共三个重复。静置30min，将培养皿小心放入30℃温箱中，培养48h，观察并记录抑菌圈的大小。实验过程中，尽量不要移动牛津杯. 3、实验器材

试管、PH仪、牛津杯、发酵罐、嵌子、高压灭菌锅、培养箱、显微镜、电炉、超净台、接种环、接种针、酒精灯、烧杯、镊子、培养皿、三角瓶等。 二、实验结果与分析

2.1 标准曲线的制作

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标准曲线是用于判断测量OD值下的细菌数量。实验标准曲线中的点过于分散，差异较大。用于判断细菌数量有点过于强求了，应再次重复做标准曲线。

2.2镜检结果及图片

芽孢是细菌对外界环境变化高度适应的一种结果，是细胞质高度缩水而形成的一种高密度的无性生殖结构。运用革兰氏染色法可将细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴 9

性菌，阳性菌被染成紫色，阴性菌被染成红色。从染色结果看枯草芽孢杆菌属于革兰氏阴性菌。芽孢在最后阶段才形成，并且脱落在培养基中。说明在后期培养中，培养基已经基本消耗殆尽，环境已经不能满足菌体的营养生长。此时可以判断菌体处在生长的衰亡期，据此可以确定是否放罐。

抑菌性是指优势菌种对其他杂菌的抑制作用，或者某些菌种能分泌某些抗菌素的刺激产物对其他菌种的抑制作用。前者主要是通过生物量、生物代谢率来抑制杂菌的生长；后者则是通过分泌代谢产物来抑制杂菌某些代谢途径或某些必需组成成分来抑制菌体生长。通常所说的抑菌则是指后者。

通过实验数据可以了解到，在最初24小时内没有抑菌素的存在，即没有抑菌圈产生。这是由于在开始时间内菌体处在快速生长过程中，营养丰富、环境优越，不会产生抑菌素。在24—40h内真菌分泌的抗菌素逐渐增多，到40h时达到最大值，所以抑菌圈最大。这是由于菌体数量增多致使菌体的生长招到营养和环境因素的压力，所以菌体会产生抑菌素增强自身的适应性。后期随着环境进一步恶化，菌体已经开始解体，基

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本无抑菌效应，即抑菌圈慢慢减小。（注意：实验过程中，尽量不要移动牛津杯！！）

2.4 生长曲线的制作

生长曲线是指以细菌培养时间为横坐标，表示细菌数目的量为纵坐标，反应微生物生长规律的曲线，一般可将曲线分为调整期、对数期、稳定期和衰退期。此生长曲线对细菌生长每一个时期的表现并不是非常明显，可能是在测定OD值过程中某些不规范操作引起的误差造成的，应尽量避免。

2.5结论

1、通过本次试验初步了解了发酵过程中的突发因素并进行相应的处理，如泡沫的处理和pH的处理。

2、产生泡沫时：应该适当降低转速，增加通气量并在无菌条件下，向罐体内滴加消泡剂（灭过菌的植物油）

3、应该在实验过程中定时测定pH，以保证菌体的正常生长需要，用灭过菌的酸或碱调节，无菌环境下滴加酸碱调节剂。

4、通过对枯草芽孢杆菌发酵整个过程的检测，基本验证了细菌的生长过程具有四个时期，即适应期、对数期、平稳期和衰亡期。

5、通过对实验菌体进行革兰氏染色，验证了枯草芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌，了解到芽孢是其适应环境的一种特殊方式。

6、抗菌性实验的完成，说明真菌能产生抑制其他细菌的次级产物，以此来争夺更大的生存空间。

三、展望

随着生物技术的发展，发酵工程的应用领域也在不断扩大。从细胞生长繁殖、代谢的角度而言，利用发酵工程技术所进行的大规模植物细胞培养，将用于生产一些昂贵的植物化学品；而动物细胞培养所生产的一些蛋白质和多肽类产品将作为医用激素及抗癌与抗艾滋病的新药物。

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发酵工程技术在今后10年内的重点发展方向为：基因工程及细胞杂交技术在微生物育种上的应用，将使发酵用菌种达到前所未有的水平；生物反应器技术及生物分离技术的相应进步将消除发酵工业放大的某些神秘特征；由于物理微生物数据库、发酵动力学、发酵传递力学的发展，将使人们能够清楚地描述与使用微生物的适当环境和有关的生物学行为，从而能最佳地、理性化地进行工业发酵设计与生产。

四、附录：（实验总提示：）

一、停电处理：

全部开关（机器总开关、墙上总闸）关闭，把排气阀关闭，空压机关闭，等来电后恢复。

二、停水处理：

马上关闭温度控制开关（绿色键“on/off” ），把转速调低（如由350 调至300 rpm）,溶氧量的开关不关，把进气阀开大些，以增大通气量，出气阀门不调，空气压缩机继续工作。

运行1小时左右，如还没来水，则关机（机器总开关由1置0），空压机可开着，出气阀不关，停机40、50分钟左右后，再开机，开转速开关（温控开关还是不打开），如此循环几次直至来水，恢复转速、温控、通气量等至正常即可。注意：一次性停水停电太久，停水停机大于3小时以上，实验可能会失败。

三、当自然水压水压满足要求时(2-4Bar),不需要连接水泵。只有水压不足时才开启水泵（学校水压一般情况满足，不满足时有可能停水，所以不需用！这条可略） 种情况：

A、 进水阀已关死，水源无法通过进水口进入水泵再从出水阀出来。表现出空烧而

水泵烧坏，水泵线圈或电容都可能烧坏。此时水压表读数为零，排水口无水流出。

B、进水阀正常，但是在调出水那个阀门的时候，关死了出水阀门，水只能进入水泵和加热器，但不能通过出水阀门排出。因为水不流动，水泵在运行一小段时间后，也相 12

当于无水空烧烧坏水泵。此时现象为：水压表因为排水阀门的关闭，表上仍有正常的读数，但出水口无水流出。 微生物工程实验记录表（原始数据）

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参考文献：

1、《微生物工程工艺原理》第二版?姚汝华?周世水?华南理工大学 2、《新编仪器分析》第三版?高向阳?科学出版社 3、《普通真菌学》第二版?邢来君?高等教育出版社 4、《微生物学实验》第四版?沈萍?高等教育出版社 5、《微生物学教程》第二版??周德庆?高等教育出版社

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