药理学实验基础知识与总论实验

实验一、药理学实验的基础知识和药理学总论实验

一、实验动物的基本技能和实验技术基础

1、实验动物的标记

大、小鼠和白色家兔的标记常用3～5％黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法：

1号 --- 左前腿

2号 --- 左腰部

3号 --- 左后腿

4号 --- 头部

5号 --- 正中

6号 --- 尾根部

7号 --- 右前腿

8号 --- 右腰部

9号 --- 右后腿

10号 ---不标记

2、实验动物的捉持（大、小鼠）

(1)小鼠的捉持用右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼盖）上面，向后轻拉鼠尾；用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。

（2）大鼠的捉持捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。

3、实验动物的给药方法（大、小鼠）

（1）小鼠的给药方法

灌胃（ig）：将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.1-0.3ml/10g（体重）。

皮下注射（H或sc）：常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤，将注射针头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.1-0.20ml/10g（体重）。

腹腔注射（ip）：左手固定动物，右手持注射器，从下腹部外侧，呈45度角刺入腹腔，进针约3～5mm（注意：进针不宜过深，以免伤及肝脏和脾脏。注药前回抽一下，无回血时再注药）。一般给药量为0.1-0.3ml/10g（体重）。

肌内注射(im)：多注射于后肢股部肌肉，一般每侧不超过0.1ml。

尾静脉注射（iv）：将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用70％～75％的乙醇棉球擦尾部，或将鼠尾浸入45～59ºC温水中，待尾部左右侧静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。一般给药量为0.1-0.2ml/10g

（2）大鼠的给药方法

均同小鼠。一般情况下，灌胃剂量为1～2ml/100g，皮下注射、尾静脉注射<1ml / 只，腹腔注射为1.5ml /只，肌内注射为0.1～0.2ml/只。此外大鼠尚有舌下静脉给药的方法。

4、实验动物给药量的计算

（1）药物浓度的表示方法

溶液的质量（g）

百分浓度（％）= ————————— ×100%

溶液的体积（ml）

（2）实验动物给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为了方便，大鼠和豚鼠可按每100g计算，小鼠可按每10g计算。

给药剂量=药物浓度×给药体积

（3）给药容量的计算：从已知药的浓度和已知给药剂量算出相当于每1kg体重应给药的毫升数（ml）。

例：小鼠体重22g，腹腔注射盐酸吗啡10mg/kg, 药物浓度为0.1%, 应注射多少毫升?

已知：药物浓度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml

给药剂量：10mg/kg=10ml/kg

小鼠体重：22g=0.022kg

则：10ml/kg×0.022kg=0.22ml

或换算成ml/10g来计算较为方便：10ml/kg=0.1ml/10g。这样再计算其他小鼠的给药量就很方便。

5、实验动物的处死方法

实验结束后，常须将动物处死，常用的处死方法有：

（1）颈椎脱臼法此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或镊子用力压住小鼠的后头部，同时用右手抓住鼠尾用力向后上方牵拉，使之颈椎脱臼，鼠立即死亡。

（2）空气栓塞法此法常用于家兔的处死。用注射器将空气快速注入静脉，可使动物立即死亡。

（3）击打法适用于较小的动物，如家兔、大鼠和小鼠等。提起动物的尾部，用力敲击动物头部，或用要木锤打击头部，致使动物死亡。

（4）断头法此法适用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀将动物头部剪断，由于脊髓娄离且大量出血，动物很快死亡。

二、实验记录的内容和实验报告的写作

1、实验记录

实验记录是将实验内容如实地记录下来，长期保存备用。其基本原则是真实、及时、准确、完整，实验过程中应认真做好实验记录。内容一般应包括：

（1）时间、天气、温度；

（2）实验标本：动物的种类、体重、标记和标号及如何分组等。

（3）实验药物：药物的来源、批号、剂型、浓度、剂量及给药途径。

（4）实验进程、步骤和方法的详细记录。

（5）观测指标的变化和原始的描记图纸。

2、实验报告的写作

实验报告要实事求事地反映实验的基本过程，并要对实际所得结果进行整理、计算、统计学处理，然后进行科学地分析讨论，进一步阐明实验的目的和意义。一般包括以下内容：

[实验目的]

[实验材料] 包括仪器、药品和动物。要尽可能详细、具体、明确。

[实验方法] 可简明扼要地叙述，但关键环节或步骤必须写清楚。

[实验结果] 应根据实验获得的数据进行整理，并可对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比，尽量总结出图表。尤其有观察时效关系的，描出时效曲线，一目了然。数据须进行统计学处理，选择的统计学方法要恰如，检验效率要高。

[讨论]和[结论] 讨论与结论是报告的核心，应包括对实验结果的分析、思考题的探讨、实验、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。

三、药理学总论的实验

1、药物剂量对药物作用的影响

[实验目的]　了解药物剂量与药物作用的关系。

[实验材料]　小白鼠、鼠笼、注射器及针头、小烧杯、天平、0.05%、0.4%和1%的戊巴比妥钠溶液。

[实验方法]　取小鼠3只，分别称重，标记，观察其一般活动状态和痛觉反应。然后分别腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠溶液：1号鼠5mg/kg （即0.05%的戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g）；2号鼠40mg/kg （即0.4%的戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g）；3号鼠100mg /kg （即1%的戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g）；给药后随时观察各鼠的反应，注意其不同点。

2、给药途径对药物作用的影响

[实验目的]　比较硫酸镁口服给药和注射给药的不同药理作用。

[实验材料]　小白鼠、鼠笼、注射器、小鼠灌胃针头、小烧杯、10%硫酸镁溶液等。

[实验方法]　取小鼠2只，称重，标记，观察小鼠的一般活动情况。1号鼠肌内注射10%硫酸镁溶液0.1ml/10g；2号鼠灌胃给10% 硫酸镁溶液0.1ml/10g。观察两只小鼠给药后行为活动等有何变化并记录之。

3、药物的拮抗作用

[实验目的] 观察药物的拮抗作用。

[药品材料] 小白鼠、鼠笼、小鼠灌胃器、1ml注射器、10％硫酸镁溶液、5％氯化钙溶液等。

[实验方法] 取小白鼠2只，观察正常活动情况，腹腔注射给10％硫酸镁溶液0.1ml/10g ，1号鼠迅速由腹腔注射5％氯化钙溶液0.1ml/10g ，继续观察小鼠反应有何变化。

[报告要点]

药物剂量与药物作用的关系