实验2 药物的抗惊厥作用

【目的要求】

①学习动物惊厥模型的制备方法及抗惊厥药的实验方法。②观察抗癫痫药物苯巴比妥钠对动物电惊厥的保护作用和安定对士的宁惊厥的保护作用。

【教学内容】

（一）实验动物

小白鼠，雌雄不限，体重18-22g；

（二）药品与仪器

苯巴比妥钠溶液，地西泮溶液，士的宁溶液，药理生理多用仪

一、苯巴比妥钠抗电惊厥作用

（一）实验方法

调机：将药理生理多用仪选择适宜参数：频率至“单”，波宽至“0.5ms”，微调至“X500”,电压调节旋钮置于适当位置（80～100V）。

动物筛选：将输出导线前两个鳄鱼夹用生理盐水浸湿，一只夹住小鼠耳部，另一只夹住小鼠下唇，按“启动”按钮，选择发生前肢屈曲、后肢伸直的强直性惊厥的小鼠为合格小鼠，记录下各只动物惊厥阈值。如动物未出现惊厥，将电压逐渐升高，再次刺激，如仍未出现惊厥，弃之不用。

实验步骤：将合格小鼠，称重并标记，随机分组。第一组小鼠腹腔注射生理盐水

0.1ml/10g，第二组小鼠腹腔注射5mg/ml苯巴比妥钠溶液0.1ml/10g，30min后，各只动物以原惊厥阈值给予刺激，记录各动物的反应。

（二）实验结果:将实验结果填于表中。

表：苯巴比妥钠抗电惊厥作用

组别

生理盐水

苯巴比妥钠 剂量(mg/kg) / 致惊厥阈值（参数） 再次通电后的反应

（三）注意事项

1、电压以能引起动物惊厥为准，不宜过大，以免引起动物死亡。

2、通电时两鳄鱼夹不能相互接触，以免短路。

3、动物惊厥可以分为5个时期：潜伏期、僵直屈曲期、后肢伸直期、阵挛期、恢复期。

（四）结论

（五）讨论：阐述苯巴比妥钠为什么能够抗电惊厥？

二、安定抗士的宁惊厥作用

（一）实验方法

取小鼠，称重并标记，随机分为两组，分别腹腔注射生理盐水、地西泮溶液0.1ml/10g。30分钟后依次给每只鼠皮下注射0.2％士的宁0.015ml/10g。观察并记录动物的反应。

（二）实验结果：将实验结果填于表中。

表：地西泮对抗士的宁致小鼠惊厥的作用

组别

生理盐水

地西泮 剂量(ml) / 给士的宁后的反应

（三）注意事项

1、剂量要准确，时间掌握好。

2、给药后应保持室内安静，避免刺激实验动物。

（四）结论

（五）讨论：

如果将地西泮用于抗电惊厥而苯巴比妥钠用于抗士的宁惊厥会产生怎样的结果？

 

第二篇：药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用

实验报告

课程名称：         生理科学实验                    指导老师：唐法娣     成绩：

实验名称药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用同组学生：

一、实验目的和要求（必填）                                       二、实验内容和原理（必填）

三、主要仪器设备（必填）                                        四、操作方法和实验步骤

五、实验数据记录和处理                                               六、实验结果与分析（必填）

本人Email：

药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用

 

（浙江大学医学院  级临床医学七年制生理科学实验  班  组，浙江 杭州 310058）

[摘  要]目的：制作小鼠惊厥模型、了解惊厥的发生机制、探索药物对小鼠电惊厥的保护作用。方法：先将电惊厥仪输出线的鳄鱼夹尖端用生理盐水浸湿，一个夹子夹小鼠两耳根间的皮肤，另一个夹下颚部。将输出电压调到20伏、时间0.5s，刺激周期设为单刺激(第1次电惊厥试验)。挑选发生电惊厥反应的小鼠（用苦味酸标记1、2、3------）。一组注射0.5%苯巴比妥钠0.1ml/10g，另一组注射生理盐水0.1ml/10g。15min后第二次电惊厥试验，记录结果。结果：生理盐水组18只其中17只惊厥，苯巴比妥钠组21只0只惊厥。 结论：苯巴比妥钠具有抗电刺激引起小鼠惊厥作用。

[关键词] 苯巴比妥 电惊厥 小鼠

1.材料

1.1 实验动物  ICR小鼠

1.2 药品  0.5% sodium phenobarbital 溶液

1.3 器材  JTC-1型惊厥及痛觉实验交流电刺激器【它是用于电惊厥及痛觉实验的专用交流刺激器：输出电压范围：0～120伏（50Hz交流电压）连续可调；输出电流:不小于100毫安；刺激模式：单刺激、连续刺激，外触发程控；刺激时间：0.2、0.3、0.4、0.5、0.6（秒）；刺激周期：单刺激、1、2、5、10（秒）。】

2.方法

2.1准备 

将“输出电压”调到20伏，将“输出电压”调到20伏，刺激周期设为单刺激，如不发生惊厥，将输出电压增大，再试。

2.2操作

先将电惊厥仪输出线的鳄鱼夹尖端用生理盐水浸湿，一个夹子夹小鼠两耳根间的皮肤，另一个夹下颚部。将输出电压调到20伏、时间0.5s，刺激周期设为单刺激(第1次电惊厥试验)。挑选发生电惊厥反应的小鼠（用苦味酸标记1、2、3------）。一组注射0.5%苯巴比妥钠0.1ml/10g，另一组注射生理盐水0.1ml/10g。15min后第二次电惊厥试验，记录结果（+发生惊厥、-未发生惊厥）。实验结束后将小鼠脱颈处死。

3.观察项目

3.1 惊厥指标：  双后腿强直。

3.2 惊厥发生过程：僵直屈曲期→ 后肢伸直期→ 阵挛期→ 恢复期 。

4.结果

4.1  电惊厥实验结果汇总表见表1。

表1.电惊厥实验结果汇总表

4.2统计结果见表2。X²值<0.05，故认为两组有显著差别。

5.讨论

5.1电惊厥法是利用电流刺激动物诱发惊厥，并利用这种实验模型来筛选抗癫痫大发作的药物。目前最常用的方法是最大电休克发作实验(maximal electroshock seizure test,MES)。一般认为，MES是癫痫大发作的实验模型，受试化合物若能明显对抗MES，则该化合物有可能发展成为在临床上治疗癫痫大发作有效的药物。^[1]

5.2苯巴比妥能选择性地抑制癫痫灶中的异常神经元、防止或减少其过度放电，抑制病灶的点燃和传播。这种抑制作用与脑内抑制性递质γ-氨基丁酸的含量增高有关。动物实验表明苯巴比妥能提高电刺激大脑皮层运动区及间脑的最低阈值。^[1]

6.参考文献

[1] 陆源，夏强等，生理科学实验教程（第二版）.浙江：浙江大学出版社.2012.7.270