培养基配制及灭菌实验报告单

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一、 实验目的

了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握高压蒸汽灭菌操作方法。

二、实验原理

培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。

马铃薯培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。

平板划线接种法（分离培养法）：是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。

三、试剂与器材

1.器材

试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、镊子等。

2.试剂

马铃薯、葡萄糖、琼脂、水等

四、实验内容

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排气→取物→无菌检查

五、关键步骤及注意事

1.要严格按配方配制。

2.调pH不要过头。

3.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。

六．讨论

1.如何检验灭菌后培养基是否合格？

2.高压蒸气灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么要待降到0时才能打开排气阀，开盖取物？

 

第二篇：培养基的配制 、灭菌