幽门螺旋杆菌抗体检测是利用胶体金技术定性检测人血清、血浆或全血中抗胃幽门螺旋杆菌抗体,或者检测粪便中的抗原。
幽门螺杆菌血清抗体检测:
是利用胶体金技术定性检测人血清、血浆或全血中抗胃幽门螺旋杆菌抗体。在检测条中硝酸纤维薄膜的测试区包被有胃幽门螺旋杆菌抗原,质控区标有胃幽门螺旋杆菌特异性单克隆抗体。在样品端的玻璃纤维纸上固定有胃幽门螺旋杆菌抗原胶体金颗粒。检测时,加入的样品首先与包被抗原的胶体金颗粒混匀,并因毛细管作用混合液将沿膜向检测区移动。当病人样品中含有胃幽门螺旋杆菌特异性抗体时,即与检测线(T线)上的抗原形成抗原-抗体-抗原胶体金颗粒复合物,并显示出红线。
幽门螺杆菌菌体表面存在多种抗原成分,如尿素酶、脂多糖、粘附素等成分,这些抗原均可刺激宿主产生免疫反应,产生IgG、IgA、IgM抗体,传统的血清学检测主要是检测可长期存在于血清中的IgG抗体。常用的方法主要有酶联免疫吸附法、免疫酶试验、免疫印迹技术、胶乳凝集试验等。酶联免疫吸附法(ELISA)是目前最常选用的定性或定量的检测幽门螺杆菌抗体IgG的方法。但由于常选用活体细菌、福尔马林处理过的细菌、酸性甘氨酸抽取物等制备物作为抗原,与其它的细菌间可能发生交叉反应,影响检测结果。近年来应用纯化尿素酶作为抗原来检测抗体,提高了特异性;新型血清抗体的检测方法,如快速免疫色层法(Flexpact,TMHp)该法是根据反向免疫色层法原理,快速、定性测定血清Hp-IgG抗体;Hp快速检测试检(CIM test),它利用免疫层析技术检测全血、血浆或血清中的幽门螺杆菌特异抗体,该方法敏感性和特异性较高,只需采末稍血用试剂盒检测,15分便可得到结果。由于幽门螺杆菌感染数周后才出现特异性抗体,幽门螺杆菌阴性者血中也可存在交叉反应性抗体(如空肠弯曲菌),且幽门螺杆菌根除治疗后6~8个月内甚至几年可持续在阳性水平,故血清学阳性不能完全肯定患者有活动性感染,阴性也不能排除初期的感染。因此,血清学检测不宜作为现症感染或根除疗效评估的标准,主要用于易感人群的筛查及流行病学调查。CIM 试剂盒含有一个基于高度保守的重组抗原,故可以区分现症感染或既往感染。尿液、唾液等分泌物抗体检测方法,取样简便,无痛苦,其敏感性、特异性与血清学试验相似,结果也可受某些因素影响。
幽门螺杆菌粪便抗原检测:
由于定居在胃上皮细胞表面的幽门螺杆菌,随着胃粘膜上皮的快速更新脱落,幽门螺杆菌也随之脱落,并通过胃肠道从粪便排出。幽门螺杆菌粪便抗原检测试检采用酶联免疫分析双抗体夹心法,能够特异性诊断人体内幽门螺杆菌感染。该方法操简便、省时、不需昂贵仪器,适用于婴幼儿、儿童幽门螺杆菌感染的检测,幽门螺杆菌根治疗效评价,以及幽门螺杆菌感染的流行病学调查等。
不管是幽门螺杆菌血清抗体检测,还是幽门螺杆菌粪便抗原检测,都不是很方便。血清抗体检测需要抽血,粪便抗原检测需要收集粪便,因此即便这两种检测的准确率很高,选择的人群也不是特别多
C13呼气试验,是目前常用的幽门螺杆菌检测方法之一。因在检测时,给大家吞下一颗预先用稳的同位素13C来标记尿素的药丸,所以称它为13碳-尿素呼气试验。
C13呼气试验原理介绍:
因为HP细菌内有尿素酶,当它在胃内遇到吞下的13C-尿素,就会把它分解成13CO2,13CO2经胃肠道吸收经血液循环到达肺后随呼气排出。我们只要收集呼出的气体,测定其中的13C标记的13CO2,就可准确地证明有没有HP感染。
正常人没有HP,13C-尿素不分解, 13C-尿素经泌尿系统排出,呼出的气体中就没有13CO2。
而幽门螺杆菌感染者,体内有幽门螺杆菌,能够将13C-尿素分解,所以呼出的气体中就有13CO2。
C13呼气试验检查流程:
1.等级姓名,性别,编号,条码号和日期等,并在两个试管上分别等级姓名和编号。
2.第一次呼气试验为空白试验,即空腹情况下呼出的气体,也成为零时呼气,他不受时间的限制。
3.口服一粒13C尿素胶囊及一杯约250ml的水后立即计时。
4.第2次呼气:是20分钟后呼气至第2支试管内,称为20分钟标本。
5.第3次呼气:是30分钟后呼气至第3至试管内,称为30分钟标本。
C13呼气试验注意事项:
一、检测前:
a.常规检测:抗生素停用2周,停用胃药(抑酸药)1周
b.Hp根治检测:停用抗生素1月,停用胃药(抑酸药)1周
c.检测当天必须空腹前往。
d.整个检查过程中保持安静坐位状态
e.检查等候30分钟期间不能喝水或饮料,不能吃任何食物。
检测过程:
1.呼气要完全,左手手握试管,右手拿好瓶盖,向试管尽力吹气4-5秒钟,当吹气管离开玻璃管时,右手立即旋紧瓶盖。
2.呼气检测的时间要正确:
a.第一次在服药丸前(白帽)
b.第二次在服药丸后20分钟(蓝帽)
c.第三次在服药丸后30分钟(红帽)
3.整个过程约为45分钟
4.一般2个工作日就可取报告
C13呼气试验阳性标准:
测定结果为超级准DOB
诊断标准:
幽门螺杆菌诊断阳性:DOB>4.4
幽门螺杆菌诊断阴性:DOB<3.6
C13呼气试验的优点:
1、诊断HP具有准确、特异、灵敏的特点。
2、安全,对人体无任何副作用,对环境也无影响。
3、无需抽血,无痛苦损伤、检测过程和操作方便。
4、适用所有人群,可在短期内多次重复检查。
5、作为HP疗效考核的“金标准”。
C13与C14的区别:
碳-14C呼气试验中14C无13稳定,有少量放射性,虽然半衰期5730年,但辐射距离仅22cm,辐射的是β射线,平均辐射能量仅50keV,峰值80keV。对人体的损害没有明确报道。辐射剂量不大,但14C原子摄入人体后可能与12C原子一样参与人体细胞内碱基的合成,而碱基是构成人类基因的基本分子;所以碳14C从高能衰变进入低能态的过程中,能量射线及原子自身的不稳定性可能造成基因突变。碳-13C呼气试验没有放射性,由于是稳定性核素,对人体无损害。
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