淀粉酶
1、预期用途
淀粉酶(amylase,AMY或AMS)全称是1,4-α-D-葡聚糖水解酶,催化淀粉及糖原水解,生成葡萄糖、麦芽糖及含有α1,6-糖苷键支链的糊精。一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶。血清淀粉酶和尿淀粉酶测定是胰腺疾病最常用的实验室诊断方法,当罹患胰腺疾病,或有胰腺外分泌功能障碍时都可引起其活性升高或降低,有助于胰腺疾病的诊断。尿淀粉酶水平波动较大,所以用血清淀粉酶检测为好,或两者同时测定。淀粉酶活性变化亦可见于某些非胰腺疾患,因此在必要时测定淀粉酶同工酶具有其鉴别诊断意义。
2、临床意义
淀粉酶能分解多糖,如淀粉和糖原。淀粉酶作用于多糖分子的α-1,4葡聚糖苷键,生成麦芽糖和葡萄糖。血清淀粉酶测定主要用于诊断急性胰腺炎。在急性发作期α-淀粉酶活性显著增高。尿淀粉酶在发病后12-24小时也会升高。某些慢性胰腺疾病,如慢性胰腺炎、胰腺肿瘤以及流行腮腺炎、唾液腺化脓或腺管堵塞时,血清淀粉酶也会有所升高,而对于各种肝脏疾病,如肝炎、肝硬化、肝脓肿、肝癌及胆囊炎等,则淀粉酶活力下降。
3、参考范围
血清:<135U/L;尿液:<900U/L
1、用途:测定人血清中或尿液中α-淀粉酶的酶活浓度。
2、原理:α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶偶联,水解特异性底物4,6-亚乙基-4-硝基苯酚-α-庚糖,产生对-硝基苯酚,对-硝基苯酚生成速率与α-淀粉酶的活性成正比,在405nm波长下用速率法检测。
3、适用仪器:奥林巴斯AU480型全自动生化分析仪.
4、样本要求:
4.1、样本种类:新鲜无溶血血清或尿液。
4.2、样本采集:常规静脉采血约2ml,不抗凝。置普通管中,或采用含有分离胶的真空采血管。尿液保存时应将pH值调节至7.0。
4.3、样本干扰:对反映吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存:血清样本2℃—8℃可稳定7天,-20℃可保存一个月,忌反复冻融。尿液样本2℃—8℃可稳定10天.
5、检测方法:
5.1、试剂的准备:试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤:
1、基本操作步骤:(波长:405nm 温度:37℃ 比色杯光径:1cm)
2、 动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准:用K因素进行试剂空白校准,也可使用Diazyme公司校准品进行校准操作,当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。
5.4、结果计算:全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
3、
(各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。)
7.1、试剂具有一定的酸碱性,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理,扔入指定的垃圾箱内,不可随处乱扔,防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
中华人民共和国卫生部医政司,全国临床检验操作规程(第三版),东南大学出版社,2006。
王惠萱、李雪梅、王冈,临床检验操作手册,云南科技出版社,2008.
陆永绥、李清华、张伟民主编,临床检验自动化仪器分析标准操作规程,浙江大学出版社,2006.
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