植物组织培养教学实习项目总结

作物生产技术101班 姓名：马一良

一：目的意义

植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

运用植物组织培养技术的意义：1、快速繁殖优良种苗。2、无病毒苗的培养。

3、在育种上的应用4、工厂化育苗。5：保存种质资源。6：基因工程的运用 二：工作内容

1：学习组培相关知识

2：了解相关的实验室及其设备

3：试管苗快速繁衍技术

4：植物脱毒技术

5：植物组织培养技术的一般培养方法

6：种质立体培养

7：MS培养基的制备

8：灭菌技术

9：无菌操作技术

10：试管苗的炼苗与移栽 培养步骤

第一步，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严

重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。当然，最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。

第二步是对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10～30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之70%酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料，如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下，待酒精蒸发后再剥除外层，取用内部材料。

第三步是用灭菌剂处理。表面灭菌剂的种类较多，可根据情况选取1—2种使用见表。第四步是用无菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，视采用的消毒液种类，涮洗3-l0次左右。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意：①酒精渗透性强，幼嫩材料易在酒精中失绿，所以浸泡时间要短，防止酒精杀死植物细胞。②老熟材料，特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些，如种子可以浸泡5分钟。③升汞的渗透力弱，一般浸泡10分钟左右，对植物材料的杀伤力不大。④漂白粉容易导致植物材料失绿，所以对于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入浓度为0.08—0.12%的吐温20或80（一种湿润剂），可以降低植物材料表面张力，达到更好的消毒效

配制培养基

（ 1 ）愈伤组织诱导培养基： MS 培养基（蔗糖含量为 10 g/L ， 2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。

（ 2 ）试验培养基：在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。

吲哚乙酸（IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。

仪器设备

培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（ 100mL ），

烧杯，量筒，组培瓶，组培盖或封口膜，棉线，接种箱或超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮纸

培养基灭菌

将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至 pH 5.8 ，趁热分装于 100 mL组培瓶中，每瓶约 20 mL 。待培养基冷却凝固后，盖上组培盖，或盖上封口膜并用棉线扎牢，然后在高压灭菌锅中 121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌 20 min 。取出组培瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。 三：体会

植物组织培养的特点：1、占用空间小，不受地区、季节限制。2、培养脱毒作物。3、培养周期短。4、可用组培中的愈伤组织制取特殊的生化制品。5、可短时间大量繁殖，用于拯救濒危植物。6、可诱导之分化成需要的器官，如根和芽。 7、解决有些植物产种子少或无的难题。8、不存在变异，可保持原母本的一切遗传特征。9、投资少，经济效益高。10、繁殖方式多，试用品种多

11、培养条件可以人为控制。

植物组织培养技术的前景与发展：世界上一些先进国家园艺植物组织培养技术的迅速发展从xx年代就巳经开始，并随着生长、分化规律性探索逐步深化，到了xx年代仅花卉业就已在兰花、百合、、矮牵牛等二十几种花卉幼苗生产上建立起大规模试管苗商品化生产，到19xx年世界花卉幼苗产业的生产总值已达二十亿美元，其中美国花卉幼苗市场总值为六亿多美元。由于组织培养技术的应用，加快了花卉新品种的推广。以前靠常规方法推广一个新品种要几年甚至十多年，而现在快的只要l～2年就可在世界范围内达到普及和应用。

我国采用快速繁殖技术，也使优良品种达到迅速的推广和应用。如广东切花菊“黄秀风”的应用，使菊花变大，长势加强，花色鲜艳，抗病力增强，打开了进入香港市场的渠道，使三十多种观叶植物的推广很快遍及全国，丰富了人们的生活；并将自然界的几百个野生金钱莲品种繁种驯化，培养了一批园林垂直绿化的材料，促进了园林业的发展。

植物组织培养也存有一定的困难，首先是繁殖效率与商品需要量的矛盾，有些作

物由于繁殖方法尚未解决，因而无法满足生产的需要，其次是在培养过程中如何减少变异株的发生。更重要的是应降低组培苗工厂化生产的成本，只有降低成本，才能更好的投产应用。总之，随着组织培养这一技术的发展及各种培养方法的广泛应用，使这一技术在遗传育种、品种繁育等方面表现出了巨大的潜力，特别是生物工程和工厂化育苗实施以后，它将以新兴产业的面目在技术革命中发挥重大作用。

 

第二篇：植物病理学实习总结

实习时间：一周

实习地点：河南农业大学校区及三区，毛庄，森林公园及浮戏山

实习目的：学习实地认识各种植物病害并采集标本，学习制作标本的方法，学习用不同的培养基培养真菌和细菌，学习制作玻片并观察玻片来判断病原物是什么。

实习中认识的病害及病原物介绍：

1 芍药白粉病

症状：在叶面产生白色、近圆形的白粉状霉斑，白斑

向四周蔓延，连接成边缘不整齐的大片白粉斑，其上布满白色至灰白色粉状物。叶上布满白粉状霉,即病菌的菌丝体、分生孢子梗及分生孢子。发病后期有时叶片上产生黑褐色小点,为病菌的有性世代闭囊壳。

2 南瓜霜霉病

发病初期叶片背面出现水浸状黄色斑点，病斑逐渐

扩大后，受叶脉限制呈黄褐色不规则的多角形病斑。在

潮湿条件下，病斑背面长有灰黑色霉层。发病重时，病

斑连成片，使叶片变黄干枯、易破碎，植株一片枯黄 病原菌：真菌病害，病菌以在土壤或病株残体上的孢子囊及潜

伏在种子内的菌丝体越冬或越夏。以孢子囊随风雨进行传播，

从寄主叶片表皮直接侵入，引起初次侵染，以后随气流和雨水

进行多次再侵染。

3 番茄晚疫病

叶片染病多从叶尖、叶缘开始病叶出现水浸状暗绿色病斑，当向叶脉和茎蔓延后茎杆染病产生长条状暗褐色凹陷条斑。

病原物：致病疫霉菌，菌丝丝状，分隔

4 番茄早疫病

主要危害叶片，在茎基部产生暗褐色病斑，稍凹陷有轮纹。多从植株下部叶片向上发展，初呈水浸状暗绿色病斑，扩大后呈圆形或不规则形的轮纹斑，边缘多具浅绿色或黄色的晕环，中部呈同心轮纹。

病原物：早疫病是由茄链格孢菌侵染所致，在真菌分类中，属于半知菌门链格孢属。

番茄早疫病和番茄晚疫病的区别：番茄早疫病在生长期都可以发病。侵害叶、茎、果实各个部位，以叶片和茎叶分枝处最易发病。病害一般多从下部叶片开始发生，逐渐向上扩展。叶片上最初可见到深褐色小斑点，扩大后呈圆形或近圆形，外围有黄色或黄绿色的晕环，病斑灰褐色，有深褐色的同心轮纹，有时多个病斑连在一起，形成大形不规则病斑。番茄晚疫病在番茄的整个生育期均可发生，幼苗、茎、叶、和果实均可受害，以叶和青果受害为重。幼苗染病，病斑由叶向叶脉和茎蔓延，使茎变细并呈黑褐色，植株萎蔫或倒伏；叶片受害多从叶尖、叶缘开始发病，

初为暗绿色水浸状不规则病斑，扩大后转为褐色。

5 烟草花叶病

叶脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。病毒在叶片组织内大量增殖，使部分叶肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。后花叶斑驳程度加大，并现大面积深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚，发病重的叶片皱缩、畸形。

病原物：有病毒引起

6 洋葱紫斑病

危害初期呈水浸状白色点斑，病斑扩大快，迅速形成宽1～3厘米、长2～4厘米纺锤形的凹陷斑，先为淡褐色，随后变为褐色至晴紫色，周围具有黄色晕圈。此后有的逐渐褪色并形成同心轮纹，湿度大时斑面上产生黑褐色煤粉状霉。

病原菌称为葱链格孢菌。

7 梨锈病

叶片被害后叶片正面产生圆形小病斑，随着病斑的扩大，病斑中央产生蜜黄色微凸的小粒点（病菌性孢子器），潮湿时小粒点上溢出淡黄色黏液，之后病斑组织变肥厚，正面凹陷，背面隆起并长出几根至十几根灰白色或淡黄色的细管状物即锈孢子器，内有大量褐色锈孢子，成熟后从锈孢子器顶端开列散出。

病原物：病原属担子菌亚门胶柄锈属真菌。性孢子器葫芦形，埋生于表皮下；性孢子纺锤形，单胞无色。锈子器长简形，丛生于叶背面。锈孢子近圆形，橙黄色，表面有瘤状细胞。

8 花生褐斑病

初为褪绿小点，后扩展成近圆形或不规则形小斑，病斑较黑斑病大而色浅，叶正面呈暗褐或茶褐色，背面呈褐或黄褐色，病斑周围有亮黄色晕圈。湿度大进病斑上可见灰褐色粉状霉层。

病原物：落花生尾孢，属半知菌亚门真菌。子座多散生于病斑正面，深褐色。分生孢子梗丛生或散生于子座上，黄褐色，病菌以子座、菌丝团或子囊腔在病残体上越冬。翌年条件适宜，产生分生孢子，借风雨传播进行初侵染和再浸染。菌丝直接伸入细胞间隙和细胞内吸取营养。

9 茄子黄萎病

初期叶缘及叶脉间出现褪绿斑,病株初在晴天中午呈萎蔫状,早晚尚能恢复,经一段时间后不再恢复,叶缘上卷变褐脱落,病株逐渐枯死,

病原物：茄子黄萎病病菌为半知菌门真菌的大丽轮枝菌，病菌分生孢子梗直立,细长,上有数层轮状排列的小梗,梗顶生椭圆形、单胞、无色的分生孢子。

10 桃缩叶病

嫩叶刚伸出时就显现卷曲状，叶片逐渐开展，卷曲及皱缩的程度随之增加，致全叶呈波纹状凹凸，严重时叶片完全变形。

桃缩叶病的病原物为畸形外囊菌。

11 黄瓜靶斑病

黄瓜靶斑病又称“黄点子病”，起初为黄色水浸状斑点，发病

中期病斑扩大为圆形或不规则形，易穿孔，叶正面病斑粗糙不平，病斑整体褐色，中央灰白色、半透明。后期病斑直径可达10~15毫米，病斑中央有一明显的眼状靶心。

病原物：由半知菌的棒孢菌引起的病害。

12 南瓜角斑病

主要为害叶片。叶片上产生多角形或不规则形病斑，受叶脉限制。大小1～5毫米，初为浅褐色，后中间变灰白色，边缘明显，中心稍下凹，病斑周围不形成晕圈，后期病部正背长出很多小黑点。严重时病斑融合成片，致叶片早枯。

病原菌：真菌半知菌门瓜角斑壳针孢。

在实习的过程中，我们认识了很多植物病害，采集了很多标本，对于不能肯定的植物病害，我们小组成员查阅了很多资料，并在玻璃皿中培养了许多未知病原物，然后分离出病原物，做成玻片在显微镜下观察病菌形态，然后判断是属于那个门哪个科。我们还进行了细菌和真菌的培养，分离土壤微生物。在实践中，我们不仅学到了植物病害方面的知识，还增强了实际动手操作能力。