进修总结

进修小结

本人在上海瑞金医院临床病毒实验室系统的学习PCR实验室布局、要求和管理,详细了解ISO15189质量管理体系的内容,熟悉PCR实验室SOP程序文件的编写过程,浏览PCR实验室检验流程中所以文件和记录表的生成和存档,掌握乙肝病毒DNA检测、丙肝病毒RNA检测、人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测、HCV基因分型和HBV核苷类药物耐药分析。能够熟练的操作Lightcycle 480荧光定量PCR分析仪,ABI–7500荧光定量PCR分析仪, Roche COBAS AmpliPrep & COBAS TaqMan48全自动定量PCR分析仪。下面仅侧重介绍本人两点希望:

1.重点希望我科室开展乙型肝炎病毒核苷类药物耐药分析(PCR-DNA序列分析) ,其检验目的及原理:采用PCR扩增技术扩增乙型肝炎病毒基因组RT区,并进行DNA测序,经与野毒株序列相比较,观察HBV RT区有无与核苷类药物耐药相关的变异发送生。耐药突变测序分析时运用“乙肝病毒耐药检测”分析软件,加载Chromas格式测序文件,观察是否存在下列已知耐药相关突变位点:

? V173L突变 (拉米夫定和恩曲他滨耐药相关)

? L180M突变(拉米夫定、替比夫定、恩曲他滨和恩替卡 韦耐药相关)

? A181V/T突变(阿德福韦耐药相关)

? T184G/S/A/C突变(恩替卡韦耐药相关)

? A194T突变(替诺福韦耐药相关)

? S202G/I突变(恩替卡韦耐药相关)

? M204V/I突变(即YMDD突变,拉米夫定、替比夫定、 恩曲他滨和恩替卡韦耐药相关)

? N236T突变 (阿德福韦耐药相关)

? M250V突变(恩替卡韦耐药相关) 。

HBV耐药突变基因检测的临床意义:

(1)抗病毒药物治疗前的药物选择:在慢性乙肝患者抗病毒

药物治疗前,进行耐药突变基因检测,可以指导临床医生合理选择抗病毒药物,真正实现个体化诊治。

(2)抗病毒药物治疗中的药效监测:在慢性乙肝患者抗病毒

药物治疗过程中,进行耐药突变基因检测,可以监测抗病毒药物治疗效果并及时调整治疗方案。

2.重点期望购置Roche COBAS AmpliPrep & COBAS TaqMan48全自动定量PCR分析仪。它是一款乙肝病毒DNA和丙肝病毒RNA全自动内标定量PCR分析仪,下面以乙肝为例说说检测原理:COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HBV 测试是一种定量测定人血浆中乙型肝炎病毒(HBV)的体外核酸扩增试验,使用COBAS AmpliPrep仪器自动处理样品,并使用COBAS TaqMan分析仪或COBAS TaqMan 48分析仪自动扩增并检测。COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HBV测试基于两个主要步骤:(1)制备样品分离HBV DNA,(2)同时发生靶DNA的PCR扩增并测定27

针对靶目标的双标识的分开的寡核苷酸检测探针。COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HBV测试可自动制备样品,随后自动进行PCR扩增和HBV靶向 DNA和HBV定量标准(QS)DNA的检测。Master Mix试剂包括引物对和针对HBV DNA和 HBV QS DNA的探针。Master Mix是为了确保定量HBV基因型A到G。扩增DNA的检测是使用靶特异性和QS-特异性的双标识寡核苷酸检测探针,该探针可分别独立确定HBV扩增子和HBV QS扩增子。

HBV病毒DNA的定量使用HBV QS完成。其可对抑制作用进行补偿并控制制备和扩增过程,从而对每个样品中的HBV DNA 进行更为准确的定量。HBV QS是一种非传染性DNA结构,含有与HBV靶DNA完全相同的引物结合位点的HBV序列以及与一个可允许将HBV QS扩增子与HBV扩增子进行识别的,与区域结合的独特探针。

在已知拷贝份数的每个样品中加入HBV QS,该物质在样品制备的后续步骤中一直存在于样品中,同时进行PCR扩增和分开的双标识寡核苷酸检测探针的检测。COBAS TaqMan分析仪或COBAS TaqMan 48分析仪通过对每个样品和质控品中HBV信号与HBV QS 信号进行比较计算检测样品中HBV DNA浓度。参考区间(附判断限):< 1.20E+01 IU/mL。可报告范围:5.45E+01 IU/mL~1.10E+08 IU/mL。由此可见它的检测限、精密度和线性范围都是手工提取核酸后再进行拷贝所不能相提并论的。

 

第二篇:进修总结

暑期医院学习小结

为加强专业知识,更好地完成实训室工作,今年暑假我进行了为期五周的医院学习。学习科室为华东医院康复科。

工作期间我服从医院及科室排班,尊重带教老师,严格遵守科室规章制度,做到不迟到、不早退,学习态度积极。

本次学习主要是跟随带教老师进行康复评估及指导病人运动训练,病种有中风、骨科疾病、慢性关节疾病等。学习的主要形式是跟随带教老师对病人进行详细的康复评估,主要是运动功能及上肢功能方面,并以此制定个性化治疗方案,其次是在训练过程中密切关注病人的状况,指导病人训练。

在专科操作中学习使用的仪器包括帕维尔运动康复系统、上肢康复机器人、足底压力测试平台等。

学习期间科室领导很注重业务学习,经常组织大家参加各种讲座。此外期间正逢康复治疗师规范化培训,科室学习气氛浓厚,几乎每天一到两次讲课,包括基础知识、专业知识以及实用技术,让我在专业知识上有所提高,系统地学习了骨骼肌肉检查、中风后康复的知识,并且通过专科康复系列的上课,让我对于康复科发展状况有了一定了解。

通过本次实践,使我能够重新回归临床,了解康复进展及临床工作,学习相关运动疗法。我要将我在医学院学习到的知识运用到工作中去,并把好的作风和经验带到工作中,以提高我的工作质量。

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