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第二篇：支原体

1. 目的

规范支原体药物敏感试验标准操作规程，确保药敏结果的准确。

2. 适用范围

本操作规程适用于泌尿生殖道系统解脲支原体（UU）、人型支原体（MH）。

3. 检验原理

试剂盒由液体药敏培养基和药敏测试板组成。培养基中含有蛋白胨、酵母提取物、血清、生长因子等营养物，并加有尿素、精氨酸被分解生成的碱性物质引起PH值上升，培养基由黄色变成红色。培养基内加有抑菌剂，可抑制泌尿生殖道中细菌和真菌的生长。测试板的个孔分别用于质控对照以及UU和MH的鉴定、计数要药物敏感性试验。

4. 试验材料和仪器

支原体鉴定药敏试剂盒，加样器，35℃孵育箱。

5. 样本要求

5.1 男性：可取尿道分泌物、前列腺液、精液或中段尿培养（中段尿需取尿10mL,经2000r/min

离心10min，取沉渣接种）

5.2 女性：用扩阴器扩阴后，取宫颈口分泌物培养，也可用羊水培养；阳性培养液（普通支

原体培养基获得）用无菌吸嘴吸取30～50μL。

6. 操作步骤

6.1空白对照：取出测试板，用无菌吸嘴吸取100μL培养液加入A1-空白对照孔。

6.2接种标本：将标本棉签伸入小瓶，靠近液面上方的瓶壁挤压棉签，使标本渗入，丢弃棉

签，或直接加入30～50μL的阳性培养液。标本加入后充分摇匀使之混合。

6.3加样至测试板：吸取100μL含菌培养液加入其余的微孔中。

6.4 矿物油封盖：所有微孔滴加1～2滴试剂盒所附的矿物油。（注意：一定要使矿物油覆盖

液面，否则培养液蒸发，结果不准）

6.5 培养：将测试板加盖后置培养箱中，35～37°C培养24～48h，观察结果。

7. 判断结果

清亮的黄色为阳性，淡红色或红色者为阴性，浑浊或有絮状为无效。

8. 注意事项

8.1 先兆流产、月经期妇女禁用；阴道用药或灌洗后禁用；

8.2 支原体鉴定药敏试剂盒仅供体外诊断用；

8.3 支原体鉴定药敏试剂盒仅供一次性使用；

8.4 废弃物应彻底消毒后丢弃。

9. 结果解释

9.1 如果标本所含支原体滴度很低，试剂条微孔可能不改变颜色或颜色改变不均匀。

9.2 标本做药物敏感性实验，可能观察到接种浓度差异引起的菌株实际敏感性和试剂条中测

得的结果不同的情况。

9.3 支原体生长应保持培养基透明清亮，遇杂菌污染引起混浊变红不应报告支原体阳性（但

部分含分泌物较多的标本接种到培养基中可能引起培养基澄清度降低，请注意区别）。

9.4 UU的半定量计数结果必须在24h判断，MH的半定量计数结果必须在48h判断。

9.5 因标本的不均一性，可能会导致试剂条微孔接种量不均一，药物敏感性试验结果不合理。

（如：同一药物高浓度孔变红，低浓度孔没变红）。请重做药物敏感实验或弃用此药。

参考文献

支原体鉴定药敏试剂盒（培养法）说明书

1. 目的

规范肺炎支原体药物敏感试验标准操作规程，确保药敏结果的准确。

2. 适用范围

本操作规程适用于肺炎支原体。

3. 检验原理

肺炎支原体快检试剂的主要原理是因肺炎支原体在培养基中繁殖代谢的酸性产物致使培养液PH值下降而产生颜色变化。同理，肺炎支原体药敏检测板在各孔中包被有常用的抗支原体药物，将肺炎支原体快检试剂加注到检测板内进行同步培养，可根据检测板各相应孔中的抗生素对样本肺炎支原体的敏感程度不同而改变孔内的颜色变化进行观察，判定标准见结果判断。

4. 试验材料和仪器

肺炎支原体快检试剂盒肺炎支原体药敏检测板，加样器，35℃孵育箱。

5. 样本要求

5.1 采样部位及样本：咽后部、扁桃体部分的分泌物或痰液；

5.2 采样后立即接种，及时培养。

6. 操作步骤

6.1试剂器材准备：取Mp快检试剂1支于37°C孵至恒温摇匀，药敏板1块放于操作台，

取试剂50μL加入C-孔，盖上板盖。另取矿物油备用。

6.2采样接种：取无菌拭子1支，用生理盐水浸润甩干，于患者取样部位贴腔壁捻转一至两

圈；将拭子置试剂瓶内搅拌数次，靠瓶壁挤净，将拭子弃之，拧紧瓶盖，混匀。

6.3加样：打开药敏板盖，将接种好的试剂混匀，分别取50μL加入（除C-孔外）其余各孔，

在台面磨摇1min。每孔加矿物油1滴，盖上板盖，37±1°C培养，6h内观察。

7. 判断结果

清亮的黄色为阳性，淡红色或红色者为阴性，浑浊或有絮状为无效。

8. 注意事项

8.1 肺炎支原体鉴定药敏试剂盒仅供体外诊断用，属一次性使用产品；

8.2 接种培养出的阳性标本有一定潜在性生物危害，须浸于1:3的来苏尔液中灭活，再按医

疗垃圾处理。

8.3 严格按产品使用说明书操作。

9. 结果解释

9.1 采样时空腔中的食物残渣及酸性饮料可能影响结果判定。若接种后立即变浑浊、变黄或

伴有食物残渣则无效，必要时应让患者漱口，10min后重新采样检测。

9.2 加样培养后，药敏板C-孔显阳性或C+或C-孔均显阴性而药敏孔显阳性，检测无效。 参考文献

肺炎支原体快检试剂盒及肺炎支原体药敏检测板（培养法）说明书