输血能够迅速的补充血容量,纠正休克,增强机体供氧能力,增强抗病力,对抢救动物的生命有重要意义。然而,输血不当时,往往会引起不良反应,甚至危及动物生命。因此只有切实掌握了输血的规律,正确实施才能够达到预期的效果。
随着社会的发展,宠物已经成为家庭中不可或缺的部分,为了更好的拯救他们于危难之中,作为从业人员必须掌握配血与输血。
输血的适应症
1、输血疗法可适用于各种原因引起的贫血;
2、车祸、手术、外伤等引发的大失血;
3、剧烈呕吐、腹泻引起的血容量降低;
4、各种原因引起的休克;
5、血小板和凝血因子缺乏引起的凝血不良;
6、白细胞减少症和低蛋白血症等病症。
7、烧伤时,输血可有效预防休克;
输血的作用
1、输血可以起到迅速补充循环血量、维持一定的血压、增加血液的凝固性和血红蛋白的浓度、增加血液运输氧的能力以及刺激机体的造血机能、防止休克等作用。
2、另外对供血者采取相应的免疫后,其血制品对犬细小病毒、犬瘟热可产生特异性的抗病力。
配血试验
在临床上,输血前为了保证安全,应做配血试验,根据要求和实验室条件以分为交差配血和简易配血法。在配血之前我们还应掌握以下内容:
【犬的血型】 通过直接或间接凝集反应以及溶血反应,人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原(DEA)。到目前为止,已报道的犬血型有:红细胞抗原1.1(A1);红细胞抗原1.2(A2);红细胞抗原3(B);红细胞抗原4(C);红细胞抗原5(D);红细胞抗原6(F);红细胞抗原7(Tr)和红细胞抗原8(He),最近澳大利亚又发现犬有红细胞抗原1.3(A3)血型。
其中最强的抗原性因子: 红细胞抗原1.1;红细胞抗原1.2;红细胞抗原7。犬的红细胞表面不只有一个红细胞抗原,如红细胞可以是DEA1.1阳性或DEA1.1阴性,同时DEA1.1阴性的红细胞也可以是DEA1.2阳性或DEA1.2阴性,这些血型表现为等显性遗传。血型为DEA1.1、DEA1.2和DEA7阳性的犬血只能给相同血型的犬输;研究发现Greyhound(灵缇犬)出现DEA1.1和 DEA1.2阳性的机率很小 。
【供血者的选择要求】
1、供血犬的体重应大于25公斤;
2、年龄在2-8岁之间;
3、临床检查正常(包括血常规及血液生化);
4、定期注射疫苗;
5、供血者不应有红细胞抗原1.1、红细胞抗原1.2或红细胞抗原7。由于Greyhound(灵缇)血液的红细胞压积很高,静脉容易采血并且血液中很少含有DEA1.1、 DEA1.2和DEA7,可将Greyhound作为理想的供血者
6、根据地域的不同,相应淘汰存在原虫病供血者。
7、特别应注意供血者不可有受血经历。
8、不处于妊娠期的犬(包括有怀孕史的犬,犬怀孕时可以自动产生抗 DEA1.1的同种抗体,用其血或给其输血都易引起输血反应)。
9、采血量不应超过10毫升/公斤体重;
【血液的采集及保存】
可以从犬的颈静脉或从麻醉犬的股内动脉采集血液。采血常用的保存液:
1、枸橼酸磷酸葡萄糖(CPD);
2、枸橼酸磷酸葡萄糖腺嘌呤(CPD-A1)
3、酸性枸橼酸葡萄糖(ACD);
4、肝素。
【血液的保存】
1、犬的全血制品应保存在3-6℃的条件下,
2、另外应使抗凝剂和采血袋在采血前保持在5℃左右,以防止溶血。
3、采血过程中必须轻轻晃动采血袋。
【交叉配血试验】
1、交叉配血试验可以分为主侧配血和次侧配血两部分,
2、主侧配血是受血犬的血浆或血清和供血者的红细胞反应与否;
3、次侧配血是受血犬的红细胞与供血者的血浆或血清反应与否。
4、任何程度的凝集反应或溶血反应都表明血型不相容。
5、具体实验步骤为:
a. 分别取供血者和受血犬的新鲜血液,用EDTA抗凝。
b. 用0.9%氯化钠溶液洗三遍红细胞,分别以1000转/分钟离心15秒,去掉上清液。 c. 将红细胞泥配成4%红细胞盐水悬液。
d. 主侧配血:向10×75毫米的试管加入两滴供血者的4%红细胞盐水悬液和两滴受血犬的血清或血浆。
e. 次侧配血:向10×75毫米的试管加入两滴受血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴供血者的血清或血浆。
f. 以1000转/分钟离心1分钟。
g. 取出观察上清液有无溶血,轻轻晃动试管,观察有无凝血。
【简易的“三滴法”配血实验】
方法为取供血者血液1滴、受血犬血液1滴及抗凝剂1滴于载玻片上,混合后肉眼观察有无凝集,若无凝集,则可输血。
【输血方法】
1、静脉输血是最常用的一种方法。
2、如果静脉输血确实有困难,也可进行腹腔输血,但腹腔输血的作用比较慢。
3、幼犬静脉输血失败,可以进行骨髓内输血,用消毒后的20号针头或骨髓穿刺针刺入股骨或肱骨近端。
4、将血袋取出后反复颠倒数次,使沉积的红细胞充分混匀。
【输血并发症】
如果供血者和受血犬的血型相同,一般很少发生并发症。犬输血的并发症主要有:发热、过敏、溶血、循环负荷过重、低钙血症以及血凝病等。
发热和过敏主要表现为高热、红斑和瘙痒等症状,临床处理措施为减慢输血速度,给予退热剂,应用抗组织胺药物,如盐酸苯海拉明,剂量为2mg/kg;
溶血主要表现为血红蛋白血症、血红蛋白尿症、乏力、呕吐、发热、心动过速、急性肾衰
和凝血等症状,如果发生溶血反应,应立即停止输血,给予静脉输液以及皮质类固醇和抗组织胺药物;
循环负荷过重是由于输血量过大造成的,可以引起肺水肿,应用速尿处理,用量为2-4mg/kg;
低钙血症:输入大量含枸橼酸盐抗凝剂的血液可使犬产生低钙血症,犬临床表现为肌肉震颤、心率不齐或者呕吐。发生上述症状可以停止输血,一般可用葡萄糖酸钙治疗;
血凝病:大量输入全血或浓缩红细胞可以造成犬发生血凝病,可用富含血小板的血浆进行治疗。
交叉配血试验
交叉配血试验交叉配血是确定能否输血的重要依据,两侧均不凝集可输血。将献血人的红细胞和血清分别与受血人的血清和红细胞混合,观察有无凝集反应,这一试验称为交叉配血试验。
用交叉配血是确定能否输血的重要依据,两侧均不凝集可输血。若献血人红细胞与受血人血清(主侧)发生凝集应禁止输血;主侧不凝集,次侧(献血人血清与受血者红细胞)凝集,必要时可少量、慢速输血。
交叉配血不能只进行盐水介质交叉配血,在条件差的实验室也应该进行胶体介质配血,以尽量消除不完全抗体存在的危害,减少输血引起的不良反应。
在血型鉴定的基础上,通过交叉配血试验进一步证实受血者和供血者之间不存在血型不合的抗原一抗体反应,以保证受血者的输血安全。
因输血直接涉及病人的生命安全,故病人与献血员虽属同一血型也应进行交叉配血。 分类
交叉配血试验有多种方式,如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。
1、首先准备好受血者和献血者的血样。
2、配好用受血者血清配成的2%的红细胞悬液;用献血者血清配成的2%红细胞悬液。
3、主侧加受血者血清0.5ml,献血者血清配成的2%红细胞悬液0.25ml。
4、次侧加献血者血清0.5ml,受血者血清配成的2%的红细胞悬液0.25ml。
5、37度水浴箱孵育1小时,后观察有无凝集或溶血。
不同血型的人的血清中各含有不同的凝集素,即不含有对抗内他自身红细胞凝集原的凝集素。在A型人的血清中,只含有抗B凝集素;B型人的血清中,只含有抗A凝集素;AB型人的血清中没有抗A和抗B凝集素;而O型人的血清中则含有抗A和抗B凝集素。
在ABO系统血型相同的人之间进行输血,在输血前必须进行交叉配血试验(cross-match test),即不仅把供血者的红细胞与受血者的血清进行血清配合试验(这称为试验主侧);而且要把受血者的红细胞与供血者的血清作配合试验(这称为试验的次侧)。
这样,既可检验血型测定是否有误,又能发现他们的红细胞或血清中,是否还存在一些其它的凝集原或凝集素,足以引起红细胞凝集反应。在进行交叉式配血试验时,应在37℃下进行,以保证可能有的凝集反应得以充分显示。
试验方式
交叉配血试验有多种方式,如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。 胶体介质配血法
1、首先准备好受血者和献血者的血样。
2、配好用受血者血清配成的2%的红细胞悬液;用献血者血清配成的2%红细胞悬液。
3、主侧加受血者血清0.5ml,献血者血清配成的2%红细胞悬液0.25ml。
4、次侧加献血者血清0.5ml,受血者血清配成的2%的红细胞悬液0.25ml。
5、37度水浴箱孵育1小时,后观察有无凝集或溶血。
微柱凝胶试验
微柱凝胶试验(Microtubes Gel Test,MGT)是20世纪90年代先后进入国内实验室并用于交叉配血的新方法。在一些先进国家已成为常规的红细胞血型血清学检测技术。而凝聚胺用于不完全抗体的测定与鉴定以及交叉配血等血清学试验也已在国内迅速推广使用。该方法简便、时间短、结果明显。
诊断用人血型抗A血清、诊断用人血型抗B血清(常在血清中加入不同颜色的染料以示区别,如A型红色,B型蓝色)、生理盐水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%红细胞悬液、受血者的2%红细胞悬液。
结果观察
先观察上清液的颜色,然后再轻摇试管观察有无红细胞凝集现象发生;
结果判定:如试管内红细胞呈均匀混浊无颗粒出现即无凝集,上清液呈正常血清状颜色为交叉配血试验相合。如上清液呈红色即有溶血现象,红细胞成块即为凝集现象,为交叉配血试验不相合
正常范围主试验和副试验均不出现凝集(也不溶血)即说明受血者和供血者ABO血型相配。 主试验和副试验都不出现凝集和溶血现象才可输血。如果交叉配血试验的两侧都没有凝集反应,即为配血相合,可以进行输血;
若献血人红细胞与受血人血清(主侧)发生凝集应禁止输血,则为配血不合,其血绝对不可输入。
主试验不发生凝集,副试验发生凝集,可适当少量输血 (不宜超过200ml)。输血时不宜太快太多,并密切观察,如发生输血反应,应立即停止输注。
注意事项待检红细胞悬液不宜过稀或过浓;
所用的试剂必须在有效期内;
气温较高时,为防止标本干涸所致的假阳性,可将玻片放入有一湿棉球的平皿中。若室温过低,可将玻片置于28℃右右的温箱中;
注意区分红细胞的叠连现象与凝集现象。前者滴加生理盐水1~2滴混匀后,红细胞即可分散成浑浊状,而后者则不因此而改变;
利用已知A型和B型红细胞与一系列稀释的待检血清作凝集反应,根据凝集效价(以出现凝集的最高稀释度)的高低可作为判断体液免疫功能的一项指标。多数免疫功能正常的半岁婴儿,除AB型外,血清中相应的抗A效价≥1:8,抗B效价≥1:4。一岁后,凝集效价也相应提高。
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