尿液隐血4种分析方法的比较

尿液隐血4种分析方法的比较

永德县人民医院检验科  李永斌

摘要：尿液隐血检测有很多检测方法，现比较4种检测方法，综合分析其灵敏度、特异性等因素。在实际临床工作应灵活应用两种和（或）两种以上检测方法以提高尿液隐血检测的准确性。

关键词：隐血  单克隆抗体法  加热煮沸法  尿液

随着医学检验的不断发展，至今尿液隐血检测已成为肾病诊疗的常规手段。至今尿液分析仪的应用大大地提高了尿液隐血检测的准确性。但在实际检验工作中我们有时可遇到“假阴性”和“假阳性”。为尽量避免上述情况的发生，本文联合应用免疫法、干化学分析仪法、加热煮沸法和显微镜镜检法分析尿液标本隐血，比较4种方法的优缺点，结果如下：

1 材料与方法

1.1 标本来源  20##年2月至9月住院的肾病患者新鲜中段晨尿62例

1.2 仪器与试剂  尿化学检测仪为桂林市医疗电子仪器厂生产的Uritest-200A尿液检测仪，干化学试剂为优利特A系列尿试纸条使用尿液干化学分析试纸条；隐血胶体金检测试纸条；显微镜为日本欧林巴斯     型显微镜。

1.3 尿液标本的收集  用一次性塑料杯随机收集上述人员新鲜尿液充分混匀后用洁净试管取尿液10 ml。每份标本充分混匀后分成3管：第一管用尿十项检测分析仪分析，第二管煮沸尿液后进行检测，第三管用于显微镜尿沉渣检查。取一份新鲜全血，用正常尿液稀释成不同浓度的红细胞混悬液同上操作。

1.4 方法 （1）尿液干化学分析仪测定法，仪器操作严格按使用说明书进行，每天开机时均用校正带及纯水对仪器进行校正，用室内质量控制物随尿标本同时测定进行监控。标本收集后2 h内完成检测。尿液标本、试带在检测前恢复到室温（25 ℃）。将试带浸入尿液中2 s后取出，在滤纸上吸去多余的尿液，置于Uritest-200A自动尿十项分析仪分析。（2）免疫法，严格按照胶体金检测试条说明书操作。（3）加热煮沸法，将尿液煮沸2min,再用试带进行检测[1]。（4）显微镜尿沉渣检测，标本以相对离心力400 g(回转半径15 cm的水平离心机1 500 rpm)离心5 min，离心后手持离心管以45°～90°倾去上清液，离心管口用滤纸拭干,留取0.2 ml尿沉渣标本，使之浓缩50倍，充分摇匀后放入尿沉渣仪的检测平台镜检，在高倍镜（10×40）观察10个视野，记录结果［2］。

1.5数据处理  Uritest-200A尿液分析仪分析结果以RBC≥ 15/ul为out off值，尿沉渣镜检RBC≥12/μl为阳性。方法间比较用X2检验。

2 结果

2.1 4种方法检测尿液隐血灵敏度分析    结果见表1。结果显示，免疫法灵敏度最高，加热煮沸后干化学隐血阳性程度降低。对62例尿液标本隐血结果分析，各检测方法余显微镜检法经配对X2检验，结果见表2。免疫法、加热煮沸法与显微镜检法间差异无显著性（P0.05）；干化学法、尿十项分析仪检测法、加热煮沸后干化学法、干化学法检测尿液隐血阴性预测值分别为99.4%、98.7%、97.8%、98.1%；阳性预测值分别为94.0%、68.8%、90.3%、71.0%。

表1  3种方法检测不同RBC浓度的尿液隐血结果

3 讨论

干化学试纸法自动尿液分析仪是根据红细胞血红蛋白接触活性法原理，通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物，使邻联甲苯胺氧化呈色的原理检测隐血。由于尿液成分复杂，常存在有类似过氧化物酶活性的物质，如热不稳定过氧化物酶（易热酶）、肌红蛋白、某些细菌代谢产物等造成隐血结果假阳性，其中影响最多的是易热酶的存在[3]。由于易热酶不耐热，加热煮沸即可排除。62例尿液标本忠干化学试纸法阳性而显微镜检法阴性的  例尿液标本经加热煮沸后验证有   为阴性，经免疫法验证有   阴性。加热使蛋白质变性，但应注意不能长时间煮沸，否则将使尿液PH及其他成分发生变化，亚铁血红素（铁离子）的过氧化物酶样活性下降而降低隐血阳性程度[4]。

表2  62例尿液3种方法与显微镜法检测隐血结果

   

      注：与显微镜检法比较，﹡P＞0.05, ﹡﹡P＜0.05。

单克隆抗体免疫胶体金法利用抗人球蛋白单克隆抗体进行隐血检测。其检测灵敏度高（0.2ug/ml,2个RBC/HP）且能检出溶解的红细胞，大大提高乐隐血检测的阳性率。

综上所述，尿液干化学分析不仅提高红细胞的检测敏感度，尤其对某些疾病或某些因素使红细胞破坏的尿液标本，在显微镜下无法观察到的情况下，尿液分析可提供一定的参考价值。免疫法和加热煮沸法同时具有较高的阴性预测值和阳性预测值，可作为尿液隐血检测较为有效的验证方法。我们在实际工作中要能够结合病人自身情况，合理解析实验结果，决不能只看尿液分析仪的检测结果，而忽视镜检，绝不能以干化学法代替镜检法。尿液干化学分析隐血、免疫法检测隐血、加热煮沸法联合显微镜检法的灵活运用可以提高尿液隐血检测的准确性。

参考文献：

1叶应抚 王毓三 申子瑜主编，《全国临床检验操作规程》第三版，中华人民共和国卫生部医政司，20##年283页

2罗春丽主编《临床检验基础》，第2版，北京：人民卫生出版社,20##年171页

3祁琳等，尿中念珠菌对尿液分析仪分析隐血项的影响，苏州大学学报（医学版），20##年23期291页

4王桂兰等，对加热煮沸法排除干化学法尿液隐血假阳性的初探，现代检验医学杂志，2002，17期8页

 

第二篇：尿液潜血两种检验方法的比较

尿液潜血两种检验方法的比较

目的：对尿液分析仪检测尿潜血反应和镜检红细胞(RBC)两种检验方法的结果进行比较。方法：对543 例门诊、住院患者的尿样按照仪器操作规程进行尿液分析仪检测和显微镜检查。结果：尿液分析仪潜血反应阳性，同时镜检有红细胞者260 例，镜检无红细胞者30 例。尿液分析仪潜血反应阴性，镜检有红细胞者40 例，无红细胞者213 例。两种方法结果出现差异。结论：临床工作中尿液分析仪潜血反应与显微镜检查红细胞应联合进行，尤其是显微镜检查至关重要。

【关键词】 尿液分析仪;潜血反应;镜检红细胞

尿液分析仪是尿常规检测的手段之一，其简便、快速为临床诊断提供了方便。显微镜检查是目前检测尿液有形成分的主要手段，但其检查耗时费力。对543 例门诊、住院患者的尿样按照仪器操作规程进行尿液分析仪检测和显微镜检查，并对两种方法的符合程度进行了比较。

1 原理与方法

1.1 原理

尿液分析仪测定尿潜血的反应原理：尿液分析仪使用的是干化学试纸法，根据多联试带上各模块与尿液成分发生化学反应后颜色变化的深浅来检测尿液中的某化学物质，如直接检测红细胞、白细胞的胞质内涵物，间接推断细胞的有无。具体地说，血红蛋白中亚铁血红素的过氧化物酶样活性可使过氧化物分解释放出新生态氧，后者氧化底物邻甲苯胺变成邻联甲苯胺，发生由黄色草绿色深蓝色的颜色变化，反应颜色的深浅与尿液被检测成分成正比。尿液显微镜检查则是通过显微镜的放大作用直接将细胞等有形成分直观真实地呈现在镜下，是对底物的真实反映。

1.2 方法

1.2.1 尿液分析仪检测尿潜血

使用尿液分析仪与仪器配套的尿分析试纸条，于混匀的10 mL新鲜尿液中浸入尿试纸条1 s后取出，上仪器进行测定。实验测定后，自动打印结果。

1.2.2 镜检方法

取尿液10 mL于试管中，在离心力为400 g、回转半径15 cm、水平离心机1 500 r/min条件下有效离心5 min。然后手持离心管45°～90°弃去上层液，保留0.2 mL尿沉渣，轻轻混匀后，取20 μL于载玻片上镜检。首先在10个低倍镜下观察尿沉渣的分布情况，再转高倍镜视野仔细观察细胞，记录10个视野的红细胞数，计算出平均值报告。如数量过多可报告红细胞占视野的面积情况，如1/3视野、1/2视野、满视野等。

1.3 统计学方法

采用χ2检验。

2 结 果

对543 例门诊、住院患者的尿液用尿液分析仪潜血反应检测和镜检两种方法同时检查。结果为：尿液分析仪潜血反应阳性率为53.4%;镜检红细胞阳性率为55.2%(见表1)。表1 543 例尿液潜血反应与镜检法测定结果比较 对543 例尿液潜血反应和镜检红细胞检验结果分级比较镜检结果：尿液分析仪潜血反应阳性，镜检有红细胞者260 例，镜检无红细胞者30 例。尿液分析仪潜血反应阴性镜检有红细胞者40 例，镜检无红细胞者213 例。经统计学检验两种方法结果比较差异有统计学意义。

3 讨 论

由于两种检验方法的原理不同，影响它们的因素也不同，因而两种检验方法的结果存在一定的差异，主要影响因素有以下几方面。

3.1 假阳性

即尿液分析仪潜血反应阳性，镜检阴性。其常见原因有：第一，血红蛋白尿液分析仪潜血反应既能与完整的红细胞发生阳性反应，也可与红细胞溶解释放的血红蛋白发生阳性反应，而显微镜只能检出尿中未溶解的红细胞。健康人尿中血红蛋白含量极微，定性为阴性。第二，肌红蛋白分子中也含有血红蛋白基团，具有过氧化酶活性。当心肌或骨骼肌发生严重损伤时，血浆肌红蛋白增高，经肾排泄，使尿液肌红蛋白含量增高，故潜血反应阳性，镜检阴性[1]。第三，某些患者尿液中含有对热不稳定酶，也可使试剂块发生颜色改变，出现潜血反应阳性，镜检为阴性。第四，某些氧化性污染物，例如次氯酸盐会导致潜血反应假阳性，镜检阴性。第五，菌尿。尿液是细菌良好的培养基，菌尿时有些细菌会产生氧化性物质，使得试剂块发生颜色变化，导致潜血反应阳性，如尿路感染时，由于细菌产生氧化物可引起假阳性反应，镜检为阴性。第六，长时间存放及高温试验证明，标本不新鲜，存放时间长或高温存放，使得潜血反应的阳性率相对增高，而红细胞镜检相应减少，测试结果极有可能出现假阳性。第七，尿试纸条的超期使用、被污染、不妥善保存、操作方法不正确、尿液分析仪灵敏度过高等都会引起测试结果假阳性，而镜检阴性。

3.2 假阴性

即镜检阳性，尿液分析仪潜血反应阴性，其常见原因有：食物或药物的影响，由于饮食或药物使尿液呈碱性时，红细胞溶解破裂，形成褐色颗粒，潜血反应呈阳性，而镜检呈阴性;维生素C尿液中大量存在时，能竞争性夺取反应产生的氧，引起假阴性反应[2];高比重、高蛋白尿样降低了试剂块潜血反应的灵敏度，使潜血反应呈现假阴性;尿液中黏液成分增多，使红细胞被包裹起来，试剂接触不到血红蛋白，而使潜血反应呈现假阴性[3]。

3.3 离心对结果的影响

离心时，如速度过快，可使有形成分破坏;但速度过慢，当每毫升尿液中的红细胞在5 000个以下时，沉渣中可能找不到红细胞，以致把隐匿型肾小球肾炎漏掉，因而在对检验结果有怀疑时，可用潜血反应证实。

综上所述，检测尿中红细胞异常敏感，有时可与镜检结果存在差异，要充分考虑影响测定结果的因素，并结合临床进行全面分析，原则上尿液分析仪潜血反应阳性结果都应以显微镜法复检，这是保证尿液检验质量的重要环节和关键所在，对于尿液分析仪法测定的阴性结果与镜检不一致的也应复查，以确保测定结果的准确可靠。迄今为止，没有1台仪器的检测结果能完全替代显微镜，尿沉渣镜检以其独特的临床价值仍是尿液分析中不可缺少的检查手段。

【参考文献】

[1]何艳.尿液分析仪检测尿隐血与镜检红细胞对照[J].今日科技，2000，10(1)：36.

[2]刘玉华.尿液干化学分析的常见影响因素[J].现代诊断与治疗，2006，17(2)：116.

[3]袁凤荣，孙艳萍.尿液分析仪法潜血反应和镜检红细胞关系的分析[J].哈尔滨医药，2002，22(4)：59.

相关推荐

专栏推荐