二、 影响红细胞渗透脆性的因素有哪些？

红细胞自身因素;凡能影响红细胞表面积/体积的因素均可影响红细胞渗透脆性，如珠蛋白数量不足或完全缺乏、遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血伴继发球形细胞增多、缺铁性贫血、红细胞寿命、等

实验因素：血液放置时间较长（一般不能超过6小时）、低渗盐溶液的浓度不准确、实验器具未清洁干燥、试管编号错误、向试管内滴加血液或混匀含红细胞的液体时动作用力过大、有凝血、抗凝剂用量过多、等

【课前讲解】

一、 实验设计的原理

将红细胞悬浮于低渗盐溶液中，水将在渗透压差的作用下渗入细胞，于是红细胞发生膨胀，由正常的双凹圆碟形变成球形，并开始破裂而发生溶血。红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性高低的指标。对低渗盐溶液抵抗力小，表示渗透脆性高；相反，则表示渗透脆性低。同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中可检测其抵抗力的大小，刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最小抵抗力；出现完全溶血溶液浓度，为该血液中红细胞的最大抵抗力。前者代表红细胞的最大渗透脆性，后者代表红细胞的最小渗透脆性。

生理学上将渗透压与血浆的渗透压相等的溶液称为等渗溶液；能使悬浮于其中的红细胞保持正常体积和形态的溶液称为等张溶液。等渗溶液不一定是等张溶液，如1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液；而等张溶液溶液一定是等渗溶液，如浓度为0.85%的NaCl溶液既是等渗溶液又是等张溶液。

成败关键（注意事项）

1. 血液最好新鲜制备。

2. 准确配制不同浓度的低渗盐溶液。

3. 所有玻璃器皿要求干燥清洁。

4. 向试管内滴加血液时不可用力挤压，不可将血泡沫注入试管。混匀含红细胞的液体时动作应轻，以免造成溶血。

5. 观察溶血情况时以白色为背景。

6. 为使各管加血量相同，加血时持针角度应一致。

一、 结果分析

将红细胞悬浮于低渗盐溶液中，水将在渗透压的作用下渗入细胞，于是红细胞发生膨胀，由正常的双凹圆碟形变成球形，并开始破裂而发生溶血。红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。生理情况下，衰老的红细胞可变形性减小，变成球形，因而对低渗盐溶液抵抗力低，会先发生破裂，正常人刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为0.46%~0.42%NaCl溶液；而较幼稚

的红细胞的抵抗力高，较后发生破裂，正常人出现完全溶血的NaCl溶液浓度为0..34%~0.32% NaCl溶液。

红细胞膜对水分子可自由通透，水分子依渗透压梯度进入红细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，红细胞在蒸馏水中立即发生溶血。

红细胞膜对尿素分子可自由通透，尿素分子依浓度梯度进入红细胞，而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜，导致红细胞内渗透压增高，水进入细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，

1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液。

NaCl分子和红细胞内的物质都不易透过红细胞膜，故红细胞在等渗的0.85%的NaCl溶液中不会发生溶血，因此，0.85%的NaCl溶液既是等渗溶液又是等张溶液。

二、 非预期结果及可能原因分析

血液放置过久；混匀血液或向试管内滴加血液时用力过大；肝素抗凝时用量过多；玻璃器皿未干燥。

2. 溶血程度不随NaCl溶液浓度改变而有规律地变化，原因主要有：

各试管加血量不准确；试管编号不准；溶液浓度配制不准。

【参考结论】

1. 红细胞在小于或等于0.46%浓度的低渗盐溶液中会发生溶血。

2. 正常人红细胞渗透脆性最高值为0.46%～0.42% 的NaCl溶液，最低值为0.34%～0.32% 的NaCl溶液。

3. 红细胞在等渗盐溶液中为双凹圆碟形，在低渗盐溶液中为球形。

4. 红细胞在等渗的尿素溶液或蒸馏水中会立即发生溶血。

【实验报告要点】

一、 为什么同一个体的红细胞渗透脆性有最大值和最小值？

同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。生理情况下，衰老的红细胞可变形性减小，变成球形，因而对低渗盐溶液抵抗力低，会先发生破裂；而较幼稚的红细胞的抵抗力高，较后发生破裂。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中，刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最大渗透脆性，出现完全溶血的溶液浓度，为该血液中红细胞的最小渗透脆性。

二、 红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会发生什么现象？为何出现这种现象？

红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会立即溶血。因红细胞膜对尿素分子可自由通透，尿素分子依浓度梯度进入红细胞，而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜，导致红细胞内渗透压增高，水进入细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液。

【参考内容】

一、红细胞渗透脆性实验的临床意义

【临床意义】

红细胞在低渗盐水中，水分透过细胞膜可使红细胞逐渐胀大而破坏。本试验是测定红细胞对各种浓度的低渗溶液的抵抗力。红细胞对低渗溶液抵抗力与其厚度有关，厚度越大，膜面

积与体积比值越小，则渗透脆性越大。

1.红细胞脆性增加 遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。

2.红细胞脆性减低 见于各型海洋性贫血，包括轻型，重型β海洋性贫血及血红蛋白增多病。缺铁性贫血，镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况，如肝病等。

 

第二篇：实验三 红细胞脆性试验

实验三  红细胞脆性试验

[实验目的]

测定红细胞细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力。亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。

[实验原理]

正常的红细胞系混悬于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞因失去内部液体而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水分进入红细胞，使红细胞两面凹陷的圆盘形变为球形，如继续膨大，即发生破裂溶解，形成溶血。红细胞脆性试验就是测定红细胞对低于0.9％ NaCl溶液的耐受能力。耐受力高者，红细胞不易破裂，即脆性低。反之，耐受力低者，红细胞易于破裂，即脆性高。

凡上层液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或最小抗力（红细胞的最小抵抗力）。

凡液体呈均匀红色，管底无红细胞下沉，则称完全溶血或最大抗力 （红细胞的最大抵抗力）。

正常红细胞的最小渗透抵抗力为0.4~0.5NaCl%溶液，最大渗透抵抗力为0.3~0.35%NaCl溶液。一般说，刚成熟的红细胞膜的渗透脆性较小，而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。

生理学上将与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液；而将能维持红细胞正常形态、大小和悬浮于其中的溶液称为等张溶液。等渗溶液不一定是等张溶液（如1.99%的尿素溶液），但等张溶液一定是等渗溶。

[实验动物]

鸡

[器材及药品]

试管，试管架，吸管，新鲜血（或去纤维蛋白血），1％NaCl，蒸馏水。

[方法与步骤]

1．先将试管分别排列在试管架上，按下表把1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液，每管溶液均为2毫升。  

2．采取血液，并在上列各管中各加入大小相等的血液l滴，然后用拇指堵住试管口，将试管慢慢倒置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。

3．在室温下静置~21小时，观察结果。

4．依下列标准判定出有无溶血、不完全溶血或完全溶血的氯化钠百分比浓度。

（1）试管内液体下层为浑浊红色，上层为无色或极淡色的液体，说明红细胞没有溶解。

（2）小试管内液体下层为浑浊红色，说明有未溶解的红细胞，而上层出现透明红色，说明有部分红细胞破坏和溶解，称为不完全溶血。开始出现部分溶血的盐溶液浓度，既为红细胞的最小抵抗力（表示红细胞的最大脆性）。

（3）小试管内液体完全变成透明红色，管底无红细胞沉积，说明红细胞完全溶解，称为完全溶血。引起红细胞最先全部溶解的盐溶液的浓度，既为红细胞的最大抵抗力（表示红细胞的最小脆性）。

（4）记录被检红细胞脆性范围，既开始溶解时的盐溶液浓度与全部溶解时的盐溶液浓度。

[注意事项]

1．配制的各种NaCl溶液必须准确。

2．各管中加入的血滴大小应尽量相等。

3．混匀时轻轻倾倒1～2次，减少机械震动，避免人为溶血。

4． 应在光线明亮处判定结果。