实验二细胞膜的通透性

实验二细胞膜通透性

一、实验目的

1. 掌握细胞膜通透性的实验方法。

2. 观察并掌握相对分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质对细胞膜通透性的影响。

二、实验原理

细胞膜在不断变化的环境中必须保持自身的稳定状态才有生存。细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻止另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。

水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象就是渗透。

将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。将红细胞放在某些等渗盐溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，膜两侧的渗透压平衡会发生改变，也会发生溶血现象。

在不同相对分子量、脂溶性大小以及电解质和非电解质等各种溶液中，红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验通过观察红细胞溶血现象时间的不同来记录渗入速度，从而测量各种物质通透性的差别。

三、实验用品

1. 实验材料

血液（兔血或鸡血，含适量肝素）

2. 仪器

50mL烧杯、10ml试管、试管架、移液枪及枪尖，标签纸、吸水纸等。

3. 主要试剂

0.17 mol/L氯化钠 0.17 mol/L氯化铵 0.17 mol/L醋酸铵

0.17 mol/L硝酸钠 0.17 mol/L草酸铵 0.12 mol/L硫酸钠

0.32 mol/L葡萄糖 0.32 mol/L甘油 0.32 mol/L乙醇

蒸馏水

四、实验方法与步骤

1. 制备10%血红细胞悬液：把一份动物血液和10份0.17M氯化钠溶液加入到50ml烧杯中即为稀释的血红细胞悬液（不透明的红色液体）。

2. 溶血实验：取0.3ml动物红细胞悬液加入到3ml蒸馏水的试管中，晃动试管使之混合均匀，注意观察溶液的颜色变化，溶液由不透明的红色变为透明的红色，红细胞发生破裂，造成100%红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液。记录发生溶血（可以通过试管壁看清实验指导上的字为标准）的时间（自加入稀释血液到溶液变成红色透明澄清所需的时间）。

3. 红细胞的渗透性：取10支试管，分别加入3ml不同的等渗溶液，做好标记后，分别加入0.3ml红细胞悬液，轻轻振荡，仔细观察是否发生溶血并记录发生溶血的时间。

五、实验结果

将不同等渗溶液下的溶血现象列表，分析（是否发生溶血以及溶血发生的时间、原因）。

六、思考

脂溶性与水溶性、小分子与大分子、极性与非极性、带电荷与不带电荷物质，分别是哪一种更容易穿过质膜？

七、注意事项

1. 溶血现象可用一张有字的白纸来辅助识别，能够清楚地透过溶液看到溶液后方纸上清晰的字迹时，为完全溶血。

2. 因相对分子质量大小对膜通透性有影响，所以将溶血时间适当地延长至15min，15min时仍然不溶即判断为不溶血。

3. 注意同组实验过程的同步性，尤其滴加血液的操作要迅速。

4. 试管中有红细胞和测试溶液时，不要强力摇晃，以免造成人为的红细胞破裂。

5. 各试管中加入的试剂量一致，血量也要一致。