实验预习报告

益母草注射液对大鼠离体子宫平滑肌的作用

一、【目的】

1、掌握大鼠离体子宫实验方法。

2、观察益母草注射液对大鼠离体子宫活动的作用。

二、【原理】

益母草为活血化瘀药，主要成分是益母草碱，实验研究表明益母草及益母草碱可以使子宫平滑肌收缩，对子宫呈兴奋作用：并且益母草碱的作用和剂量有关

三、【材料】

动物：成熟雌性大鼠，未孕。

器材：麦氏浴槽、恒温水浴、L型通气管、生理记录仪、肌力换能 器、 注射器、烧杯、手术剪、眼科剪、眼科镊、培养皿、丝线、娃心夹。

药物：益母草注射剂。

试剂：己烯雌酚注射液（1mg/ml）、 3%戊巴比妥钠溶液、戴雅隆氏液。

四. 【实验方法及步骤】

1.实验24小时前注射己烯雌酚注射液剂量0.2mg/100g（提高子宫对药物的敏感性）。

2.安装实验装置，调节仪器：浴槽内加入戴雅隆氏液，水温恒定38±0.5℃，空气通入量60—100个气泡/min.

3.大鼠处死，迅速剪开腹腔，剥去子宫周围组织，从子宫两角相连处

剪断，取出放置于有戴雅隆氏液的培养皿，清除多余组织。从子宫两角相连处剪开，取一侧子宫角（3cm），两端用线及结扎，固定于L型通气管小勾上，另一端与肌力换能器相连，给予1g负荷待收缩平稳后记录一段正常收缩曲线（10分钟）。

4.按下表加入不同浓度的益母草注射剂（直接加到浴槽中）反应明显后，更换已预温到38±0.5℃的新鲜营养液（冲洗3次），静置适当时间，待子宫收缩恢复正常时记录一段曲线即可再行实验。

五. 【实验数据记录】

频率（次／10min) 幅度（mm) 活动力（次×mm) 药物浓度

(ug/ml) 药前 药后 药前 药后 药前 药后

0.2

0.4

0.8

1.6

3.2

六. 【注意事项】

1.戴雅隆氏液宜在实验当日配置。

2.取子宫的时候要动作迅速轻柔，切忌过度牵拉。

3.益母草碱的剂量（浓度）因受实验器材、实验条件等因素影响而略有差异，可经预试后确定。

七. 【思考题】

1.益母草兴奋子宫的成分和机理？

2.根据实验结果分析剂量和效应是否相关；绘制量效关系图。

3.益母草提取液不同剂量对子宫的作用有什么不同？量效关系如何？

 

第二篇：综合性实验预习报告

综合性实验预习报告

实验目的：通过对植株的特殊处理，从实验现象深入的了解盐分对植物生长发育的影响，掌握植物的盐适应及抗盐机理。从而改变植株生活环境，提高作物产量。

实验材料：玉米种子  氯化钠溶液

实验处理：种子用10%的NaClo4 消毒10min，用自来水充分冲洗，再用蒸馏水冲洗。用蒸馏水浸泡吸涨，放入培养箱中适宜温度下萌发，挑选芽长势一致的种子播于培养器中，放在阳光充足的地方进行培养。挑选长势一致的三叶期玉米幼苗进行以下处理。对照(CK)：1/4 Hoagland 溶液。 盐胁迫处理（k0）：含150 mmol/L NaCl 的1/4 Hoagland( 霍格兰培养液) 溶液。施钾后盐胁迫处理处理（k1）:150 mmoL/L NaCl+1/4 Hoagland +6mmoL/L KCl（营养液中总K+浓度为9 mmoL/L），三次重复。测定指标：

1. 用Handy PEA叶绿素荧光仪测定初始荧光（Fo），PSII最大光能转换效率（Fv/Fm），非光化学淬灭(NPQ)。测定前暗适应20min，同一处理重复四次（三个平行）,取平均值。

2. 便携式光合测定仪进行叶片活体测定，测定叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、细胞间隙C02浓度(Ci)。同一处理重复3次，每片叶片读取三次数值并计算平均值。

3. 对不同时间断植物的根系活力进行测定，同一处理重复三次，每个材料读取三次数值，并计算平均值。

实验内容：

一、叶绿素含量测定

操作步骤
取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，去除中脉剪碎。称取剪碎的新鲜样品2g，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10mL，继续研磨至组织变白。静置3～5min。
取滤纸1张置于漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗，滤液流至100mL 棕色容量瓶中；用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。
用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至100mL，摇匀。
取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度，以95％乙醇为空白对照。

计算
按照实验原理中提供的经验公式，分别计算植物材料中叶绿素a、b 和总叶绿素的含量
叶绿素a= （12.7 A665 -2.69 A645）×    

叶绿素b=（12.7 A645 - 2.69A665）×

总叶绿素a=（20.0A645 + 8.02 A665 ）×

或总叶绿素a=

二、植物光合速率测定

LI-6400光合作用测定仪操作过程相当复杂，这里仅简单介绍其测量的过程，由于该仪器比较昂贵，同学们一定要在教师的指导下进行操作。

仪器连接

1)将连接电缆与操作控制台连接

将25针的连接器一端插入标有［IRGA］的插座中，另一端插入标有“CHAMBER”插座中，并且拧紧连接器上的螺丝钉（注意不要拧得太紧，否则螺丝钉将被折断）。将末端有黑色标记的软管与操作台右端标有［SAMPLE］的端口（管口有黑色皮垫）连接，另外一个软管（无黑色标记）与标有［REF］的端口（管口无黑色皮垫）连接。标有［INLET］的端口（套有红色软管）是空气的入口。在空气进口处连接一个缓冲瓶，悬挂在空中2~3 m处，以防止污物进入主机，同时在测量过程中可减少空气流动对测量结果的影响。

2)连接电缆与IRGA头部

圆形IRGA端口上的红色圆点和IRGA分析器上的红色选点对齐时才能顺利插进，并且能听到响声。

OPEN程序加载

(1)开机【open】。

(1)      OPEN程序安装。必须选择Enter键OPEN程序才会被安装。

(2)      选择配置文件。配置文件一定要选择与IRGA分析器头部安装的叶室类型一

致。厂家默认配置（factory default）是2 cm×3 cm标准叶室，即利用太阳光源、不能对叶室中的光照强度进行控制。

(4)Power up the IRGAs,此处应该选择“Y”。

仪器校正

1)流量校正

选择［Flow Meter Zero］，10s后流量信号应该在±1 mv以内。然后选择［OK］或【F5】。如果仪器不能自调，则用手动调节【F1】和【F2】,再选择【esc】返回校正主菜单。

2) CO2和H2O零点校正

（1）关闭叶室。叶室中不能有叶片，然后选择“Y”。

（2）CO2零点校正。将药品罐上的BYPASS旋钮螺旋到清洗CO2（Scrubber CO2）和水分干燥（H2O desiccant）方向；当 CO2读数波动小于 0.1，认为读数稳定；按下Auto CO2,仪器将自动调整CO2零点，调整结束后，CO2读数基本为零；按 QUIT（F5） 退出。

（3）H2O零点校正。保持药品罐不动；当 H2O波动小于 0.01 时，认为读数稳定；按下Auto H2O，仪器会自动调整H2O零点，调整（至少15 m）结束后，H2O 的读数基本为零；按 QUIT（F5） 退出。

3）CO2 Mixer校正

（1）在［Calibration Menu］中选择［CO2 Mixer Calibrate］，并将CO2调节旋钮拧至Scrub，并关闭叶室，拧紧Cylinder Cover使钢瓶中CO2释放。

（2）［Ok to continue］，选择［Y］。

（3）仪器自动检测CO2 Mixer的最大值，应该在2200 ppm左右，并达到稳定。

（4） CO2 Mixer为0~5000 mV进行8个点的自动校正，每个点大约需要20~30 s

（5）［Plot this （Y/N）］，选择［Y］。

（6）显示校正数据的图形，近似为直线。

（7）应用校正结果［Implement this calibration（Y/N）］，选择［Y］。

（8）选择［esc］键返回到校正主菜单。

4.数据测量

（1）打开一个保存测量数据的文件。

（2）输入保存测量数据的目的文件名。

（3）增加标记以便数据的分析。

（4）夹入叶片。

（5）匹配：如果ΔCO2 ＞0.5 (正常值可以＜ 0.3)，则需要按【F5】 “Match”（匹配 ）。

（6）手动或自动保存测量数据，保存功能键按【F1】；

（7）关闭（close）文件，保存数据文件按【F3】，然后建立新文件，开始新的测量。

5.数据导出

安装数据下载软件（LI-6400的Excel下载软件及气体交换方程的Excel计算软件），或者导出文本文件后，在SPSS中打开，进行统计分析和作图，分析实验结果。

三、叶绿素荧光参数测定

1、打开电源开关，FMS便默认“Local mode”，在运行菜单前会出现一个仪器版本的指示。

　　2、运行菜单：当首次打开仪器后，仪器会自动默认script number 1和最后使用的手稿程序，同时显示还剩余内存以及完成Script所用的时间。

　　3、按Run键运行手稿。

　　4、选择不同的Script：FMS主机中有六个贮存区，每个区可以容纳一个单独的实验。通过“Exp”功能键选择试验需要的手稿。

　　5、检查仪器参数状态：按“Stat”键，修改仪器存储荧光数据的存储方式、剩余的内存空间等。

　　6、测定：将叶片适应夹夹到叶片上暗适应10～30min后，把暗适配器按放到暗适应夹上，打开暗适应夹的拉杆，按“RUN”进行测定。

　　7、显示测定结果后按“SAVE”键，保存测定的荧光参数，进行下一个样品的测定。

　　8、向PC上装载数据：将主机与PC机连接，启动“Modfluor”软件，把曲线数据传输到计算机中。

　　9、将参数数据下载到计算机中：启动“Parview”软件程序传输荧光参数。

　　4．小结与讨论

植物耐盐性的大小由植物的遗传性决定 ，植物耐盐性状是一种典型的数量性状，是受多基因控制决定而表现出来的，其分子机制十分复杂，涉及多种基因和大分子的协同作用[11]。其中与耐盐性密切相关的是植物的发育阶段和植物种类及品种，盐分抑制种子萌发，其抑制程度随着盐浓度的增加而增大。植物耐盐性状是一种典型的数量性状，是受多基因控制决定而表现出来的，其分子机制十分复杂，涉及多种基因和大分子的协同作用，因此在不同盐分浓度下，树种耐盐性指标不是完全相同的。植物适应环境的结构机理是复杂的，不同环境导致植物体结构的不同，盐渍环境不但影响植物的生长，而且诱导其结构和形态发生变化变化了的盐生植物结构，特征就是对盐碱逆境的适应[12]

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