实验二 邻二氮菲分光光度法测定微量铁

试验目的

1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。

2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法。

3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长的选择。

4.掌握标准曲线的绘制及应用。

实验原理

邻二氮菲（1,10-邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe离子形成红色配位离子：

在pH=3~9范围内，该反应迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1*10⁴，反应十分灵敏，Fe²⁺离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液与样品溶液的酸度，采用盐酸羟胺还原标准液及样品溶液中的Fe³⁺离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。

实验仪器与试剂

1.V-1100D型可见分光光度计

2.标准铁储备溶液（1.00×10^-3mol/L）

3.邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）

4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）

5.醋酸盐缓冲液

6.50ml容量瓶7个

7.5ml移液管4只

8.1cm玻璃比色皿2个

9.铁样品溶液

实验步骤

1.标准系列溶液及样品溶液配制：按照下表配制标准系列溶液及样品溶液。

2.吸收曲线绘制：用1cm的比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在不同波长下的吸光度，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。

3.标准曲线制作：在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。

实验数据处理与结果

1.吸收曲线：

2.标准曲线：

样品铁溶液中铁含量计算：Cx=C_读取值×=9.9×10^-4_mol/L

摩尔系数计算：==1.219×10⁴

实验思考与讨论

1.标准曲线的线性不好的原因：所选标准溶液的浓度可能只有一部分在线性范围内，该实验5、6号之间的线性不是很好，很大的原因可能是它们之间的某一浓度之后便超出了线性的范围。

2.红色配位物摩尔吸收系数1.219×10⁴与文献值并不完全一致，导致它们不相同的原因可能是：①实验和理论所选的最大吸收波长不一致②实验配制的溶液与标准理论所得值所用溶液不同，存在误差。③不排除操作时溶液放置时间过久，导致部分物质被氧化，吸光能力改变，引起摩尔吸收系数测量值的改变。

3.如果各个测定值的酸度不同，会给实验结果带来的影响：即所配的系列标准溶液内的pH不同，各个浓度梯度的系列标准溶液反应生成红色配位离子的速度级程度不同，导致吸光度的值不是标准值，引起标准曲线不精准，最终影响待测溶液浓度的计算。

 

第二篇：邻二氮氮菲分光光度法测定试样中的微量铁