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琼脂糖凝胶电泳实验
1、需要的仪器(以下所有仪器均为新课标新增仪器):
微量可调移液器
2
、实验步骤:
1、在三角瓶中加入琼脂糖,然后加入电泳缓冲液。(试剂盒中提供),瓶口用橡皮筋和封口膜封住。 2、将三角瓶放在微波炉或者水浴锅中加热,待所有的琼脂糖颗粒溶解。
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3、将制作好的琼脂糖凝胶液缓慢倒入制胶器中。
4、待琼脂糖凝胶液冷却后,竖直拔出梳子。放入电泳槽内,缓缓加入电泳缓冲液
5、用移液器吸取样品点在琼脂糖凝胶上的梳井中。
6、盖上电泳槽的盖子,将电泳槽的电源与电泳仪相连,然后进行电泳。
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7、电泳结束后,将凝胶放入DNA图谱观察仪中,进行观察。
琼脂糖凝胶电泳实验
20##-11-03 09:43:56 来源:生物秀 评论:0 我要评论
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凝胶加样缓冲液
使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三:增大样品密度;以确保DNA均匀进入样品孔内;使样品呈现颜色,从而使加样操作更为便利,含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍,而与琼脂糖浓度无关。以0.5×TBF作电泳液时,溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速 率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。在琼脂糖浓度为0.5%~1.4%的范围内,这些对应 关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。
选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。但是,对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料,因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。
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