肺炎支原体检测样本采集标准操作规程

1目的

本程序规范样品的采集，以确保检验结果的准确。

2范围

适用于郑州安图绿科生物工程有限公司生产的肺炎支原体培养药敏试剂盒所检测的临床样本。

3 工作程序

采样人员必须经过培训合格，方可进行采样。对于患者自行收取标本，须接受专业人员的指导。 采样前，采样人员根据申请者申请的检验项目的要求，确认采样计划和进行适当的准备工作。这些准备包括核对医嘱，打印条形码，选择恰当的容器粘贴条形码，指导患者做好采样前的。

采样容器应贴（或记号笔注明）含有验单上的ID号或住院号、病人姓名和临床科室等资料的条码，条码不能全包试管妨碍观察标本情况。用申请单包裹标本时，应将有病人姓名和检验项目的一面包在最外层。

采样人员必须根据检验项目的要求和计划以及医嘱要求执行的时间,选择恰当的部分,采集适当的样品量。实验室应定期评审检验所需的样品量，保证样品量适合所进行的检验。采集标本前必顺认真核对患者、标本容器和检验申请是否一致，严防差错。

3.1 采集器皿：

3.1.1 无菌痰杯：用于痰液采样使用。

3.1.2 无菌拭子：用于咽拭子采样使用。无菌拭子包括有采样棒，采样棉棒，采样棉签，一次性拭子等。

3.2 痰液的采集

3.2.1 以采集清晨第1-2口痰为佳。

3.2.2 自然咯痰法：先让病人用清水漱口数次，以除去口腔内大量杂菌，用力自气管深部咳出痰液吐至无菌试管内，对于痰量少或无痰的病人可采用雾化吸入加温至45℃的10%氯化钠水溶液而使痰易排出。

3.3 咽拭子标本的采集

3.3.1 采取前数小时不得用消毒药物漱口，对刚治疗过或用药物的患者，最好在停药24小时后采集标本。

3.3.2用棉拭子采集咽部标本时应小心、准确，避免触及舌、口腔粘膜和唾液，以免污染。

3.3.3让患者头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧咽扁桃体，手持拭子在病人两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次；无菌拭子取出后放入无菌试管后送检。

3.4 样本的运输：因肺炎支原体在体外极易死亡，采样后的痰液或咽拭子应尽快送检进行培养，室温保存不超过四个小时。

3.5 样本的接种：

3.5.1 痰样本接种：如所采样本为痰标本，可以用无菌拭子沾取适量痰液，然后在培养液中充分搅拌；当痰液较稀时，可以用移液器量取100ul与培养液中。

3.5.2 咽拭子接种：如所采样本为咽拭子，把咽拭子在培养液中充分搅拌，使所采样本充分涮洗到培养液中。

4 注意事项

4.1 采样人采样前须做好一切准备工作。

4.2 正在使用治疗肺炎支原体的抗生素的患者标本用试剂盒检测时，因药物影响，会影响肺炎支原体检出率，建议在用药前或停药5天后再使用该试剂盒进行检测。

4.3 采样人须核对病人、验单和标本容器上条码资料三方面的资料是否一致。

4.4 申请单上应清楚地记有下列内容：病人姓名、性别、年龄、科别、标本类型、临床诊断、申请检查时间、申请检查的项目等，必要时应增加所用药物及时间、空腹或餐后、月经周期等内容。门诊病人应有门诊号和条码号，住院病人应有住院号和条码号。

4.5 放有标本的容器应加盖，防止挥发及溢出，防止外界污染。

4.6 标本采集后，试管上应有采样人签名，并记上采样时间；标本上要有标识。

4.7接种样本后，培养液中若有明显痰块时，建议把含痰块的培养液在室温放置30分钟后再接种药敏板，这有助于痰的充分消化，提高肺炎支原体的检出率和结果的准确性。

4.8检测所用的样本、试剂瓶、板条和吸咀均应视为有潜在传染性的物质，按传染病实验室操作规范处理。

 

第二篇：肺炎支原体检测意义

非典型性肺炎与支气管炎是儿童的常见病和多发病，肺炎支原体感染在儿童肺炎中占有较大比重，肺炎支原体是1~6岁儿童易感的支原体，是呼吸道感染的常见病原体，多引起急性支气管炎和间质性非典型性肺炎[2]，病程较长，易复发和交叉感染，特别是3~6岁的儿童在幼儿园期间极易交叉传播，应及早发现和治疗[3]。 肺炎支原体感染的早期诊断多靠血清学检测（ELISA法）肺炎支原体抗体IgM作为诊断治疗的依据。

本检测结果显示，儿童支原体感染性别差异无统计学意义，主要是1~6岁儿童多发，4~7岁儿童阳性率高于1~3岁阳性率，可能与儿童聚集和年龄段的免疫力有关，这与国内王力等报道的发病年龄段一致。支原体感染四季均有发生，秋冬季节发病明显，可能与秋冬季节气候变化及儿童自身的免疫力弱有关，国内作者报道有些地区支原体发病明显在夏秋季节，这进一步说明，支原体发病有四季平衡的趋势，应引起临床重视。

ELISA法检测肺炎支原体抗体特异性高、敏感性强、简单、快速，可以避免非特异性抗体的干扰[4]，是临床诊断支原体肺炎的可靠检测方法。

肺炎支原体是秋冬季节易引起儿童支原体非典型肺炎的病原体，婴幼儿、青少年易感，患有老年病的体弱老年群体也容易被感染。大多引起急性支气管炎和间质性肺炎，占临床肺炎发病率的15%~20%，其感染发病率为9.6%~66.7%，感染发病率的范围较大，应引起临床重视，尤其是婴幼儿和青少年人群[1]。目前使用ELISA法检测肺炎支原体抗体，特异性高、敏感性强、检测快速，为临床早期诊断提供了有力的保障。

人体感染肺炎支原体后,能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早，般在感染后1周出现，3～4周达高峰，以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2～3周，当患者出现症状而就诊时，IgM抗体已达到相当高的水平，因此IgM抗体阳性可作为

［］急性期感染的诊断指标1。如IgM抗体阴性，则不能否定肺炎支原体感染, 需检测IgG抗

体。IgG较IgM出现晚，需动态观察，如显著升高提示近期感染，显著降低说明处于感染后期。由此提示IgG与IgM同时测定，可提高诊断率，达到指导用药、提高疗效之目的。