血细胞分析仪的校准与质控

梅敏，帅 虎，李海珠，梁洁玲

随着血细胞分析仪越来越多的选择，同一实验室可能存在不同品牌的血细胞分析仪，由于各厂家采用的技术及标准均有一定的差异，因此为保证实验内部不同品牌的血细胞分析仪具有统一性，建立一套完善的校准与室内质控系统是一个重要的手段。

1.材料与方法

1．1 仪器和试剂 ①美国贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪及配套试剂；② 美国雅培CD1700全自动血细胞分析仪及配套试剂；③ 美国贝克曼库尔特公司的S—Cal校准品及定值质控品。

1．2 新鲜全血校准品取同血型的常规体检的健康人的混合新鲜全血14毫升(EDTA-K 抗凝)，先在显微镜下观察细胞均散在分布，在贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪上检测无任何警示，且结果均在正常人的结果范围之内。然后将其分装至三个无抗凝剂的试管中，其中第一管8毫升，其它两管各3毫升。在2小时内检测完毕。

1．3 仪器准备

1．3．1 美国贝克曼库尔特公司工程师对LH750全自动血细胞分析仪进行全面保养及校准，校准后各参数CV值及定值质控均在允许范围之内，实验在校准当天进行。

1．3．2 美国雅培公司工程师对CD1700全自动血细胞分析仪进行全面保养，各参数CV值均在允许范围之内，实验在校准后第52天进行，进行前对仪器进行常规保养。

1．4 校准质控判定标准

1．4．1 校准判断标准：根据中华医学会检验分会关于血液分析仪校准规范化的建议要求来判断(见表1)，各项目参数均值与定值的差异全部等于或小于表中的第一列数值时，仪器不需进行调整，记录检测数据即可；若各参数均值与定值的差异大于表中的第二列数值时，不要对仪器进行调整，需请维修人员核查原因并进行处理；若各参数均值与定值的差异在表中第一列与第二列数值之间时，需对仪器进行调整 。

1．4．2 失控判断标准：以1988年美国临床实验室改进修正案(CLIA’88)允许误差范围的1／4来确认两台细胞分析仪的精密度及偏差室内质控。CLIA’88允许误差范围：白细胞(WBC)为15%，红细胞(RBC)为6% ，血红蛋白(HGB)为7%，血小板(PLT)为25%，平均红细胞体积(MCV)为6％。

1．5 溯源目标系统确定 以贝克曼库尔特LH750全自动血细胞分析仪为参考仪器(此仪器参加广东省室间质评评比为优秀，且每年参加贝克曼库尔特全球质控，可溯源至国际标准参考方法)。

1．6 操作步骤 ① 取第1管，在LH750血细胞分析仪上严格按仪器操作规程连续检测l1次，计算第2～l1次检测结果的均值(x靶1)、标准差(s₁)及变异系数(CV₁)，以此均值为混合新鲜全血的定值(x₁)。② 取第2管，在CD1700血细胞分析仪上严格按仪器操作规程连续检测l1次，计算第2～11次检测结果的均值(x靶2)、标准差(s₂)及变异系数(CV₂)。③ 根据公式，计算出WBC，RBC，HGB，PLT及MCV的偏差，以这些参数的偏差和CLIA’8允许误差的1／4比较，决定是否需要对CD1700血细胞分析仪某参数进行调整[]。④调整后，取第3管，在CD1700血细胞分析仪上严格按仪器操作规程连续检测l1次，计算第2～l1次检测结果的均值(x₃)再计算偏差，观察偏差是否在CLIA’88允许误差的1／4范围内，如不在此范围，再继续调整。⑤ 以校准的偏差作为CD1700比对室内质控的靶值，以CLIA’88允许范围的1／4作为CV值，每日选择一个正常标本进行比对试验，按以上方法进行计算出偏差，并以此偏差进行比对室内质控图绘制，观察CD1700每日是否存在偶然误差或系统误差，如存在系统误差应重新进行以上比对试验，如存在偶然误差应及时查找原因，并进行必要处理。

2.结果

2．1 贝克曼库尔特LH750血细胞分析仪校准后精密度、准确度均在厂家允许范围之内，结果见表2。

2．2 两台血细胞分析仪各参数均值经公式计算出偏差，我们发现HGB，PLT偏差小于中华医学会检验分会校准判断标准表中的第一列数值，WBC，RBC和MCV均在表中第一列与第二列数值之间时，因此需对WBC，RBC和MCV进行校准，经校准后CD1700的WBC，RBC和MCV偏差均小于表中的第一列数值，结果见表3(各项目单位同表2)。

2．3 当月CD1700各参数比对室内质控的平均值与靶值较接近，变异系数均在CLIA’88允许误差的1／4范围之内，比对室内质控统计见表4(各项目单位同表2)。

3.讨论

血细胞分析仪的广泛应用显著地提高了血细胞及相关参数检测的精密度，由于不同的血细胞分析仪生产厂家各自使用的测定原理和方法不尽相同，使得测定结果及参考范围有所差异；同时，在国内、外众多的大、中型医院中，同一实验室拥有不同品牌、不同型号的血细胞分析仪已成为较普遍的现象，致使在同一实验室内同一标本在不同仪器上分析，可能出现测定值的偏差，给评估和解释结果以及给临床上依赖的实验室数据动态监测带来困难。因此有赖其校准的溯源体系的建立，保证校准品的定值溯源至参考方法，既可使检测结果准确，又可使不同检测原理的分析仪在不同时间、地点得出的检测结果具有可比性。ICSH 推荐参考方法为溯源链最高等级的参考检测方法，贝克曼库尔特使用参考方法对其校准实验室的校准品(新鲜全血)进行定值，定值后的校准品对其选择的系统进行校准，校准后的检测系统再对厂家的产品校准品进行定值，定值后的工作校准品再校准厂家的终端用户仪器，校准后的仪器再继续对新鲜全血定值，定值的新鲜全血再对其它型号的血细胞自动分析仪进行校准。这样，被校准的两种血细胞自动分析仪均具有同一溯源性。

新鲜全血是最佳的比对试验标本及校准物，确立实验室内的标准参比仪器，再建立新鲜全血在多台仪器问的比对及校准体系在拥有多台不同品牌、不同型号的血细胞分析仪的大、中型医院实验室，不失为一种简便、经济的措施，每日进行比对室内质控并进行总结分析便于发现两台血细胞分析仪的偶然误差、系统误差，通过总结分析可评价仪器状态及或系统倾向，通过校准可使结果达到统。因此，通过本实验室的实践，我们认为此系统的建立和实施方案是行之有效的。

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第二篇：血细胞分析仪校准程序

目的 保证血细胞分析仪测定结果的准确性

适用范围

血细胞分析仪

该SOP变动程序

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经科主任批准签字。 校准方法

1. 校准环境、仪器和试剂的要求

室温：20-25°C。

湿度：<80%。

试剂：所用稀释剂、溶血剂、清洁剂都为仪器配套产品。

校准品：为仪器配套产品，并在使用有效期内，同时无变质或污染。

仪器：

(1). 校准前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。

（2）.仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求，否则需请维修人员检修。

2. 操作步骤

1. 从冰箱中取出小准五，放置室温15分钟，勿摇动。

2. 在测定校准物前，先测定两份正常人新鲜血液。

3. 将校准物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。

4. 颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。

5. 重复3和4步骤8次（2分钟左右）。

6. 瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。

7. 用软纸拭净瓶口，轻轻打开瓶塞。

8. 将两瓶校准物混合在一起，充分混匀后再分装于两个瓶内。

9. 取一瓶校准物在仪器上连续测定11次。

10.由仪器自动校准。

3 计算与核对标准

1. 计算出各项结果的均值和精密度，均值应比日常检测报告多保留一位小数点。

2. 检查精密度是否达到使用说明书上所示的精密度，如达到，继续下一步；否则，停止

校准，与维修人员联系。

3. 计算出各项参数均值与定值之差的绝对值和相差的百分数，与校准标准（下表）进行

比较。

4. 结果小于第一列数值，则不需校准，结果大于第二列数值，需请维修人员处理；结果

在第一列与第二列数值之间，需校准仪器。

5. 如有自动校准功能，可按说明书进行，如没有此项功能，则用定值除以均值，在乘以

原校正系数即为新校正系数，输入仪器即完成校正。

校准标准表

校验校准结果

1. 按上述方法混匀第2管校准物后再在仪器傻瓜重复测定11次，按同样的方法计算，将

结果再次与校准标准核对，如合格，校准完毕，仪器方可使用，如不合格，应请厂方工程师维修，校准。

2. 仪器校准后补正值的计算公式：（仪器可自动计算）

新的补正值=当前补正值（%）X平均补正率（%）/100

当仪器出现下列情况显示所有校对错误，这时校对值的更换确认信息不能表示，需由维修工程师作故障检修。

3. 仪器故障检修后重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新校准和评价。

4. 书写和保存评价报告，交科室存档。