红枣中黄酮类化合物的研究进展

摘要：黄酮类化合物具有抗氧化、抑制脂质过氧化、预防心血管疾病、预防癌症等功效。本文综述了黄酮类化合物的提取、生理功能等方面的研究进展，并展望其在医药、保健品、食品等方面的应用前景。

关键字：红枣; 黄酮类化合物; 生理功能; 提取工艺

Research Progress in Flavonoid Compound from Jujube

Abstract： Flavonoid Compounds have various functions on anti-oxidant, inhibiting lipid per-oxidation, preventing cardiovascular disease and preventing cancer. In this article, recent advances in extraction and physiological function of flavonoid Compounds and prospect of flavonoids were introduced and discussed.

Key words：jujube; flavonoid compound; physiological function; extract condition

0 前言

“一日吃三枣，一辈子不显老”。 红枣营养丰富，具有多种营养保健功能。研究表明，红枣中黄酮类化合物的含量较高，天然黄酮物质确有多种生物学活性，且该类天然产物种类繁多，应是今后新药开发研究中一个值得重视的资源，开发利用前景广阔。

黄酮类化合物广泛存在于绝大多数植物体内，是一类具有2-苯基色原酮结构的化合物。广义的黄酮类化合物也指两个苯环通过中央三碳相互结合而成的一类化合物。除少数游离于植物体内外，大部分黄酮类化合物与糖结合，以黄酮苷的形式存在于植物体内。目前，研究发现大约有2000多种天然黄酮类化合物，主要包括黄酮类及二氢黄酮类、黄酮醇类及二氢黄酮类、查尔酮类、花色素类、黄烷类等。

黄酮类化合物具有抗氧化、清除体内自由基、维护心脑血管系统、抑菌、抗癌等多种生理功能。黄酮类化合物中有很多种化合物具有药用价值，广泛的应用于一些疾病的治疗，如冠心病、心绞痛、急慢性肝炎等。

1 黄酮类化合物的理化性质

黄酮类化合物多为晶状固体，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末。黄酮苷类化合物均有旋光性，且多为左旋。黄酮苷元中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇以外，其余黄酮类无旋光性。一般来说，游离苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中。黄酮苷类水溶性比相应苷元为

大，一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。黄酮类化合物因分子中多含有游离酚羟基，故显酸性，可溶于碱性溶液中。黄酮类化合物分子中?-吡喃酮环上的1-位氧原子，因有未共用的电子对，故表现微弱的碱性。

2 黄酮类化合物的提取

2.1温浸法

黄酮类化合物的结构及存在状态使溶解度有显著差异。一般游离苷难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中。多数苷类因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，偏向于较大的水溶性，易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，故可与脂溶性杂质分开。由于甲醇、乙醚都具有一定的毒性，而水的提取率又比较低，因此，一般以乙醇为提取溶剂。李铭芳等人[1]采用温浸法提取红枣中的生物黄酮，结果表明：在提取时间1.5h、水浴温度65℃、固液比1:30、乙醇浓度70％时，达到最佳的提取效果。

2.2超声波辅助提取

超声波辅助提取主要通过压电换能器产生的快速机械振动波来减少目标萃取物与样品基体之间的作用力从而实现固--液萃取分离。其机理是利用超声波具有的机械效应、空化效应和热效应，通过加速质点运动、增大介质的穿透力以提取生物有效成分。此外，超声波还可以产生许多次级效应，如乳化、扩散、击碎、化学效应等，这些作用也促进了植物体中有效成分的溶解，促使有效成分进入介质，并与介质充分混合，加快了提取过程的进行，并可提高有效成分的提取率。霍兰等人[2]采用超声波辅助提取陕北红枣总黄酮，结果表明：最佳工艺条件为乙醇浓度为50%, 提取时间40min, 提取温度50℃, 料液比1∶30(w/w)。

2.3超临界CO2萃取法

超临界CO2流体萃取分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。但是，对应各压力范围所得到的萃取物不可能是单一的，需要借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，被萃取物质则完全或基本析出，从而达到分离提纯的目的，所以超临界CO2流体萃取过程是由萃取和分离过程组合而成的。游海[3]等采用超临界CO2萃取的

方法,研究了从银杏叶中提取黄酮类化合物、萜内酯的最佳工艺条件。结果表明,在较低的操作压力下,超临界CO2萃取法可有效地提取出银杏叶中的药用活性成分(黄酮类化合物和萜内酯),其中黄酮含量达28%以上,萜内酯含量达7%以上,且银杏叶中的有毒物质银杏酚酸的含量得到了较好的控制。

2.4微波萃取

微波萃取是利用微波能提高萃取率的一种最新发展起来的新技术。它的原理是在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从机体或体系中分离，进入介电常数较小、微波吸收能力相对较差的萃取剂中。许海燕等人[4]利用微波在最适条件下萃取红枣总黄酮，总黄酮的平均回收率在90.56％左右。

3 黄酮类化合物的生理功能

3.1抗氧化性

霍文兰等人[2]对陕北红枣总黄酮抗氧化性研究表明，黄酮类物质是多酚羟基化合物, 具有一定的抗氧化性。通过对红枣总黄酮的抗氧化性实验, 表明其对油脂具有较好的抗氧化作用, POV值可达150;而且对羟自由基也具有明显的清除作用, 当红枣总黄酮浓度为50μg/mL时, 羟基清除率可达50%。

3.2清除自由基

张志国等人[5]通过对红枣核类黄酮清除DPPH自由基活性研究表明，红枣核类黄酮对 DPPH 自由基有明显的清除作用，清除DPPH 自由基的能力随着浓度的增加而增加，IC50为6.5μg/ml，对DPPH 自由基的清除率有量效关系。

3.3降血脂作用

盛文军等人[6]利用红枣总黄酮提取物，对于小鼠高血脂形成过程进行干预，结果表明，中、高剂量红枣总黄酮通过有效抑制血清甘油三酯和总胆固醇升高，同时促进高密度脂蛋白水平，从而降低动脉硬化指数。

3.4护肝作用

吴东方等人[7]研究了银杏叶黄酮对肝脏MDA生成的影响。研究表明,生物类黄酮对CCl4所致肝脏丙二醛(MDA,肝脏脂质过氧化最终产物)含量的增加有明显的抑制作用,可减轻肝损伤对谷胱甘肽的消耗,保护肝细胞结构的完整性。乌日娜[8]研究了广枣总黄酮对阿霉素引起的大鼠心肌过氧化损伤的保护作用，研究表明，广枣总黄酮能抑制ADR 所引起的大鼠心肌过氧化损伤。

3.5抗炎、抗过敏作用

张德权等人[9]对生物类黄酮的研究表明生物类黄酮具有抗炎、抗过敏作用,抗炎机制可能在于其抑制了前列腺素和生物合成过程中的脂氧化酶,抗过敏机制可能在于其抑制抗原的结合或在抑制介质释放等环节上产生作用。

3.6抑菌、抗病毒作用

张德权等人[9]的研究还表明生物类黄酮如银杏叶黄酮、槲皮素、桑色素、山奈酚等均具有抑菌作用。

4 应用前景

黄酮类化合物是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分，因而成为植物化学及医药保健领域的研究热点之一。我国的红枣资源十分丰富，红枣中富含黄酮类化合物，是一种优良的黄酮类化合物的潜在资源。

黄酮类化合物是人体必需的营养素之一，只能从食物中摄取。黄酮化合物具有抗氧化、清除人体自由基、降血脂、护肝、抑菌、抗癌等多种生理功能，是一类具有较高开发价值的物质，可广泛应用于医药、饮料、功能性食品、食品防腐保鲜剂中。目前，在世界范围内已经兴起了黄酮类化合物热，黄酮类化合物被用作新兴保健食品的活性成分。随着人们生活水平的提高和消费观念的不断变化，黄酮类化合物保健品市场前景十分广阔。但是，黄酮类化合物的价格较高，尤其是精制的高纯度黄酮类化合物。因此，改进黄酮类化合物的提取工艺，提高黄酮类化合物的提取率，可降低黄酮类化合物的价格，促进黄酮类化合物的应用。

参考文献

[1]李铭芳,席峰,李清龙等.红枣中生物黄酮的提取及分析方法研究[J].江西农业大学学报,2009,31(6):1156-1159.

[2]霍文兰,刘步明,曹艳萍等.陕北红枣总黄酮提取及其抗氧化性研究[J].食品科技,2006,(10):45-47.

[3]游海,陶秉莹,张立麒.超临界萃取法从银杏叶中提取黄酮类化合物、萜内酯的工艺研究[J].南昌大学学报:工科版,2000,22(4):34-38.

[4]许海燕,杨洁,申彤等.红枣总黄酮提取工艺[J].生物技术,2008,18(5):64-66.

[5]张志国,陈锦屏,邵秀芝等.红枣核类黄酮清除DPPH自由基活性研究[J].食品科学,2007,28(2):67-70.

[6]盛文军,张盛贵,韩舜愈等.红枣黄酮粗品对小鼠血脂指标的影响[J].农产品加工,2008,(10):73-74,76.

[7]吴东方,周本宏,罗顺德.银杏叶黄酮对肝脏MDA生成的影响[J].中国中药志,1997,28(6):348-350.

[8]乌日娜，张昕原，张维兰.广枣总黄酮对阿霉素引起大鼠心肌过氧化损伤的保护作用[J] .中草药，2001，32（6）：527．

[9]张德权,台建祥,付勤.生物类黄酮的研究及应用概况[J].食品与发酵工业,1999,25(6):52-57

 

第二篇：红枣中总黄酮与芦丁含量测定及关系研究

·222·

中国药物与临床20xx年3月第9卷第3期ChineseRemedies&Clinics，March2009,Vol.9,No.3

药物研究··

红枣中总黄酮与芦丁含量测定及关系研究

阎克里

朱秀卿

赵

丽

枣（zizyphuojujubamill），为鼠李科植物的成熟果实。红枣中的效应物质包括环磷酸腺苷、粗多糖、总黄酮及其他微量元素和氨基酸等，它们的生理药理作用表现在很多方面。

体积。精密量取过滤的浸提液5ml，于25ml容量瓶中，后面的操作同2.1.2中“加入5%的NaNO2溶液0.75ml……”，将测得的A值带入回归方程，计算提取液中的总黄酮浓度，根据滤液体积，计算总黄酮的浸提量。试验结果见表1。

表1

浸提时间（h）

每克红枣总黄酮浸提量

乙醇浓度

2005版药典中，使用薄层色谱法对红枣进行定性质量控

制。本文通过研究使用高压液相色谱仪（HPLC）法测定红枣中芦丁的含量，对红枣进行定量质量控制的方法学研究；用

mg/g

HPLC法和分光光度法分别测定红枣在不同浓度的乙醇，浸

提不同时间后，浸提液中芦丁和总黄酮的含量，比较两者之间的关系，确定可以使用HPLC法测定红枣中芦丁的含量代替分光光度法测定红枣中总黄酮含量，在分析方法更加可靠准确的基础上，为红枣定量质量控制提供可靠的分析手段。

30%2.072.011.972.322.05

50%2.572.472.752.852.62

70%2.072.302.452.912.69

90%0.860.900.891.000.99

100%0.400.420.450.490.57

24487296120

11.1

仪器与试药

仪器：日本日立L—2130高效液相色谱仪；日本日立L—

2420紫外检测器；大连依利特Echrom型色谱工作站；岛津2401紫外分光光度计；超声波清洗器SK252H型（上海生产）；

分析天平（上海良平精密仪器有限公司，Max100g，D=0.0001

2.22.2.1

红枣中芦丁含量的测定

色谱条件：色谱柱：HypersilODS（4.6mm×250mm，5

μm）；流动相为乙腈-0.4%醋酸水溶液（40∶60）；柱温：室温；流

速：1.0ml/min；检测波长为360nm；进样量10μl。在上述色谱条件下，对照品芦丁与其他组分分离良好，样品中其他组分对芦丁的测定无干扰，理论塔板数按芦丁峰计为12922。

g）；电热恒温鼓风干燥箱DHG—9123A型（上海生产）。1.2

试药：对照品芦丁，购自中国药品生物制品检定所；红枣购自当地自由市场；化学试剂：甲醇为色谱纯，乙醇（北京化工厂），其他试剂均为分析纯；水为纯蒸馏水。

2.2.22.2.3

对照品溶液的制备：取芦丁对照品适量，精密称定，加供试品溶液的制备：取红枣适量，用剪刀剪成一定的小

22.1

试验方法与结果

红枣中总黄酮的含量测定

芦丁对照品溶液的制备：精密称取120℃减压干燥至

流动相制成每1ml含100μg的溶液，即得。

块，取约5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇

2.1.1

恒重的无水芦丁15mg，置于50ml量瓶中，加30%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.300mg/ml的芦丁标准液。

40ml，称定重量，充分振摇后，超声处理（功率250W，频率59kHz）30min，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重

量，滤过，取继滤液适量，经唯孔滤膜过滤器（0.45μm）滤过，即得。

2.1.2线性关系考察：精密吸取芦丁对照品溶液2.5，5.0，7.5，

10.0，12.5ml于25ml容量瓶中，加入5%的NaNO2溶液0.75ml，摇匀，放置6min后，加入10%的Al（NO3）3溶液0.75ml，

摇匀，放置6min后,加入4%NaOH溶液10ml，用30%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，15min后于510nm处测定吸光度A值，以吸光度A值为横坐标，芦丁标准液浓度Y为纵坐标，经回归处理的回归方程为：Y=0.3238A，r=0.9996。

2.2.4线性关系考察：取芦丁对照品10.00mg，精密称定，置

10ml量瓶中，用流动相溶解（必要时超声）并稀释至刻度，摇

匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，制成浓度为0.1mg/ml芦丁对照品储备液。精密量取芦丁对照品储备液0.25，0.5，1.0，2.0，4.0ml，分别置10ml量瓶中，用甲醇稀释制成2.5，5.0，10.0，20.0，40.0μg/ml的系列对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液10μL，分别注入高效液相色谱仪，在上述的色谱条件下进行分析测定。以峰面积积分值为纵坐标（Y），以芦丁对照品溶液浓度为横坐标（X），绘制标准曲线，求得回归方程为Y=0.064X，相关系数r=0.9994。试验结果表明，芦丁的浓度在2.50~80.00μg/ml范围内呈现良好的线性关系。

2.1.3供试品溶液的制备及测定：用剪刀将红枣剪成三块，精

密称取10g，25份，分别加入不同浓度（30%，50%，70%，

90%，100%）的乙醇80ml，每一种浓度分别按24，48，72，96，120h浸泡提取，浸泡时间结束后，过滤浸提液，量取浸提液

作者单位：030013太原，山西省肿瘤医院药物检测室（阎克里、赵丽），中药制剂室（朱秀卿）

2.2.5精密度试验：精密吸取对照品溶液10μl注入色谱仪，

中国药物与临床20xx年3月第9卷第3期ChineseRemedies&Clinics，March2009,Vol.9,No.3

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连续进样测定6次，测得的芦丁峰面积的相对标准差（RSD）为1.36%。

浸提时间（h）

表3每克红枣芦丁的浸提量

乙醇浓度

μg/g

2.2.6重复性试验：取同一批购买的红枣样品6份，制成供试

30%52.2752.4347.5349.6341.28

50%76.8363.7058.5465.0774.87

70%67.8870.3455.6571.3577.74

90%38.8243.9832.4443.2634.18

100%10.219.8513.2311.9515.04

品溶液，进行红枣中芦丁含量测定，结果红枣中芦丁的平均含量为71.5μg/g，RSD为2.31%（n=6）。

24487296120

2.2.7稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，

10，24h进样测定，根据芦丁峰面积计算的RSD为2.62%（n=6），结果表明供试品溶液在24h内稳定性。2.2.8

加样回收率试验：取已测得含量的样品（芦丁含量71.5

μg/g）约2.5g，共9份，精密称定，精密加入浓度为115μg/ml

芦丁对照品溶液1.5ml，按“3.2”项下方法进行操作，进样测定，测得的平均回收率为100.78%，RSD为3.70%（n=9）。

提量差别不大，浸提24h可提出90%以上的总黄酮。③使用

50%，70%乙醇为浸提液，在相同浸提时间下，总黄酮、芦丁的

提取量相差不多。从节约成本的角度考虑，使用50%乙醇为浸提溶剂较为合理。对于本试验所用红枣，使用50%，70%乙醇浸提时，每克红枣含总黄酮平均为2.57mg，较文献［1］报道的要低。差异的原因可能在于红枣样品提取处理的方法所造成。④比较表1，3中的试验数据，可以明显地看出，红枣在不同浓度的乙醇，浸提不同时间后，浸提液中总黄酮的测定量高低大小与芦丁测定量高低大小成对应关系。即可以用

2.2.9样品含量测定：取3批市售产地不同的红枣，分别按

“2.2.2”项下方法操作制成供试品溶液，依法测定，测定的3批红枣中，3批红枣每克红枣含芦丁分别为71.5，102.6，118.6

μg，均值为97.57，RSD为23.95%（n=3）。2.2.10

浸提液中芦丁的浓度和含量的测定：测定方法同

2.2.1，测定的样品见2.1.2，浸提液中芦丁浓度测定结果见表2，浸提出的芦丁量见表3。

表2

浸提时间（h）

芦丁的浓度测定结果

乙醇浓度

HPLC法测定芦丁的含量来代替分光光度法测定总黄酮量。

μg/ml

使用HPLC法测定红枣中单一黄酮化合物芦丁的含量，可以更加准确地体现质控方法的可靠性、精密性、准确性。为本研究用HPLC法和分光光度法分别测定了不同浓度的乙醇，在浸提不同时间后，红枣浸提液中芦丁和总黄酮的含量，研究比较两者之间的关系，确定可以使用HPLC法代替分光光度法测定红枣中总黄酮含量方法，用色谱法测定提取液中的芦丁含量来表示总黄酮的含量，并对使用HPLC法测定红枣中芦丁的含量来控制红枣质量的分析方法进行了研究，结果表明，该方法简单、准确、重复性好，可用于红枣的质量控制。

参考文献

1

韩志萍.陕北红枣中总黄酮的提取及含量比较.食品科学，2006，

30%7.848.497.597.876.78

50%11.419.328.729.9611.82

70%10.2310.527.9510.3512.22

90%5.546.384.626.255.33

100%1.341.421.771.652.06

24487296120

3讨论

根据表1，3的试验数据，可以看出，①同一浓度的浸提液，随着浸提时间的延长，总黄酮、芦丁的提取量增加不显著。使用50%和70%的乙醇对红枣中总黄酮、芦丁进行浸提，总黄酮、芦丁的浸提率均较高。②使用30%乙醇浸提红枣中总黄酮、芦丁，24h浸提液中总黄酮的量和120h相比较，浸

27（12）:560-563.

（收稿日期：2008-07-29）

鱼金注射液的一般药理学研究

刘

杰

陈海金

鱼金注射液是纯中药注射剂,由鱼腥草、金银花提取制成。该药被广泛地应用于临床治疗呼吸、消化、泌尿生殖等系统的感染性疾病,取得了较好的效果。近年文献［1，2］报道静脉滴注鱼金注射液引起血压降低、变态反应，出现胸闷、腹

作者单位：030009太原市中心医院药剂科（刘杰）；山西医科大（痛、面色紫绀、呼吸急促、全身风团样皮疹等症状。1988—

20xx年国家药品不良反应监测中心共收到鱼金注射液严重

不良反应139例，其中过敏性休克3例，引发了人们对鱼金注射液安全性再评价的关注。本实验研究了鱼金注射液对实验动物心血管系统、呼吸系统的作用，以确定鱼金注射液可能关系到人的安全性的非期望出现的药物效应；评价鱼金注