20xx年x月x日至5曰17日，我参加了由武汉水务集团有限公司水质监测中心举办的为期四天的水质分析微生物检测培训班。本次培训班主要针对生活饮用水中细菌数指标即细菌总数和总大肠杆菌群的分析方法而进行的培训，通过这次培训，使我受益匪浅，以下是对这次学习作的一个总结：

一 通过学习，了解到水中所含有的细菌来源于空气、土壤、污水、垃圾和动植物的尸体，所以水中细菌的种类是多种多样的，其中包含病原菌、通过水传播的疾病有痢疾、伤寒、霍乱、肝炎和急性肠胃炎等，这些将对人体健康具有潜在的危害性，原水经过净化消毒后，细菌总数和大肠杆菌群指数如果能达到饮用水标准的要求，说明病原菌被杀灭，普通细菌也明显减少，因此水中细菌总数和总大肠杆菌群的测定是评价水质清洁程度和考核给水净化效果的指标之一。

二 水中细菌的检测方法

1 细菌总数（平皿计数法）：水样在营养琼脂上在有氧条件下37℃培养48小时后，所得1mL水样所含菌落的总数。

以无菌操作方法用无菌吸管吸取1mL充分混匀的水样注入灭菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋匀平皿，使水样与培养基充分混匀，待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上

，置于36±1℃培养箱内培养48小时，进行菌落计数，此即为水样1mL中的菌落总数。

2 总大肠菌群检测方法有：多管发酵法、滤膜法、酶底物法

2.1 多管发酵法：总大肠菌群指一群在37℃培养24小时能发酵乳糖，产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。取10mL水样接种到10mL双料乳糖蛋白胨培养液中，取1mL水样注入到9mL灭菌生理盐水中，混匀后吸取1mL注入到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管，将各种管置36±1℃培养箱内培养24±2小时，如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，于36±1℃培养箱内培养18~24小时，观察菌落形态，挑取符合特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证实实验。

2.2 滤膜法：总大肠菌落滤膜法是指用孔径为0~4.5um的微孔滤膜过滤水样，将滤膜贴在掺加乳糖的选择性培养基上37℃培养24小时，能形成特征性菌落的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。

用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面朝上贴放在已灭菌的滤床上，固定好滤器，将100mL水样注入滤器中，打开滤器阀门，在-5.07*104Pa下抽滤，水样抽滤完后再抽气约5秒，关上滤器阀门，取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在 红亚硫酸钠培养基上，滤膜截面细菌面向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将平皿倒置，放入37℃恒温箱内培养24±2小时，挑取符合特征菌落进行革兰氏染色，镜检。

2.3酶底物法：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体是培养基呈现颜色变化，以此来检测水中总大肠菌群。

以上是我这次培训所学内容的小结，通过学习，不仅提高了细菌分析的知识，也为以后开展新的微生物项目打下了良好的基础。

 

第二篇：微生物检测培训问题总结

1. “菌株的传代次数不得超过5代”表示菌株传代只能传递到第四代，使用第四代时意味着菌株已经是第五代，因此，传代记录中不能显示传5代。

2. 标准菌株确认工作是否齐全：存活性确认，纯度确认，菌落形态、染色镜检及生化反应进行确认。

3. 菌种保藏所用的冰箱是否经过确认，是否容易结霜，且保存菌种（尤其是特异菌株）是否采用两种以上的方式，防止意外流失。

4. 培养基的适用性检查：

微生物限度检查中培养基适用性检查：在注重回收率达到70%时，是否确保检查用培养基上的菌落形态同对照培养基上一致。

控制菌检查中培养基适用性检查：促生长能力----最短培养时间内长出相应的菌落；抑制能力-----最长培养时间下不得有菌生长；细菌培养时间：18-24-48小时；真菌培养时间：24-48-72小时，促生长取最短时间，抑制取最长时间。因此供试品在检查时，培养时间应取最长时间。

环境监测的培养基适用性检查：“中国药典附录：药品微生物实验室规范指导原则”中规定：用于环境监测的培养基须特别防护，最好是双层包装和终端灭菌。如果不能采用终端灭菌的培养基，在使用前应进行100%的预培养避免假阳性出现。同时做促生长试验，防止假阴性出现。

沉降菌监测所用培养基的适用性检查：①培养基回收率确认（同微生物限度检查的培养基适用性检查）；②确认培养基放置最长时间，在标准风速下，一般不宜超过2小时；③同时确认温度、湿度及风速对培养基放置的影响。

5. 洁净区微生物监控标准的理解是否到位？如何计算平均值。

6. 生产抗生素的洁净区进行环境监测，其培养基是否添加有中和剂，如亚硫酸氢钠、聚山梨酯等。

7. 洁净室是否使用消毒剂与杀孢子轮滑使用，杀孢子剂一般半月1次（建议）

8. 无菌检查：

在结果进行观察时，最好将集菌器置于黑白背景下观察，确保不能因灯检原因而出现假阴性。 无菌检查结果判断：

集菌器出现浑浊，但证明不是微生物，判供试品符合规定；

以下情况可证明无菌检查结果无效：设备及环境微生物监控结果不符合规定；回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素（阴性对照失败、培养基的灵敏度试验失败等）；供试管中生长的微生物经鉴定后确认是物品或无菌操作技术所引起。此时可以提出复验申请，复验取样条件： ①尽可能使用原样品（全检量的2-3倍）

②尽可能使用与第一份来源相同的另一份样品（如理化检验样品）

③尽可能在同一处重新取样

9. 超净工作台及生物安全柜中不能使用酒精灯：酒精灯的使用会导致局部温度对流，在生物安全柜中则会造成洁净气流紊乱，从而将台面污染的灰尘或者周围污染的空气带入到无菌操作区，从而污染样品；另外超净工作台中放置酒精灯，洁净风是超外吹的，对流空气中污染的菌可能对操作人员造成伤害。

10. 实验室进行调查：一般将重分析、重检验、重取样同时进行，可以节省调查时间，延缓车间库存时间。

11. 制药用水中生物膜（生物膜形成微生物生长的物理和化学屏障。不仅增加了微生物对热、各种药物、杀菌刺、去污剂和清洁剂的抗性；而且，有利于微生物捕获营养物质。加速生长繁殖。）出现的可能现象：①在同一或同几个监测点多次检测均出现菌落；②菌落的种类多样，形态多样；

措施：采用大量冲洗、化学消毒如次氯酸钠、二氧化氯等其他办法