薄层色谱法

薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种实验技术，主要应用与跟踪反应进程。

一般过程，玻璃板上均匀铺上一层吸附剂，制成薄层色板，用毛细管将样品溶液点在起点处把薄层板置于盛有溶液的容器中，待溶液到达前沿时取出，晾干，显色，显示斑点位置，计算Rf值。

不同的有机化合物在相同溶剂下，其斑点位置不同，可用来跟踪反应进程。

Rf=斑点中心到起点处距离溶液前沿到起点处距离

①       吸附剂：一般为硅胶或氧化铝。

②       薄层板的制备：a，平铺法  b，浸涂法

③       薄层板的活化：

④       点样在薄层板底部8-10mm处，用铅笔画一直线，不可划破硅胶，用毛细管吸溶液在起点处小心点样，同一班上点样，距离应为1-dm，不可划破薄层。

⑤       展开：将点好的板放入盛有展开剂的广口瓶中，展开剂浸入薄层板约有5mm，切不可置好后，盖上瓶口观察展开剂上升的高度，距离顶端5-10mm处，取出板，晾干。

（展开剂选择主要依据溶剂的极性，可用混合溶液，反复试验）

⑥显色：若有颜色，可直接观察;若无颜色，可用碘熏法和紫外灯来观察。

样品：1g偶氮苯甲溶液

1g苏丹Ⅲ甲苯溶液

展开剂：甲苯：乙酸乙酯（9:1）

 

第二篇：薄层色谱法分离糖类的改进

19xx年10月第12卷第4期保定师专学报

JOURNALOFBAODINGTEACHERSCOLLEGEOct.1999Vol.12No.4

薄层色谱法分离糖类的改进

孟宪昌

赵洪池

071051)

(保定师范专科学校化学系,保定

摘要该实验改进了一种用薄层色谱分析糖类混合物的方法,即试用一种?展层?显色?液,使展

开与显色同步完成。显色液用二苯胺??苯胺??磷酸溶液。实验操作简便,效果明显,且对环境无污染。

关键词

薄层色谱法?展层??显色?液

O658.1

同步完成

中图分类号

薄层色谱分离传统的操作是把展开与显色截然分成两步进行的,不仅手续繁多,而且在展开液干燥后喷洒显色剂时又污染环境。我们在展开糖类的混合物时,试用一种?展层??显色?液,使展开与显色同步完成。显色液用二苯胺??苯胺??磷酸溶液。把它按一定的比例直接加入到展开液中进行操作。实验结果与传统方法比较,不但操作简便,而且斑点的色泽亮丽清晰,Rf(比移值)也有良好的效果。

1实验部分

1.1仪器和试剂

(1)仪器:层析筒,电热吹风,玻璃硅胶层析板(尺寸:70mm?70mm,140mm?40mm),毛细管

(2)试样:1%葡萄糖,1%乳糖,1%果糖,1%蔗糖(均为质量体积比m/v浓度的溶液)。

(3)展层与显色液:正丁醇:乙酸:乙醚:显色液=9:6:3:1(v/v),显色液:4g二苯胺+4ml苯胺+20ml85%磷酸,丙酮稀释至200ml(于棕色试剂瓶中)。

1.2操作

薄层层析按常规法进行,先在小硅胶层析板上用毛细管点待分离试样,在大硅胶层析板上将试样均匀地涂布在原线上,然后在层析筒中展开,当溶剂前沿线达到3/4层析板高度时即可取出,用电热吹风吹至显出鲜艳的色斑即可(或放于80?烘箱中烘到显色)。

2分析结果

四种糖的薄层分析的结果如附图所示。

112

2

4B

3?展层??显色?液的稳定性及Rf值的重现性的研究

配制适量的上述溶液于棕色试剂瓶中,室温存放,隔几天取出进行实验,观察试样斑点的色度,测定样品的Rf值,结果表

收稿日期:1999-11-20

作者简介:孟宪昌(1948?),男,副教授。

附图糖类的薄层分析图

A为黑糖;B为蔗糖或果糖与蔗糖;

C为乳糖;D为葡萄糖。1为果糖色斑;2为蔗糖色斑;3为乳糖色斑;4为葡萄糖色斑

?26?保定师专学报19xx年

明,该?展层??显色?液在一个月内稳定。将用过一次的?展层??显色?液回收,重复使用,最多可达四次,实验结果重现性好。

表1各种糖在不同时间的比移值

日期1999.05.021999.05.041999.05.071999.05.121999.05.171999.05.221999.05.28+?RSD/%

Rf1,Rf2,Rf3分别为果糖、蔗糖、乳糖的色斑比移值。

相隔天数

02510152026

色斑比移值(Rf)

Rf10.470.450.450.440.450.440.440.45?0.01

2.2

Rf20.380.370.360.360.370.360.360.36?0.008

2.2

Rf30.270.260.260.250.270.260.260.26?0.008

3.5

TheImprovementofSeparatingFrom

SaccharidesbyThinLayerChromatography

MengXianchangZhaoHongchi

(DepartmentofChemistry,BaodingTeacher'sCollege,071051)

AbstractTheexperimentimprovesakindofmethodthatanalysessaccharidesmixturebythinlayerchromatography.Themethodtriesoutasortof"developmentlayer?developing"solutiontoac?complishinpacewithdevelopmentanddeveloping.Diphenylamine?aniline?phosphoricacidsolutionisusedasdeveloper.Thisexperimenthasnotonlyeasytooperateandtangibleresult,butalsonopollutionofenvironment.

KeywordsThinLayerChromatographyinPacewith

DevelopmentLayer?Developing

SolutionAccomplish