实验课题：红细胞计数和白细胞计数

第一次实验           2012年2月21日

09级临床二大班        姓名：        学号：

【目的】了解红细胞计数、白细胞计数的方法和原理；

         熟悉并掌握它们的临床应用。

【原理】 分别用红、白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，置于血细胞计数板内，于显微镜下计数一定容积内的红细胞或白细胞数目，然后在计算出每升血液内的红、白细胞数。

【器材】 显微镜、血细胞计数板、血红蛋白吸管、小试管

【试剂】 抗凝静脉血、红细胞稀释液、白细胞稀释液

【操作】

1.红细胞计数

1）准确吸取红细胞稀释液2毫升于小试管内；

2) 将抗凝静脉血摇匀，用血红蛋白吸管准确吸血10立方毫米；

3) 擦净吸管尖端周围血液。将吸管内血液轻轻注入稀释液管底。用上层稀释液将吸管洗涤三次，立即将血液和稀释液混；

4) 吸取红细胞悬液一滴，滴入血细胞计数池内，静置3-5分钟；

5) 用低倍镜计数血细胞计数池中央大方格内5个方格内的红细胞数；

6) 结果：红细胞计数＝计数所得值*10000（/mm3）

2.白细胞计数

1）准确吸取白细胞稀释液0.38毫升于小试管内；

2）将抗凝静脉血摇匀，用血红蛋白吸管准确吸血20立方毫米；

3）擦净吸管尖端周围血液。将吸管内血液轻轻注入稀释液管底。用上层稀释液将吸管洗涤三次，立即将血液和稀释液混匀；

4）吸取白细胞悬液一滴，滴入血细胞计数池内，静置3-5分钟；

5）用低倍镜计数血细胞计数池四角大方格内白细胞数；

6）结果：白细胞计数＝计数所得值*50（/mm3）

【结果】

红细胞计数=403*10000（/mm3）=4.03*10¹²/L

白细胞计数=118*50（/mm3）=5.9*10⁹/L

【课后习题】

什么是类白血病反应,请与慢性粒细胞性白血病相鉴别

   类白血病反应是指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。周围血中白细胞数大多明显增高，并可有数量不等的幼稚细胞出现。当病因去除类白血病反应逐渐消失。

中性粒细胞型类白血病反应与慢性粒细胞性白血病鉴别

 

第二篇：红白细胞计数

红细胞, 手工, 计数

[试 剂 ]

赫姆液：(无赫姆液时可用生理盐水代替)

氯化钠 1.0g

结晶硫酸钠(Na2SO4.10H2O) 5.0g （或无水硫酸钠2.5g）

氯化高汞 5.0g

蒸馏水 加至200ml

溶解后加20g /L伊红水溶液1滴, 过滤后用.

[操 作]

1、取小试管1支，加红细胞稀释液1.99ml

2、用清洁干燥微量吸管取末梢血10ul

3、擦去管尖外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻吸上层

清液嗽洗吸管2~3次，然后立即混匀。

4、充池后待2~3分钟，用高倍镜依次计数中央大方格内四角和正中5个中方格内的红细胞。

按数上不数下、左不数右的原则进行目视计数。

计 算

红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×200×10 6

或 红细胞数/L=5个中方格内红细胞数÷100 ×10 12

式中：X5（5个中方格换算成一个大方格）

X10（一个大方格容积为0.1ul换算成1.0ul）

X 200(为血液的稀释倍数)

X 10 6（由ul换成L）

参考值：男：（4~5.5）x10 12/L 女：（3.5~5）x10 12/L 新生儿：（6~7）X10 12/L

附注： 1、如无上述稀释液时也可用新鲜配制的等渗盐水代用

2、正常数值范围内，两次红细胞计数相差不得超过5%

白细胞, 手工, 计数

原 理

血液经稀酸稀释后，成熟红细胞全部被溶解，注入计数池后，在显微镜下计数白细胞。

试剂

冰醋酸 2ml

蒸馏水 98ml

10g/L亚甲蓝溶液 3滴

操 作

1、小试管1支，加白细胞稀释液0.38ml。

2、用微量吸管准确吸取末梢血20ul，擦去管尖外部余血，将吸管插入小试管中稀释液的底

部，轻轻将血放出，并吸取上层清液，嗽洗二次，最后用手摇动试管混和。

3、充池，静置2~3分钟，待白细胞下沉。

4、用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数。

计 算

白细胞数/L

=4个大方格内白细胞总数/4×10×20×10 6

式中：

÷4 为每个大方格（即0.1ul）内白细胞平均数；

×10 1个大方格容积为0.1ul，换算成1ul；

×20 血液稀释倍数；

×10 6 由1ul换算成1L。

参 考 值

成人：（4~10）×10 9/L

儿童：（5~12）×10 9/L

新生儿：（15~20）×10 9/L

附 注

1、采血时不能挤压过甚，因此针刺深度必须适当。

2、大小方格内压线细胞应按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。

3、稀释液要过滤，小试管、计数板均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。

4、一些贫血患者血液中有核红细胞增多，影响白细胞计数，应校正除去。校正公式：白细胞校正数=X×100÷（100＋Y） X为未校正前白细胞数；Y为在分类计数时，计数100个白

细胞的同时计数到的有核红细胞数。

5、计数时，两次重复计数误差不得超过10％。

临 床 意 义

1、增加：（1）生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后、极度恐惧与疼痛等。（2）病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、

白血病等。

2、减少：病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X

线镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。