重组蛋白酶K质量检测报告

实验检测报告一 ：蛋白酶k消化荧光素酶

实验原理：荧光素酶在荧光素和ATP等物质存在的条件下可以发出荧光，当荧光素和ATP都过量时，发光强度与荧光素酶的活性有关，用绿邦产的ATP检测仪可测其发光度RLU，蛋白酶K消化荧光素酶后其活性降低，相应的RLU会降低，因此可以根据发光度比较蛋白酶K的活性。

实验目的：通过不同品牌的蛋白酶K消化荧光素酶，对两种蛋白酶K的活性做出比较。

实验方法：取10个1.5ml的离心管分为两组，一组为绿邦的重组蛋白酶K，另一组为Sigma公司的蛋白酶K，均加入400ul的荧光素酶，再分别向两组加入1㎎/ml的蛋白酶10ul，20 ul， 30 ul， 40 ul， 50 ul，置于室温15min后用ATP荧光检测仪测RLU，结果如下：

注：不加酶K 测该荧光素酶RLU为9999

做出折线图如下：

结果分析：荧光素酶在不加蛋白酶K的情况下，用ATP检测仪测得的RLU为9999，加入绿邦的酶K后为304，加入Sigma公司的酶K为1216，同样的体积同样的荧光素酶，在其他条件都相同的情况下，绿邦的酶K消化后的RLU下降值比Sigma的大，说明绿邦产的酶K活性较好。

实验检测报告二 ：蛋白酶K消化酪蛋白

实验原理：

酪蛋白在A₂₈₀与A₆₅₀有紫外吸收峰，由分光光度计测吸光值可检测酪蛋白被酶消化的量，进而比较两种不同品牌蛋白酶K的活性。

实验方法：

⒈配制10㎎∕ml的酪蛋白溶液

    ⒉将绿邦公司的蛋白酶K和Sigma公司的蛋白酶K配成1.5㎎∕ml用于检检测实验：

⒊取十个1.5 ml的离心管分为两组，一组为绿邦的酶K（zk），一组为Sigma公司的酶K（sk），分别向离心管中加入以下试剂：

    800ul酪蛋白+100ul K+250ul水

    800ul酪蛋白+150ul K+200ul水

800ul酪蛋白+200ul K+150ul水

800ul酪蛋白+250ul K+100ul水

800ul酪蛋白+300ul K+50ul水

⒋室温条件下，吸混匀后的混合液稀释10倍测OD₆₅₀，结果如下：

5.室温条件下，吸混匀后的混合液稀释10倍测OD₂₈₀，结果如下：

通过A₂₈₀与A₆₅₀紫外吸收值的不同时间变化比较，发现绿邦的蛋白酶K的消化能力要稍微好于Sigma的蛋白酶K。

分析总结：通过两种实验方法，比较了绿邦蛋白酶K和Sigma的蛋白酶K的活性，发现绿邦的活性要高于Sigma的。

 

第二篇：实验四 蛋白酶活力的测定