【实验目的】
1、了解动物细胞融合的常用方法
Learn common methods of cell fusion
2、学习用PEG进行细胞融合的基本操作过程
Use PEG to induce cell fusion
3、注意动物细胞融合的过程中细胞的行为和变化
Pay attention to the action and change of cells during the process of cell fusion
【实验原理】
细胞融合是指把相同或不同类型的两个或多个细胞融合成一个具有共同细胞质和单一、连续细胞膜的细胞。
Cell fusion is that two or more cells ，of same or different types，be fused by certain technique to produce one cell with a common cytoplasm and a single continuous cell membrane.
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姓名董朔晖 系年级生命科学院2011级 学号201100230164
科目细胞生物学实验 实验题目动物细胞融合 日期 2012.03.01
实验二：动物细胞融合
一、实验目的
1、了解动物细胞融合的常用方法。
2、学习化学融合的基本操作过程。
3、观察动物细胞融和过程中细胞的行为和变化。
二、实验用品
1、材料
鸡血红细胞
2、试剂
50%PEG、Hank’s溶液（pH7.4）、Alsever’s细胞保存液0.85%氯化钠溶液。
3、器材
普通光学显微镜、离心机、量筒、载玻片、盖玻片离心管、废液缸等。
三、实验原理
细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。
1、病毒诱导融和
仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可
姓名董朔晖 系年级生命科学院20##级 学号201100230164
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【实验目的】
1. 了解动物细胞融合的常用方法。
2. 学习化学融合和电融合的基本操作过程。
3. 观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。
【实验原理】
细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。
1、病毒诱导融合
仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。
2、化学诱导融合
很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。PEG是广泛使用的化学融合剂。
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实验二：动物细胞融合
一、实验目的
1、了解动物细胞融合的常用方法——聚乙二醇诱导细胞融合的基本原理。
2、学习化学融合的基本操作过程。
二、实验用品
1、材料
鸡血红细胞
2、试剂
50%PEG、Hank’s溶液（pH7.4）、Alsever’s细胞保存液0.85%氯化钠溶液。
3、器材
普通光学显微镜、离心机、量筒、载玻片、盖玻片离心管、废液缸等。
三、实验原理
细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。
1、病毒诱导融和
仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可
诱导细胞发生融合。
2、化学诱导融合
很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。PEG是广泛使用的化学融合剂。
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【实验题目】
动物细胞融合
【实验目的】
1.了解动物细胞融合的常用方法。
2.学习化学融合的基本操作过程。
3.观察动物细胞融合过程中细胞的行为与变化。
【实验材料与用品】
1、材料
鸡血红细胞
2、试剂
50%PEG、GKN溶液、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。
3、 器材
倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、滴管等。
【实验原理】
细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括：病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。
1、病毒诱导融合
仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。
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动物细胞融合实验报告
实验目的
a.了解动物细胞融合的常用方法
b.学习化学融合和电融合的基本操作过程
c.观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化
实验原理
细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。很多化学试剂，如聚乙二醇（PEG），能诱导细胞融合，改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。
实验材料和用品
材料：鸡血红细胞
试剂：50%PEG液、0.85%NaCl溶液、GKN液
器材：倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、试管、离心管
实验步骤
a.取1ml鸡红细胞悬液+4ml的0.85%NaCl溶液，进行以下两次离心处理：
1）1000r/min离心2分钟。（去上清液，再加入至5ml的0.85%的NaCl溶液）
2）1000r/min离心2分钟。
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一．实验目的
1.了解并掌握细胞融合的方法
2.了解细胞融合技术及其在生命科学中所起的作用
3.掌握化学融合法，了解电融合法及CRY-3细胞融合仪的使用
二．实验原理
两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合，也称细胞杂交，在自然情况下的受精过程即属这种现象。
诱导细胞融合的主要方法有：病毒诱导融合，化学融合剂诱导融合和电融合。
1. 病毒诱导融合：有许多种类的病毒能介导细胞融合，最常用的是灭活的仙台病毒（HVJ），为RNA病毒。病毒诱导细胞融合的过程有：首先是细胞表面吸附许多病毒粒子，接着细胞发生凝集，几分钟至几十分钟后，病毒粒子从细胞表面消失，而就在这个部位邻接的细胞的细胞膜融合，胞浆相互交流，最后形成融合细胞。
2. 化学融合剂诱导融合：化学融合剂主要有高级脂肪酸衍生物、脂质体、钙离子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白质和多肽，其中最常用的是聚已二醇（PEG）。PEG用于细胞融合至少有两方面的作用：①可促使细胞凝结；②破坏互相接触处的细胞膜的磷脂双分子层，从而使相互接触的细胞膜之间发生融合，进而细胞质沟通，形成一个打的双核或多核融合细胞。
3. 电融合：是指细胞在电场中极化成偶极子，并沿着电力线排列成串，然后用高强度、短时程的电脉冲击穿细胞膜而导致细胞融合。
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聚乙二醇介导的细胞融合
20##年2月19星期一
陈倩倩（118627140313）同作者：郑梦璐 谢雨后 赵松
1、文摘
细胞能不受种属的局限可实现种间生物体细胞的融合,使远缘杂交成为可能,因而是改造细胞遗传物质的有力手段。它的意义在于从此打破了仅仅依赖有性杂交重组基因创造新种的界限,扩大了遗传物质的重组范围。
但融合后获得的杂种细胞具有染色体异倍性,致使细胞株的遗传性不稳定、植株不育性、畸形、生育迟缓等不符合育种要求的性状出现,直接利用杂种细胞作育种材料目前还有许多障碍。
细胞融合技术避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作,在技术和仪器设备上的要求不像基因工程那样复杂,投资少,有利于广泛开展研究和推广,有着重大的实践意义,正得到科学界的日益重视。
自从20世纪70年代Kao和Michayluk用聚乙二醇( PEG, polyethyleneglycol) 诱导大麦、大豆等植物原生质体融合后PEG法诱导细胞融合以其容易制备、活性稳定、不需要特别的仪器设备、操作简便等优点, 被普遍地应用于生物、遗传、医药等研究领域. 高体积分数、高相对分子质量的PEG会对细胞产生毒性, 是限制其被广泛应用的瓶颈, 此外,由于该方法涉及的影响因素较多, 进一步加大了获得理想细胞融合率的难度.本实验主要研究PEG的浓度和细胞浓度对细胞融合率的影响。
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