染色体标本的制备及观察
泮力菁 201100140091 20##级生物基地 同组者:商倩倩
【实验目的】
1、掌握染色体标本制作的方法;
2、认识不同生物染色体的特征,学会制作染色体组形图;
【实验原理】
1、制作染色体标本的意义:A、生物学方面:根据染色体特征鉴别生物及种类(例如猫38;小鼠40;大鼠42;兔44;人46;马64;鸡和狗78);B、临床医学方面:主要用于遗传性疾病的诊断及研究(例如21三体综合症,卵巢退化症;睾丸退化症等)。因此,染色体阻性实验广泛应用与胎儿遗传性疾病早期诊断中(抽羊水做组型)。
2、染色体标本的制作原理:A、制作染色体标本的先决条件:细胞具有旺盛的分裂能力(选择活跃的组织:胸腺,骨髓,睾丸,小肠;施加药物使细胞分裂);设法得到大量的分裂中期细胞(秋水仙素)。B、重要点:PHA:促细胞分裂,使淋巴细胞返幼,变为淋巴母细胞;秋水仙素:破坏微管装配,使纺锤体不能形成,使大量细胞停止在分裂中期;低渗作用:水进入细胞内,细胞内容空间变大,染色体间的距离拉大,抑郁cs分散开;空气干燥:使细胞和cs展开;固定:用carnoy’s solution(甲醇:冰醋酸=3:1)作用是蛋白质变性,对染色体内的组蛋白讲,变性后硬度增加,保持了染色体的“即时形态”,对细胞膜蛋白讲,变性使细胞膜硬度增加,形成屏障作用,防止了细胞内物质的外溢和丢失。
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细胞生物学实验报告
叶绿体的分离、纯化与荧光观察
【实验目的】
⒈通过植物细胞叶绿体的分离与纯化,了解细胞器分离与纯化的原理和方法。
⒉熟悉荧光显微镜的使用方法,观察叶绿体的自发荧光和间接荧光。
【实验原理】
⒈叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器,叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作用就是在叶绿体中进行。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种的细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。
叶绿体结构模式图
组织细胞的破碎方法很多,包括机械法(研磨法、 匀浆法、胶体磨法)和非机械法(超声波法、有机溶法、溶胀法、酶解法)。除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同。
⒉细胞器分离的过程包括两个主要阶段:碎细胞和细胞组分的分离。将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行离心,差速离心和密度梯度离心是分离亚细胞组分的常用方法。
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细胞生物学实验报告
小鼠脾细胞原代培养
姓名:杜旭 学号:201100230155 系年级:20##级临七一班 同组者:赵伟 日期:2012/4/25
【实验目的】
⒈学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。
⒉了解原代细胞培养的基本方法及操作过程。
⒊学习细胞计数及营养液的配制。
【实验原理】
⒈细胞原代培养
原代细胞培养是指直接从动物体内获取的细胞、组织和器官,经体外培养后,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经消化,分解成单个游离细胞,在人工培养下,使其不断的生长及繁殖。
细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。要使细胞能在体外长期生长,必须满足两个基本要求:一是供给细胞存活所必须的条件,如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度,注意外环境酸碱度与渗透压的调节。二是严格控制无菌条件。
⒉细胞死活鉴定
死活细胞的鉴定方法有很多种,常用的有染色法和仪器分析法。染色法是常用的细胞死活鉴定方法,简便,易于操作。不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理,但无论采用何种办法,都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。
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实验六 细胞膜的渗透性
一、 实验目的
了解细胞膜[1]的渗透性及各类物质进入细胞的速度[2]
二、 实验原理
1、 在等渗溶液中,细胞对各种溶质的透过性不同。有的溶质可以进入,有的溶质不能渗入。
2、 渗入的溶质能提高细胞的渗透压,促进水分子进入细胞,引起溶血现象[3]。
3、 不同的溶质渗入到细胞内的速度不同,因此溶血时间也不同。
三、 实验材料
新鲜血液(鸡血、猪血、牛血等)
四、 实验器材
试管(1.5 cm X 18 cm)、试管架、10 ml移液管、1 ml移液管、200 ml烧杯(2个)、250ml容量瓶、移液枪、胶头滴管、菜刀、吸球、电子天平、显微镜、盖玻片、载玻片、秒表
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细胞生物学实验报告
小鼠睾丸染色体的制备与观察
姓名:杜旭 学号:201100230155 系年级:20##级临七一班 同组者:赵伟 日期:2012/5/16
【实验目的】
⒈了解小白鼠睾丸细胞染色体的形态及数目。
⒉初步掌握小白鼠睾丸细胞染色体的玻片标本制作方法。
⒊观察动物细胞染色体的数目和形态。
【实验原理】
⒈制作染色体标本的先决条件:
⑴细胞具有旺盛的分裂能力(①选择活跃的组织如睾丸、骨髓。②施加药物使细胞分裂如PHA)
⑵设法得到大量中期细胞,秋水仙素处理。
⒉操作方法
利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作,但其基本程序是简便的。在小鼠睾丸中,细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛,因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。通过小鼠睾丸得到染色体比较简便,一般不需要无菌操作。用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂。
由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。
减数分裂是细胞分裂染色体数目减半时发生在性细胞的形成过程中。哺乳动物在性成熟以后,精巢内的性细胞总是在分批分期不断的成熟,因此,对哺乳动物的精巢进行一定的技术处理,随时都可以获得减数分裂过程中各个时期染色体的标本。
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湖南科技学院实验报告
学生姓名 李诗 学号 201107004215
专 业 生物技术 年级、班级 1102
课程名称 细胞生物学实验 实验指导老师 蒋琼凤、沈玉平
细胞中过氧化物酶的显示
细胞凋亡的形态学检测与观察
一、实验目的:
1. 掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
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