小图家族的秘密

-—DNA新证据揭露出少年国王双亲的真相和他不正常早逝的内幕

这个重达250磅的金馆内曾躺着小图的木乃

伊。

作为古

埃及的象征，少年法老的面容永远留在了他的黄金面具上，与玻璃和半宝石在一起。从他墓中出土的宝藏。现存于埃及开罗博物馆，吸引了源源不绝的游客。

深藏于尼罗河

西岸的沙漠峡谷中，国王谷是小图及其家族成员的安息之地。在古代这个地区与世隔绝。今天，不断扩张的卢克索市郊在远处闪光。

撰文：扎西·哈瓦斯（Zahi Hawass）；摄影：肯尼·加瑞特（Kenneth Garrettt）。

木乃伊总是吸引着我们的内心。这些充斥着秘密和魔法的遗体，曾经像我们一样，活过，并爱过。

我相信我们应该尊敬这些古人，并让他们安息。

然而，法老们还有不少的秘密，只能依靠研究这些木乃伊来解答。我们在20xx年为图坦卡蒙（Tutankhamun）的木乃伊做了CT扫描，发现他并非死于头部遭受重击——正如很多人相信的那样。经过分析，我们认为，他头骨后面的洞是在制作木乃伊是过程中造成的。那次的检验也表明小图死时只有19岁——也许就死在他的脚骨折没多久之后。但即便是CT也无法解答小图的另一些秘密。现在我们更深入地查看他的木乃伊，获得了大量关于他的生活、出生和死亡的信息。

…… …… 余下全文

常见的报告基因

报告基因必须具备的特点：①由原核基因编码的基因产物必须与同转染前真核细胞内任何相似的产物相区别；

②细胞内其他基因产物不会于扰报告基因产物的检测；③报告基因编码产物的检测应该快速、简便、灵敏度高，

而且重现性好。到目前为止，报告基因通常是在报告基因载体质粒中与被检测基因序列相连，

先让质粒在大肠杆菌中进行增殖，再提取质粒，转染人感兴趣的真核细胞中。与此同时还要将有真核启动子和增强子的 另一种报告基因质粒共转染同一细胞，作为转染率的内对照。

(1)氯霉素乙酰基转移酶(CAT)：该报告基因来源于大肠杆菌转位子9，是第1个用于检测细胞内转录活性的报告基因。 氯霉素乙酰基转移酶可催化乙酰CoA的乙酰基转移到氯霉素3羟基，而使氯霉素解毒。CAT在哺乳细胞无内源性表达， 性质稳定，半衰期较短，适于瞬时表达研究。可用同位素、荧光素和酶联免疫吸附测定(enzyme—linkedimmunosorbantassay， ELISA)检测其活性，也可进行蛋白质印迹(Westernblotting)和免疫组织化学分析。CAT与其他报告基因相比，

线性范围较窄，灵敏性较低。

(2)β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大肠杆菌lacZ基因编码，可催化半乳糖苷水解。最大优势是易于用免疫组织化学法 观测其原位表达，是最常用的监测转染率的报道基因之一。以邻—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷(ONPG)为底物可用 标准的比色法检测酶活性，其检测动力学范围为6个数量级。氯酚红—β—D—半乳吡喃糖苷(CPRG)是另一个可用比 色法检测酶活性的底物，其灵敏度比ONPG高近10倍。以MUG和荧光素二半乳糖苷(FDG)为底物则可用荧光法检 测其活性。此法可检测单个细胞的酶活性，并可用于流式细胞学(FACS)分析。如以二氧杂环丁烷为底物，可用化学 发光法检测酶活性，其检测动力学范围最大，灵敏度最高，与用生物发光法检测荧光素酶活性的灵敏度相似。

…… …… 余下全文

二．实验报告

…… …… 余下全文

植物DNA的粗提取与鉴定

实验摘要：对香蕉的果肉组织进行DNA的粗提取，并用二苯胺﹝沸水浴﹞进行DNA鉴定。

实验原理：1.洗涤剂可溶解植物细胞膜

2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度曲线呈U字形。

3.细胞中的某些蛋白质溶于酒精，而DNA不溶。

4. DNA分子在低温下更易凝结。

5.在沸水条件下，DNA遇二苯胺会被染成染色。

6.离心机可使悬浊液中的颗粒沉淀下来﹝详见附录﹞ 实验器材：

玻璃棒、烧杯、滤纸、试管、试管夹、电磁炉、离心机、NaCl、二苯胺试剂、洗涤剂、香蕉等

实验步骤：

1. 取50克左右的去皮香蕉，放入研磨钵中研磨，同时加入一定量的氯化

钠与洗涤剂，尽可能的充分研磨，使更多的DNA从植物细胞中释放出来，但动作要轻缓，否则会产生大量泡沫，不利于后续操作。

研磨好后，过滤并收集研磨液，在研磨液中加入氯化钠，使氯化钠溶液物质的量浓度为2mol/L,过滤除去不可溶杂质。再调节氯化钠溶液物质的量浓度为0.14mol/L，析出DNA，过滤除去溶液中的杂质，再用物质的量浓度为2mol/L的氯化钠溶液溶解DNA。

加入与DNA溶液体积相等的、冷却的酒精溶液﹝体积分数为百分之九十五﹞，静置2到3分钟，溶液会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物﹝玻璃棒带负电，易吸附DNA﹞，并用滤纸吸去上面水分，注意搅拌动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

…… …… 余下全文

大肠杆菌和植物基因组DNA提取

生科基 彭健鹏 2012141242048

1.大肠杆菌DNA提取方案设计

实验目的

学习并掌握细菌基因组的提取方法

提取大肠杆菌DH5α中的DNA并进行质量检测

实验概述

提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含十二烷基硫酸钠（SDS）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。

试验准备

实验材料：大肠杆菌DH5α菌液

实验试剂：LB液体培养基，TE溶液，10%SDS，蛋白酶K，5mol/L NaCl， CTAB/NaCl溶液，酚/氯仿/异戊醇，异丙醇，70%乙醇

实验仪器与用具：微量移液器，低温离心机，水浴锅，eppendorf管，恒温摇床

实验步骤

（1）将2mL培养至对数期的大肠杆菌DH5α菌液5000rpm冷冻离心10分钟弃上清；

目的：分离大肠杆菌与其培养液。

（2）加190μL TE悬浮沉淀，并加10μL 10%SDS，1μL 20mg/mL蛋白酶K，混匀，37℃保温1h；

目的：裂解大肠杆菌。

（3）加30μL 5mol/L NaCl，混匀；

…… …… 余下全文

基因组DNA的提取和电泳（实验五）实验报告

一、实验目的

了解DNA提取的方法，以及琼脂糖凝胶电泳分析DNA技术。

二、器材和试剂

1. 器材

水平琼脂糖电泳仪，离心机，水浴锅，研钵，离心管、移液枪、水稻幼苗等

2.       试剂

1.       1mol/L  Tris.Cl(pH8.0) 的配制：称取12.11g 的Tris，置于80 mL的ddH₂0,加入浓盐酸（约4.2 mL）,调节pH值至8.0，定容至100 mL。

2.  0.5 mol/L EDTA(pH8.0)的配制：18.61g Na₂EDTA·2H₂O，加入80 mL的ddH₂O,用NaOH颗粒调pH值至8.0（约需2 g），定容至100 mL。

3.  提取缓冲液的配制： 100 mmol/L Tris.Cl(pH8.0), 20 mmol/LEDTA, 500 mmol/L NaCl, 1.5%SDS

4.  80/4/16氯仿：异戊醇：乙醇

…… …… 余下全文

哈尔滨工业大学（威海）软件学院

  C程序设计  实验报告

编号：                   

…… …… 余下全文

注：1、报告内的项目或内容设置，可根据实际情况加以调整和补充。     

2、学生提交实验报告时间为实验后10日内。

…… …… 余下全文