实验报告：纤维素水解的最佳实验条件探讨

      

纤维素水解反应是中学化学演示多糖性质的一个实验。它主要说明多糖水解后可生成葡萄糖，并由于葡萄糖的还原作用而发生银镜反应。但银镜反应检验时反应慢而且效果不佳，本实验用正交实验来探索纤维素水解的最佳实验条件，以期达到较好的银镜效果。

1、 实验指标的确定

本实验以形成光亮的银镜作为实验的定量指标，以便对实验结果进行分析，找出最佳条件，本实验的评分标准确定为：

100 分：银镜光亮，呈银白色，镜面细密，厚薄均匀，无斑点，无花纹

90 ～99 分：银镜光亮，呈银白色，镜面细密，厚薄均匀，稍有斑点或花纹

80 ～99 分：银镜光亮，镜面细密，厚薄均匀，略灰白或灰黑

70～ 79 分：银镜光亮，镜面厚薄不均匀，略灰白或灰黑，有斑点或花纹

60～ 69分：镜面发乌，镜面稀薄，略灰白或灰黑

60分以下：镜面稀薄，银镜效果不明显

2、 实验研究过程

2.1因素水平的确定

   有关文献资料表明，影响该实验的最佳条件主要包括3个方面：影响纤维素水解的因素；影响银氨溶液配制的因素；影响银镜反应的因素。表1为确定因素水平表。

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纤维素的水解

寇萌枭

2008级3班第3实验小组,187xxxxxxxx

一、实验原理

纤维素在一定温度和酸性催化剂条件下，发生水解，最终生成葡萄糖： (C6H10O5)n+nH2O＝nC6H12O6

葡萄糖分子中含有醛基，故具有较强的还原性，在碱性条件下能将新制得的氢氧化铜还原为红色的Cu2O沉淀；能和银氨溶液发生银镜反应。

二、实验操作过程及实验现象

1、主要仪器与药品

烧杯(50mL，250mL)﹑石棉网﹑三角架﹑试管﹑试管夹﹑酒精灯﹑玻璃棒 滤纸或 脱脂棉、浓H2SO4、NaOH、5% NaOH溶液、pH试纸、无水Na2CO3、2% AgNO3溶液、5% CuSO4溶液、2%氨水、蒸馏水

2、实验步骤

1）按浓硫酸与水7∶3(V/V)的比例配制H2SO4溶液20mL于50mL的烧杯中。

2）取脱脂棉或滤纸一片(4×4cm即可)撕碎，向小烧杯中边加边用玻璃棒搅拌，使其变成无色粘稠状的液体，然后将烧杯放入水浴(用250mL烧杯代替水浴锅)中加热约10min，直到溶液显棕色为止。

3）取出小烧杯，冷却后将棕色溶液倾入另一盛有约20mL蒸馏水的烧杯中，用移液管取该溶液1mL注入一大试管中。用固体NaOH中和溶液，直至溶液变为黄色，再加Na2CO3调节溶液的pH至9。

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纤维素的水解

2011级化学二班

一、 实验目的

1. 了解纤维素水解的实验过程。

2. 掌握纤维素水解实验的操作技能，进一步掌握其演示方法。

3. 熟练掌握浓硫酸稀释过程的操作，并注意其存在的安全问题。

4. 掌握銀氨溶液配制的原理和方法。

5. 复习含有醛基的有机物的性质。

二、 实验原理

1. 纤维素在一定温度和浓硫酸提供的酸性环境条件下发生水解，最终生成葡萄糖：

(C6H10O5)n+nH2 nC6H12O6

纤维素 葡萄糖

2. 葡萄糖分子中含有醛基，因此具有还原性。在碱性条件下能将新制得的氢氧化铜还原为红色的Cu2O沉淀；能和银氨溶液在水浴加热下发生银镜反应。反应方程式为：

C6H12O6+Cu(OH)(C5H11O5COO)2Cu+Cu2O↓+H2O

C6H12O6+2Ag(NH3)2OH C5H11O5COONH4+3NH3+2Ag↓+H2O

三、 实验试剂及仪器

1. 实验试剂：脱脂棉，浓H2SO4、NaOH、5% NaOH溶液、pH试纸、无水Na2CO3、2% AgNO3溶液、5% CuSO4溶液、2% 氨水、蒸馏水。

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实验三 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测

一、实验目的

1.制备固定化的淀粉酶。

2.进行淀粉水解的测定。

二、实验原理

用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成。

这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶，其作用的最适pH范围为5.5-7.5，最是温度为50-75℃。

1、酶的固定化

酶：生物体内活细胞产生的具有催化作用的有机物。

固定化酶：将水溶性酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。

一般酶的固定化方法：吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法。

吸附法：

P32利用各种吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面上而使酶固定的方法。通常有物理吸附法和离子吸附法。

常用吸附剂有活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等。

采用吸附法固定酶，其操作简便、条件温和，不会引起酶变性或失活，且载体廉价易得，可反复使用。

2.石英砂的吸附作用

   石英砂吸附酶的物理吸附也称范德华吸附，它是由吸附质和吸附剂分子间作用力所引起，此力也称作范德华力。由于它是分子间的吸力所引起的吸附，所以结合力较弱，吸附热较小，吸附和解吸速度也都较快。被吸附物质也较容易解吸出来，所以物理吸附在一定程度上是可逆的。

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微生物大实验——土壤中芽孢杆菌的分离及鉴定实验报告

学    院：生命科学学院    

专    业：生物技术

班    级：

组    数:

学    号:

姓    名:

前言

芽孢杆菌是能形成芽孢 (内生孢子)的杆菌。芽孢是休眠体，不是繁殖体。绝大多数是一个菌体仅形成一个芽孢芽孢位于菌体内,由核心、皮层、芽孢壳和外壁组成。核心是芽孢的原生质体，内含DNA、RNA、可能与 DNA相联系的特异芽孢蛋白质以及合成蛋白质和产生能量的系统。芽孢杆菌属是大的(4–10um), 革兰氏阳性，严格需氧或兼性厌氧的有荚膜的杆菌。该属细菌的重要特性是能够产生对不利条件具有特殊抵抗力的芽孢。芽孢杆菌属可分为以下亚群：多粘芽孢杆菌、枯草杆菌（包括蜡样杆菌和地衣芽孢杆菌）、短芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌。芽孢杆菌是一种耐高温、高压及低PH值的有益微生物，本实验从土壤中分离出15株芽孢杆菌，从中挑选出一株芽孢杆菌进行生理生化鉴定，以及分子鉴定。通过进一步的实验，了解到其生理生化特点。

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20##级发酵大实验（1）

实验报告

                  

任课老师：

姓名：

                      专业：生物技术

                      班级：

                      学号：

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    山东大学实验报告       2012年 12 月 4日

姓名      系年级 20##级生科2班    组别 四   

科目 微生物学实验          题目 微生物的生理生化反应     

                            微生物的生理生化反应

一、【实验目的】

1. 证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。

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