名词解释

1.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。

2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。其最大的特征是失去分裂能力。

3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。

4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。

5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。

6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。

7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。

8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。

9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。

10.无菌操作：亦称接种。指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。

11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。

12.培养基：培养基是提供植物或其他生物生长发育所需各种养分的介质。

13.胚状体：亦称体细胞胚。指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。其与正常的受精卵发育方式相似，在形成过程中也要经过原胚、球形胚、心形胚等阶段。

14.外植体：由活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。

15.愈伤组织：原指植物在受伤后伤口表面形成的一团无序生长的薄壁细胞，在组织培养中，是指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。其特点是：细胞分裂快，结构疏松，缺少结构组织，颜色浅而透明。

16.初代培养：是指在组培过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。即无菌接种完成后，送入培养室的外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短枝(或称茎梢)、不定芽(丛生芽)、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。

17.中间繁殖体：通过初代培养所获得的不定芽、无菌茎梢、胚状体或原球茎等无菌材料。

18.继代培养：中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移到新的培养基中培养增殖的过程。

19.繁殖系数：指单位植物种苗的收获量与接种量之比。

20.原球茎：亦称绿色小球。多指兰科植物的茎尖经组培，形成一个扁形球状物，，其基部生有假根。它们在形态上与种子萌发时由胚形成的原球茎相似。

21.悬浮培养：亦称植物细胞悬浮培养。指使细胞团在液体培养基中进行培养的一种方法。通常可分为成批培养和连续培养两种类型。

22.后生遗传变异：亦称驯化现象。指细胞在发育、分化过程中，对基因表达的调控上所发生的变化，其不涉及基因结构的变化。后生遗传变异在取消诱发条件后，还能通过细胞分裂在一定时间内继续存在。在一般情况下，它不通通过再生过程遗传给植株，因而这种变异无法继续表现在再生植株的二次组培中。

23.嵌合体：亦称异源嵌镶体。植物体的突变往往只影响分生组织的一部分，使突变的组织呈扇状或层状。用这种分生组织所繁殖的植物，因同时具有两个或多个遗传性状不同的组织，而表现出不同的性状和特点的现象。

24.原生质体融合

25.早熟萌发

26.单倍体植株

27.外植体

28.愈伤组织培养：

29.玻璃化现象

30.体细胞胚

31.无病毒苗

32.植板率

33.cDNA检测法

选择题

1．一植株下列（ B ）部位病毒的含量最低。

A 叶片细胞 B 茎尖生长点细胞

C 茎节细胞 D 叶柄细胞

2．对于不易生根，较难形成完整植株的植物来说，最好的脱毒方法是（C ）。

Ａ 茎尖脱毒 Ｂ 愈伤组织脱毒

Ｃ 微尖嫁接脱毒 Ｄ 花药脱毒

3．培养基的pH一般是（ C ）。

A 4.8～5.0 B 5.0～5.6

C 5.8～6.0 D 6.0～7.0

4．下列不属于生长素类的植物激素是（ A ）。

A Kt B IAA

C NAA D IBA

5．19xx年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了（ B ）培养基，其特点是无机盐浓度较高。

Ａ Ｗhite Ｂ ＭＳ

Ｃ N6 Ｄ Ｍiller

6．第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（ B ）。

A Morel B Haberlandt

C Schleiden D White

7．下列不属于大量元素的盐是（C ）。

A NH4NO3 B KNO3

C ZnSO4·7H2O D MgSO4·7H2O

8．在组织培养中，IAA、ZT和GA必须用（ B ）法灭菌

Ａ 高压灭菌 Ｂ 过滤灭菌

Ｃ 干燥灭菌 Ｄ 照射灭菌

9．要配置母液浓度为0.1mg/ml的IBA 500ml，需要IBA（ B ）mg。

A 20 B 50

C 100 D 1000

10．下列不属于微量元素的盐是（A）

A CaCL2·2H2O B ZnSO4·7H2O

C H3BO3 D CuSO4·5H2O

11．对于不易生根，较难形成完整植株的植物来说，最好的脱毒方法是（ C ）。

A．茎尖脱毒 B．愈伤组织脱毒

C．微尖嫁接脱毒 D．花药脱毒

12．禾本科植物的花粉培养一般采用下列哪种培养基（ B ）。

A．B5 B．N6

C．H D．尼许

13．培养基的pH一般是（ C ）。

A．4.8～5.0 B．5.0～5.6

C．5.8～6.0 D．6.0～7.0

14．下列不属于生长素类的植物激素是（ A ）。

A．Kt B．IAA

C．NAA D．IBA

15．19xx年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了（ B ）培养基，其特点是无机盐浓度较高。

A．White B．MS

C．N6 D．Miller

16．第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（ B ）。

A．Morel B．Haberlandt

C．Schleiden D．White

17．花药培养中，大多数植物适宜的花粉发育时期是（ B ）。

A．四分孢子期 B．单核后边期

C．双核期 D．三核期

18．能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是（ A ）。

A．GA B．IAA；

C．NAA D．ZT

19．在成批培养过程中，细胞数目呈（ C ）曲线变化。

A．Y型 B．X型

C．S型 D．Z型

20．要配置母液浓度为0.1mg/ml的IBA 500ml，需要IBA（ B ）mg。

A．20 B．50

C．100 D．1000

21.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_________：

A Morel； B Haberland；

C Schleiden； D White

22.下列培养基中_______无机盐的浓度最低。

A MS培养基； B B5培养基；

C White培养基； N6培养基

23.高温易被破坏分解的植物激素是_________。

A IAA； B GA；

C NAA； D Zt

24.细胞悬浮成批培养过程中，细胞的生长，大致经历________四个时期。

A 对数生长期； B 停止期；

C 延缓期； D 减慢期

25.下列不属于活性炭在组织培养中作用的是_______。

A吸附有毒物质； B减少褐变，防止玻璃化；

C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；

D增加培养基中的养分；

26.下列不属于细胞分裂素类的植物激素是_________。

A 6-BA； B NAA；

C Zt； D Kt

27.下列不属于大量元素的盐是_________。

A NH4NO3； B KNO3；

C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O

28 培养室里的湿度一般保持在_________

A 30~40%； B 50~60%；

C 70~80%； D 80~90%

29.吲哚乙酸（IAA）需要用_________法灭菌。

A 灼烧灭菌； B 干热灭菌；

C 过滤灭菌 D高压湿热灭菌

30. 适宜的花粉发育时期：________。

A 单核早期； B 双核期；

C 三核期； D 单核中、晚期

31. 下列不属于生长素类的植物激素是________。

A Kt； B IAA；

C NAA； D 6-BA

32. 影响培养基凝固程度因素有________。

A 琼脂的质量好坏； B 高压灭菌的时间；

C 高压灭菌的温度； D 培养基的PH

33．从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历________三个时期。

A 诱导期； B 潜伏期；

C 分化期； D 分裂期

多项选择题

1．响培养基凝固程度因素有（ ABCD ）。

A．琼脂的质量好坏 B．高压灭菌的时间

C．高压灭菌的温度 D．培养基的PH

2．活性炭在组织培养中的作用有（ ABC ）。

A．吸附有毒物质

B．减少褐变，防止玻璃化；

C．创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；

D．增加培养基中的养分；

3．下列具有细胞全能性的细胞是：（ ABCD ）。

A．成熟的老细胞 B．幼嫩的组织细胞

C．愈伤组织细胞 D．番茄的受精合子

4．下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是（ ABCD ）。

A．细胞分裂加快

B．正在分裂的细胞体积小，内无大液泡

C．细胞的核和核仁增至最大

D．细胞中RNA的含量减少，而DNA含量保持不变

5．组织培养按培养方式可分为（ AC ）。

A．固体培养 B．叶培养

C．液体培养 D．生根培养

6．由植物器官分离单细胞的方法有（AB ）

A．机械分离法 B．酶解法

C．离心法 D．振荡法

7．影响褐变的主要因素有（ ABCD ）。

A．基因型 B．外植体的生理状况

C．培养基的成分 D．材料转移时间

8．最常用的植物病毒鉴定方法有（ ABCD ）。

A．抗血清鉴定法 B．分子生物学鉴定法

C．指示植物法 D．直接鉴定法

9．根据培养基作用不同，培养基可分为下列哪几种（ BCD ）。

A．基本培养基 B．诱导培养基

C．增殖培养基 D．生根培养基

10．外植体的选择原则主要从以下哪些方面考虑？(ABCD)

A．植物的基因型 B．生理状态

C．取材季节 D．取材部位

11．活性炭在组织培养中的作用有（ ABC ）。

A．吸附有毒物质

B．减少褐变，防止玻璃化；

C．创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；

D．增加培养基中的养分；

12．幼胚培养时，其发育过程有（ ABC ）三种方式。

A．胚性发育 B．早熟萌发

C．产生愈伤组织 D．器官发生

13．组织培养按培养方式可分为（ AC ）。

A．固体培养 B．叶培养

C．液体培养 D．生根培养

14．由植物器官分离单细胞的方法有（ AB ）

A．机械分离法 B．酶解法

C．离心法 D．振荡法

15．影响褐变的主要因素有（ ABCD ）。

A．基因型 B．外植体的生理状况

C．培养基的成分 D．材料转移时间

16．常用的植物脱毒方法有 （ ABCD ）

A．茎尖培养脱毒 B．愈伤组织培养脱毒

C．微尖嫁接脱毒 D. 花药培养脱毒

17．单倍体植株染色体加倍的方法有（ ABCD ） 。

A．自然加倍法 B．秋水仙素法

C．组织创伤法 D．氟乐灵法

18．最常用的植物病毒鉴定方法有（ ABCD ）。

A．抗血清鉴定法 B．分子生物学鉴定法

C．指示植物法 D．直接鉴定法

19．根据培养基作用不同，培养基可分为下列哪几种（ BCD ）。

A．基本培养基 B．诱导培养基

C．增殖培养基 D．生根培养基

20．外植体的选择原则主要从以下哪些方面考虑？( ABCD )

A．植物的基因型 B．生理状态

C．取材季节 D．取材部位

填空题

1．在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以_________mm、带________个叶原基为好。

0.3～0.5，1～3

2．去除植物病毒的主要方法是_______________和____________两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。

茎尖培养脱毒，热处理脱毒

3．花药培养是____________培养，花粉培养属于________培养，但二者的培养目的一样，都是利用了花粉粒染色体数目的___________，最后发育成__________。

器官，细胞，单倍性，单倍体，

4．要配制培养基成分为MS+IAA1.0+6-BA2.0 的培养基2L需要吸取母液浓度均为0.1mg/ml的IAA__________ml，6-BA___________ml。

20，40

5． 比值的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进芽的生长，这时细胞分裂素占主导地位；比值高促进根的生长，这时生长素占主导地位。

细胞分裂素，生长素

6．在组织培养中，不耐热的物质用___________灭菌，而培养基常用_____________灭菌。

过滤法，湿热法

7．组织培养中有三大不易解决的问题是_______、_______与__________。

污染、褐变、玻璃化

8．组织培养中培养室的温度一般控制在__________，湿度一般控制在___________。

25℃±2℃，70%~80%

9．植物组织培养根据培养方式可分为_____________和_____________。

固体培养，液体培养

10．烘箱用于干燥玻璃器皿的温度可以设在_________的范围内，用于高温干燥灭菌则需在____________的温度下1-3小时；用于烘干植物材料的温度是______________。

100-130℃，160-180℃，80℃

11．植物胚胎培养包括幼_________、_________、_________、_________以及子房培养。

胚培养、成熟胚培养、胚珠培养、胚乳培养

12．一粒成熟的种子含有一个________，构成胚的所有细胞几乎都处于__________的状态和旺盛的细胞_______能力，这些细胞叫胚性细胞，或叫分生性细胞或未分化细胞。其特征是具有_________。

胚，未分化，分裂，分裂能力

13．一个已分化的细胞或组织若要表现其全能性，一般要经历两个过程：________和_________。

脱分化，再分化

14．中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移到新的培养基中培养增殖，这个过程就称为继代培养。继代培养是继__________之后的连续数代的扩繁培养过程，旨在繁殖__________的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。

初代培养，相当数量

15．根据培养物的进程和培养基的作用不同，培养基可分为诱导(启动)培养基、_________________及________________________。

增殖(扩繁)培养基，壮苗生根培养基。

16．根据其营养水平不同，分为___________和___________。

基本培养基，完全培养基

17．外植体的消毒原则是既要_________离体材料表面的全部微生物，又不_____________植物材料。

杀死，损伤或只轻微损

18．胚胎培养是将植物的 和母体分离，培养在已知化学成分的培养基上，胚胎培养包括 、 、 、以及 和 培养。

19．细胞平板培养法一般包括 、 、 、 、和 五个步骤。

20．无病毒原种苗只是脱除了原母株上的特定病毒， 并末增加， 因而在自然条件

下易变 而丧失其利用价值，同时受自然条件影响，无病毒原种易 。正确保存无病毒原种苗的方法有 和 两种。

21．花粉植株的形成有两条途径：一是划分形成 ，再分化诱导成苗，二是花粉分化成 而直接成苗。

22．植物组织培养的发展过程大致可分为三个阶段：

⑴ 阶段（ 初至30年代中）

⑵ 阶段（30年代末至 年代中）

⑶ 阶段（ 年代至现在）

23请写出下列响应的名称或代号

A.维生素C

B.NAA

C.6-BA

D.吲哚-3-丁酸

E.水解酪蛋白

F．CM

G．IAA

H．维生素B1

I．维生素C

J．NAA

K．6-BA

24．愈伤组织的形成一般要经过 、 、 三个时期。

25．FDA染色法是常用且比较理想的检测原生质体活性的方法，FDA本为 荧光 极性，可自由透过原生质体质膜，在原生质体内易受 的分解，而产生 荧光的 ，它不能自由进出原生质体的质膜，所以在荧光显微镜下可观察到 的原生质体，表明是有活力的原生质体， 的原生质体，则是无活力的原生质体。

26．在花药培养中花粉粒经 或 途径形成孢子体（植株）。

27．在细胞培养中，目前常用 酶和 酶从植物不同组织中直接制备单细胞，然后再通过 培养、 培养或 培养方法，即可获单细胞 系。

28．植物脱毒一般包括 、 、 、 四种途径，其中脱毒效果最好的是 。

29．胚乳再生植物根据细胞核变化与分化器官的表现可分为 和 两类。

30．植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养。

31．植物组织培养的应用有：______、__ __、 、______、 、 等。

32．花粉细胞通过 和 途径形成再生植株

33．在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用___ _______法灭菌。

34．6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值_________促进根的生长，这时__________占主导地位；比值________促进芽的生长，这时__________占主导地位。

35．在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以________mm、带________个叶原基为好。

36．一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________状态，并形成__________的现象称为"脱分化"。

37.植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、 等几种类型。

判断题

1.灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有有生命的物质全部杀死。(√)

2.消毒是杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。(√)

3.草莓一般利用花药培养进行脱毒。（ √ ）

4.禾本科植物和芸薹科植物的花粉培养的最适时期是单核晚期。（ × ）

5.在小麦胚培养过程中，小麦胚的褐色面向上。（ √ ）

6.由性细胞发育而成的胚叫做合子胚，而由体细胞发育而成的胚叫做胚状体。(√)

7.一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。（ √ ）

8.由胚乳培养获得的三倍体植株，也一定要进行染色体倍数的检查。（ √ ）

9.一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。（ × ）

10.经过花药培养所获得的植株都是单倍体。（ × ）

11.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。（ √ ）

12.一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。（ √ ）

13.在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。（ √ ）

14.无病毒苗指一点病毒也没有的苗。（ × ）

15.通过子房的培养，即可能等到单倍体植株，有能得到二倍体植株。（ √ ）

16.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。（ × ）

17.1/2 MS培养基的所有成分都是MS培养基用量的一半。（ × ）

18.利用芦荟的吸芽和侧芽进行组织培养时，采集外植体是最好用手掰，而不用刀割。（ √ ）

19.组织培养中，一般木本植物比草本植物易发生褐变。（ √ ）

20.诱发融合产生的一定是异核体。（ × ）

21.植物病毒遗传信息大多数都是DNA。（ × ）

22.禾本科植物和芸薹科植物的花粉培养的最适时期是单核早期。（ √ ）

23.在叶片培养时，叶组织上表皮朝上接种在培养基上有利于愈伤组织的生长和分化。（ √ ）

24.幼胚培养需要的培养基比成熟胚简单。（ × ）

25.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。

26.在配制培养基时，加入琼脂的作用是丰富培养基的营养成分。 （ × ）

27.培养是指把接种后的培养材料放在培养室里，使之生长脱分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。(√)

28.用10倍的大量母液配制10L培养基，其用量为100ml。

29.在细胞的成批培养整个过程中，一般要先后经过对数生长期、延迟期、减慢期、静止期

这四个阶段。

30.在诱导器官分化培养中，愈伤组织能否变绿是芽分化的前提。

31.一般来说，幼年植株的花药反应能力较好。

32.一般来说，在配制生根培养的培养基是，应降低无机盐浓度，增大蔗糖浓度，有利幼苗

发根。

33.经高压高温灭菌后，培养基的PH值会下降0.5个单位左右。

34.植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这

种现象通常称为玻璃化现象。玻璃化苗一般增殖容易，生根也较普通苗容易。

35.“KT/IAA的比值高时，利于根分化，比值低时，利于芽分化，比值适中时，产生愈伤组

织。”此为激素控制理论。激素控制理论最早是由Steward提出的。

36.山梨醇、甘露醇是我们常用的渗透压稳定剂，且易被吸收，可促进细胞增殖和生长。

37.花粉在单核靠边期时最易做花粉培养，因为此时期的花粉对离体培养的刺激最敏感。

38.外植体中已分化的活细胞，在外源激素的诱导下通过脱分化后形成愈伤组织，这一过程

被大致划分为三个时期（诱导期、形成期和分裂期）。

39.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。

40.一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。

41.在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。

42.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，不易培养。

43.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。

44.经过花药培养所获得的植株都是单倍体。

45.压高温灭菌后，培养基的PH值会下降0.5-1个单位左右。

46.细胞分裂素的浓度过低，易导致玻璃化现象。

47.在植物幼胚培养中，我们选用的蔗糖浓度为4%，因为这样的蔗糖浓度已足够幼胚的生长

发育所需。

48.升汞（氯化汞）是我们常用的外植体表面消毒剂浓度为0.1-1%，消毒时间为2-10分钟。

49.用于愈伤组织培养的外植体，一般在0.5~1cm，因太大会增加污染机会，太小，则不便操

作，生长缓慢。

50.在细胞的成批培养整个过程中，一般要先后经过对数生长期、延迟期、减慢期、静止期

这四个阶段。

51.在实验操作中，往往使用95%的酒精进行消毒，因为95%浓度的酒精比75%酒精的消毒

效果要好。

52.花粉在单核靠边期时最易做花粉培养，因为此时期的花粉对离体培养的刺激最敏感。

53.实验证明，通过早期茎尖培养，利用顶芽、腋芽增殖，是最少发生突变的方法。

简述题

1．以菊花茎段培养为例简述无菌操作规程？

（1）先用水和肥皂清洗双手，然后穿上灭菌后的专用实验服、帽子与鞋子，进入接种室，

打开超净工作台的紫外灯，照射20分钟，然后关闭紫外灯。

（2）在准备室将菊花嫩茎剪成1.0～１.5cm长茎段，每段带一芽，放入已灭菌的培养瓶中，

带入无菌超作室。用70%的酒精擦拭双手及超净工作台，点燃酒精灯。把剪刀、镊子等放

入95%的酒精中，在火焰上灭菌。

（3）先用70%酒精消毒30秒，倒掉酒精，再倒入0.1%的HgCl2溶液消毒5～8分钟，无

菌水冲洗3～4次。用剪刀在广口瓶内，将茎段两端各剪去一小段，使剩下的茎段大约为1.0cm

左右。

（4）打开培养基，用火焰灼烧一下培养基的瓶口和瓶盖，用镊子夹住茎段，插入培养基中，

在灼烧一下瓶口和瓶盖，拧好盖子。接种过程中常用70%的酒精擦拭工作台和双手，用火

焰灼烧手术刀和镊子。

（5）接种完毕后，整理超净工作台，将培养瓶放在25℃的培养室中培养，清洗所有工具。

2．试管苗与野生苗生境有何差异？

试管苗生境与野生苗生境的比较

生 境

光 照

温 度

相对湿度

养分

气体

菌态

试管苗

弱，易调控

适宜且恒定

高

丰富

光下CO2低，有害气体量高

无菌

野生苗

强，波动大

波动性大

较低，波动大

较贫瘠

各种气体成分较恒定

有菌

3．试管苗与野生苗在形态结构及功能上的差异？

试管苗与野生苗形态结构与功能上的差异

叶片及其功能

根系及其功能

试管苗

角质层薄，水孔多，气孔的生理活性差，保水能力差；此外，叶绿体的光合性能也差。 根系不发达，吸水能力差。

野生苗

角质层较厚，水孔少，气孔的生理活性强；叶绿体的光合性能好。

根系发达，吸水能力强。

4．简述茎尖脱毒原理？

（1）利用植物细胞的全能性，在特定条件下可获得不同的细胞、组织、器官，可能产生无病毒的细胞、组织、器官。

（2）根据病毒在植物体内分布特点，一般距离植物顶端分生组织越近，病毒浓度越低。

（3）根据病毒的运输途径，一般病毒是通过维管束和胞间连丝进行运输的，在植物顶端分生组织维管系统尚未形成，因此茎尖病毒浓度低。

（4）另外，顶端分生组织细胞生长旺盛、代谢活跃，病毒无法复制。

综上所述利用茎尖培养可达到脱毒效果。

5．以矮牵牛叶片培养为例简述组织培养的大概步骤或工序？

（1）配制培养基MS+BA1+NAA0.1，并进行灭菌。

（2）采集外植体：采集矮牵牛的肥厚嫩叶装入广口瓶中带回实验室。

（3）外植体的灭菌和消毒：取回的外植体先用洗衣粉清洗叶表面。然后装入广口瓶带入无菌超作室。用70%的酒精擦拭双手及超净工作台，点燃酒精灯。把手术刀、镊子等放入95%的酒精中，在火焰上灭菌。用70%酒精消毒30秒，倒掉酒精，再倒入0.1%的HgCl2溶液消毒5～8分钟，无菌水冲洗3～4次。

（4）接种：将灭菌后的叶片放在已灭菌的装有无菌滤纸的培养皿中，用手术刀将叶片切成0.5cm×0.5cm的小叶片。打开培养基，用火焰灼烧一下培养基的瓶口和瓶盖，用镊子夹住叶片，放入培养基中，在灼烧一下瓶口和瓶盖，拧好盖子。接种过程中常用70%的酒精擦拭工作台和双手，用火焰灼烧手术刀和镊子。

（5）培养：将接种后的培养基放在培养室中，培养条件为25℃±2℃，湿度为70%～80%。

（6）试管苗驯化：经过增殖培养和生根培养的矮牵牛试管苗在半遮阴的自然光下锻炼，并在培养瓶内加少量的自来水，逐渐使试管苗由无菌向有菌过度，然后进行移栽。

6．生长素类在植物组培中有何主要作用？并简述其稳定性与溶解性？

作用：在组织培养中，生长素主要用于诱导愈伤组织形成，促进根的生长。此外，协助细胞分裂素促进细胞分裂和伸长。

稳定性：天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。组织培养中常用人工合成的生长素类物质。 图3-5生长素类

除了IAA外，其他生长调节剂对热和光均稳定。

溶解性：生长素类多溶于酒精、丙酮等有机溶剂。配制母液时多用稀NaOH溶液助溶，然后用蒸馏水定容。生长素类常配成0.1mg/ml～0.5 mg/ml的母液贮于冰箱中备用。

7．细胞分裂素类在植物组培中有何主要作用？并简述其稳定性与溶解性？

作用：①抑制顶端优势，促进侧芽的生长。当组织内细胞分裂素／生长素的比值高时，诱导愈伤组织或器官分化出不定芽；②促进细胞分裂与扩大，延缓衰老；③抑制根的分化。因此，细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖，而避免在生根培养时使用。

③稳定性与溶解性 所有细胞分裂素对光、稀酸和热均稳定。但它的溶液在常温中时间长了会丧失活性。能溶解于稀酸和稀碱中，所以在配制常用稀HCl助溶，然后用蒸馏水定容。在植物组培中常配制成1 mg/ml，贮藏在低温环境中。

8．简述活性炭在植物组培中的作用？

加入活性炭的目的主要是利用其吸附性，减少一些有害物质的不利影响，例如能吸附一些酚类物质，可减轻组织的褐化（这在兰花组培中效果很明显）。其次，活性炭能使培养基变黑，有利于某些植物生根。再次，发现0.3%活性炭能降低玻璃化苗的发生率；最后还发现活性炭能恢复胡萝卜悬浮培养细胞胚状体的发生能力。

9．灭菌与消毒有何区别？

灭菌与消毒的主要区别在于前者的杀菌强烈，杀死所有活细胞；后者作用缓和，主要杀死或抑制附在植物材料表面的微生物但芽胞、厚垣孢子一般不会死亡。但灭菌与消毒是相对的，如果消毒时间过长或消毒剂浓度过高，也可杀死全部活的细胞，这时，消毒就成为灭菌了。反之，灭菌剂只能起到消毒作用。

10．试管苗移栽成活率低的原因有哪些？

(1)内因 内因主要有植物种类与试管苗的质量。不同种类的植物，移栽成活率不同，如菊花、薰衣草试管苗对移栽的条件要求不高，容易成活；而仙客来试管苗对移栽的条件较苛刻，稍不小心，就会引起大量死亡。此外，试管苗细长、黄化、根系发育不良，移栽时极易死亡。而试管苗叶片浓绿、茎粗壮、根系发达及长势好则容易成活。

(2)外因 外因主要有环境条件、管理措施及管理人员的责任心。

A、环境条件不适 如基质湿度过大引起烂根或水分不足使小苗萎蔫；温度过高加上高湿则极易引起烂苗和烂根，温度过低则使组培苗根系生长缓慢，形成僵苗，同时低温也会直接造成幼苗死亡。此外，光照过强易引起过苗度失水而死亡等。

B、管理粗放 有些管理人员技术水平低、责任心不强、管理粗放，也容易降低试管苗移栽的成活率。

11．试管苗驯化的目的是什么？

若把试管苗直接移栽到室外，由于生存环境发生了剧烈的变化，绝大多数试管苗难以适应而死亡。驯化的目的是人为创设一种由试管苗生境逐渐向自然环境过渡的条件，促进试管苗在形态、结构、生理方面向正常苗转化，使之更能适应外界环境，从而提高试管苗移栽的成活率。

12．试管苗驯化的原则是什么？

根据试管苗的特点及其生长环境与田间环境差异，驯化原则应从光、温、气、湿及有无菌态等环境要素考虑。前期以创设与试管苗原来生境相似的条件，后期则创设与自然环境相似的条件，以利试管苗在形态结构及生理功能方面顺利发生向适应外界环境转化，从而有效提高移栽成活率。

13．简要说明原生质体分离的方法。

14．简述试管微繁程序。

15．花药培养产生的植株染色体倍性如何？其产生的原因是什么？

16．比较幼胚培养和成熟胚培养的异同点。

17．植物组织培养技术主要包括哪些环节?各环节的主要工作内容是什么?

18．简要说明分离单细胞的方法。

19．由花药培养获得的植株，是否一定要进行染色体倍数的检查?为什么?

20．茎尖培养脱毒的原理和取材大小。

21．为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂？

22．愈伤组织的形态发生有那两种情况？并比较各自形成的完整植株有何不同？

23．简要说明花粉植株的染色体加倍的方法。

回答题

1．请你用图或表形式简要列出植物组培中的各种物理灭菌方法及适用对象？

2．提高试管苗驯化移栽成活率的措施有哪些？

(1)有针对性地调整培养基配方，改善培养条件，努力提高组培苗质量。

(2)及时出瓶驯化，避免组培苗老化。操作过程应极力避免损伤试管苗的根和叶。无根或根系不发达的小苗要在基部醮取生根粉或生长素溶液，以尽快促进生根。

(3)改善过渡培养的环境条件，有条件的单位可采用自控温室，并配合喷灌，能极大提高移栽成活率。

(4)选择恰当的种植介质，要求疏松、保水和保肥，易灭菌。

(5)对栽培基质进行灭菌或喷洒杀菌剂溶液，可防止滋生大量杂菌扼杀试管苗。

(6)保持试管苗的水分供需平衡。因为试管苗的茎叶保水能力差，加上根系吸水的能力差，所以需要提高环境中的相对湿度，使小苗保持挺拔姿态，以保证正常的各种生命活动。

(7)适当采取遮阴措施，可降低蒸腾失水，也可避免强日照对叶片的灼伤。

(8)加强肥水管理和病虫害防治。

综上所述，组培苗的驯化移栽要非常认真负责，注意保持水分平衡，选择适宜的介质，控制适宜的光、温、气、湿等条件，随时观察天气变化和小苗生长状况作出适当的调整；此外，防止大量杂菌的滋生，及时对病虫害进行防治。总之，采取灵活而有效的管理措施，提高移栽试管苗的成功率。

3．用激素控制理论解释下列现象：

答题要点：（1）激素控制理论

（2）进行编号并计算各种现象细胞分裂素与生长素的比值

（3）归类说明各形态发生原因（比值高——诱导芽的生长；比值低——诱导根的生长；比值趋中——有利愈伤组织的诱导）。

4．用图表列出植物组织再生途径。

5．请你设计一个组培实验室，都需要哪些仪器设备，说明你设计组培实验室的各分室及其所需仪器设备的作用。

6.写出原生质体分离及培养的技术流程。

7．试管苗移栽后应采取那些措施，才能提高移栽成活率？

8．简述植物组织培养与实践生产的关系。

9．根据已知条件，计算配制650ml培养基各母液的用量，并写出在实验室配制该培养基的各操作步骤。

已知：1.培养基配方：MS+6-BA1.5mg/L+2,4-D 0. 5mg/L

2.实验室有如下母液

10X大量元素；50X微量元素；100X有机物；100X铁盐； 1 mg/ml 6-BA；1 mg/ml 2,4-D。

3.若干琼脂粉和蔗糖

答题要点：

1.各母液的用量：

10X大量元素=650/10=65（ml）

50X微量元素=650/50=13（ml）

100X铁盐=650/100=6.5（ml）

100X有机物=650/100=6.5（ml）

1 mg/ml 6-BA=650*1.5/1000=0.975（ml）

1 mg/ml 2,4-D=650*0.5/1000=0.325（ml）

琼脂=4*650/1000=2.6（g）；蔗糖=30*650/1000=19.6（g）

2.配制培养基的操作步骤：

(1)将母液按顺序排列、检查是否失效（沉淀或变色）；

(2).在有适量蒸馏水(500ml)的容器中加入2.6g琼脂和19.6g蔗糖；

(3)加热溶化；

(4)加入适量蒸馏水（总量3/4），依次吸取65ml大量元素、13ml微量元素、6.5 ml有机物、

6.5ml 铁盐、0.975ml 6-BA 和0.325 ml 2,4-D移到容器中；

(5)调节pH值(用0.1M的NaOH或HCl调节)；

(6)用蒸馏水定容650 ml；进行分装（20-30ml/瓶）。