第一章 原核生物

细菌

细菌：广义，一大类细胞核无核膜包被，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物。 狭义，一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 形态：杆状>球状>螺旋状

构造：一般构造，细胞壁cell wall、细胞膜cell membrane、内含物inclusion body、核区、间体、细胞质。特殊构造，鞭毛、菌毛、性菌毛、糖被、芽孢。

细胞壁

功能：

1) 固定细胞外形，提高机械强度，使其免受渗透压等外力的损伤。

2) 为细胞的生长分裂，鞭毛运动所必需

3) 阻拦大分子有害物质（某些抗生素和水解酶）进入细胞。

4) 赋予细菌特定的抗原性以及对抗生素和噬菌体的敏感性

G+ 的细胞壁：厚度大，化学组分简单、一般含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸

肽聚糖：

1) 双糖单位：N-乙酰葡糖胺 通过β-1,4-糖苷键与N-乙酰胞壁酸相连。β-1,4-糖苷键可

被溶菌酶水解，导致细菌因细胞壁肽聚糖的散架而死亡

2) 四肽尾：由四个氨基酸分子L型与D型交替方式连接而成。连在N-乙酰胞壁酸上的四

肽尾是L-Ala，D-Glu，L-Lys，D-Ala

3) 肽桥：四种主要的肽桥类型，肽键、甘氨酸五肽、肽尾、D-Lys

磷壁酸：

定义：是结合在G+细菌细胞壁上的一种酸性多糖，主要成分为甘油磷酸或核糖磷酸。分为壁磷壁酸和膜磷壁酸，前者与肽聚糖分子进行共价结合，后者跨越肽聚糖层并与细胞膜相交连。

1通过分子上的大量负电荷浓缩细胞周围的镁离子，主要功能：○以提高细胞膜上一些合成酶

2贮藏元素○3调节细胞内自容素的活力，4作为噬菌体的特异的活力○以防细胞因自溶而死亡○

+5赋予G特异的表面抗原，6增强某些致病菌对宿主细胞的粘连，性吸附受体○用于菌种鉴定○

避免被白细胞吞噬，并有抗补体的作用。

G-细菌的细胞壁

厚度较G+细菌薄，层次较多，成分较复杂，肽聚糖层很薄，故机械强度较G+细菌较弱

1四肽尾的第三个氨基酸分子是内消旋二氨基庚二酸m-DAP○2没有特肽聚糖与革阳的区别○

殊的肽桥，甲肽尾的第四个氨基酸（D-Ala）的羧基与乙肽尾的第三个氨基酸（m-DAP)的氨基直接相连。因而只形成较稀疏、机械强度较差的肽聚糖网套。

外膜：包括脂多糖和磷脂和外膜蛋白。

脂多糖由类脂A、核心多糖。O-特异侧链三种成分组成

1控制细胞的透性○2提高镁离子浓度○3决定细胞壁抗原多样性○4类脂A是革阴外膜作用：○

病原菌致病物质内毒素的物质基础

周质空间存在许多周质蛋白

G+与G-一系列生物学特性的比较

鞭毛结构：G+机体上着生两个环，G-基体上着生四个环

产毒素：G+以外毒素为主，G-以内毒素为主

古生菌的细胞壁

假肽聚糖：糖骨架由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸通过β-1,3-糖苷键交替连接而成。连在后一氨基糖上的肽尾由L-Glu、L-Ala、L-Lys 三个L型氨基酸组成，肽桥则由L-Glu

一个氨基酸组成，甲肽尾的第三个氨基酸同乙肽尾的第三个氨基酸通过肽桥相连。

缺壁细菌

L型细菌：

定义：专指那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性状稳定的细胞壁缺损菌株。 特点：细胞成多形态，有些能通过细菌滤器。对渗透敏感，在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌落

原生质体;指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞

球状体：指还残留了部分细胞壁（尤其是革阴细菌外膜层）的原生质体

支原体：在长期进化过程中形成的，适应自然生活条件的无细胞壁原核生物。细胞膜中含有甾醇故细胞膜有较高的机械强度

革兰氏染色的机制：

通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+细菌因细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，且不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌引起细胞壁较薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。再经番红复染后，G-细菌呈红色，而G+呈紫色 细胞内含物：

1) 贮藏物

2) 磁小体:存在于少数趋磁细菌中，大小均匀，数目不等，成分为Fe3O4，外有一层磷脂、

蛋白质或糖蛋白膜包裹，无毒，具有导向功能

3) 羧酶体：是存在于一些自养细菌细胞内的多角形或六角形内含物，大小与噬菌体相仿，

内含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶，在自养细菌的CO2固定中起着关键作用。

糖被：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质

1保护作用，其上大量极性基团可保护菌体免受干旱损伤;防止噬菌体的吸附糖被的功能：○

2贮藏养料，和裂解；一些动物致病菌的荚膜还可以保护他们免受宿主白细胞的吞噬○以备营

3作为透性屏障和离子交换系统，4表养缺乏时重新利用○以保护细菌免受重金属离子的毒害○

面附着作用⑤细菌间的信息识别作用⑥堆积代谢废物

鞭毛：生长在某些细菌表面的长丝状、波曲的蛋白质附属物，具有运动功能。

观察：①电镜观察②特殊的鞭毛染色法③通过琼脂培养基上的菌落形态或在半固体直立 柱穿刺线上群体扩散情况推测某菌是否长有鞭毛

鞭毛的构造：基体、钩形鞘、鞭毛丝

基体：由四个称作环的盘状物组成，L、P、S、M (革阳只有S和M)

鞭毛的着生方式：单端鞭毛菌、端生丛毛菌、两端鞭毛菌、周毛菌

菌毛：是一种长在细菌体表的纤细、中空、短直且数量较多的蛋白质类附属物，具有使菌体附着于物体表面的作用。多存在与革阴致病菌中

性毛：构造成分与菌毛相同，比菌毛长，每个细胞仅一至少数几根。一般见于革阴细菌的雄性菌株中，具有向雌性菌株传递遗传物质的作用，有的还是RNA噬菌体的特异性吸附受体 芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、壁厚、含水量低、抗逆性强（生命世界中抗逆性最强的一种构造）的休眠构造。每一营养细胞内仅形成一个芽孢，无繁殖功能。

芽孢的耐热机制

渗透调节皮层膨胀学说：芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差以及皮层的离子强度很高，这就是皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核心中的水分，其结果造成了皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心赋予了芽孢极强的耐热性。

另一种学说则认为，芽孢皮层中含有营养细胞所没有的DPA-Ca，它能稳定芽孢中的生物大分子，从而增强了芽孢的耐热性

伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，在芽孢旁形成的一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体

放线菌

定义：是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物，几乎都为革兰氏阳性菌。

繁殖方式：借孢子、借菌丝

1固体培养基:赶早不透明、表面呈致密丝绒状，上有一薄层彩色的“干粉”群体特征：○；菌

落和培养基的连接紧密，难以挑取；菌落的正反面颜色常不一致，在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象②液体培养基：培养液清而不混，其中悬浮着许多珠状菌丝团，一些大型菌丝团沉在瓶底

蓝细菌

定义：旧名蓝藻或蓝绿藻，是一类进化历史悠久、革兰氏阴性、无鞭毛、含叶绿素a（但不形成叶绿体）、能进行产养性光合作用的大型原核生物

特化形式：

1) 异形孢：是存在于丝状生长种类中的形大、壁厚、专司固氮功能的细胞，数目少而不定，

位于细胞链的中间或者末端（念珠蓝细菌属）

2) 静息孢子：是一种长在细胞链中间或末端的形大、壁厚、色深的休眠细胞，富含贮藏物，

能抵御干旱等不良环境

3) 链丝段：又称连锁体或藻殖段，是由长细胞链断裂而成的短链段，具有繁殖功能

4) 内孢子：少数种类（管孢蓝细菌属）能在细胞内形成许多球形或三角形的内孢子，待成

熟后即可释放，具有繁殖作用

支原体

定义：一类无细胞壁。介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物

特点：①细胞很小，直径约150~300nm光景下勉强可见②细胞膜含甾醇，比其他原核生物的膜更坚韧③因无细胞壁，，故呈G-,且形态易变，对渗透压较敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感④菌落小，在固体培养基上呈特有的“油煎蛋状”⑤以二分裂和出芽等方式繁殖⑥能在含甾醇。酵母膏和血清等营养丰富的培养基上生长⑦多数能以糖类作能源，能在有氧或无氧条件下进行氧化型或发酵型产能代谢⑧基因组很小，仅在0.6~1.1Mb左右 立克次氏体

定义：是一类专性寄生于真核细胞内的G-原核生物。与支原体的区别：有细胞壁不能独立生活；与衣原体的区别：细胞较大，无滤过性，存在产能代谢系统

特点：①细胞较大，光镜下清晰可见②细胞形态多样③有细胞壁，G-④除少数之外，均在真核细胞内营细胞内专性寄生⑤以二分裂方式繁殖，每分裂一次约8h⑥存在不完整的产能代谢途径，不能利用葡萄糖或有机酸，只能利用谷氨酸和谷氨酰胺产能⑦对四环素和青霉素等

10基抗生素敏感⑧对热敏感⑨一般可培养在鸡胚、敏感动物或子宫颈癌细胞的组织培养物上○

因组很小

衣原体

定义：是一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型G-原核生物

特点：①有细胞构造②细胞内同时含有RNA和DNA两种核酸③有细胞壁（但缺肽聚糖），G-④有核糖体⑤缺乏产生能量的酶系，须严格细胞内寄生⑥以二分裂方式繁殖⑦对抑制细菌的抗生素和药物敏感⑧只能用鸡胚卵黄囊膜、小白鼠腹腔或Hela细胞组织培养物等活体进行培养

衣原体生活史（整个生活史约需48h）

原体：具有感染力，呈小球状，细胞壁厚、致密，不能运动，不生长，抗干旱，有传染性。 经空气传播，通过吞噬作用进入细胞，在其中生长转化为无感染力的始体

始体：呈大型球状，细胞壁厚而脆弱，易变性，无传染性，生长较快，通过二分裂可在细胞内繁殖成一个微菌落即“包涵体”，随后始体重新转化为原体，释放出细胞

第三章 病毒和亚病毒

病毒

定义：是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”。其本质是一种只含DNA或RNA的遗传因子，能以感染太和非感染态两种状态存在

特性：①形状极其微小，一般都能透过细菌过滤器，故必须在电镜下才能观察②没有细胞构造，其主要成分仅为核酸和蛋白质两种，故又称“分子生物”③每一种病毒只含一种核酸，不是DNA,就是RNA④既无产能酶系，又无蛋白质和核酸合成酶系，只能利用宿主活细胞内现成代谢系统合成自身的核酸和蛋白质组分⑤以核酸和蛋白质等元件的装配实现其大量繁殖⑥在离体条件下，能以无生命的生物大分子状态存在并可长期保持其侵染活性⑦对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感⑧有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染

病毒粒的对称体制：螺旋对称，二十面体对称，复合对称P64

噬菌体

繁殖阶段：①吸附：尾丝尖端与宿主细胞表面的特异性受体接触②侵入：尾丝收缩③增殖：包括核酸的复制和蛋白质的生物合成④成熟：自行装配的过程⑤裂解释放：水解细胞膜的脂肪酶和水解细胞膜的溶菌酶，区别于自外裂解

效价：每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位数pfu或感染中心数

测定效价的方法——双层平板法

 

第二篇：微生物实习总结

岁月如梭，光阴似箭，不知不觉在微生物室实习的时间已经结束了，但收获颇丰。 通过积极协助老师完成细菌学方面检验项目的同时，自己的基础操作能力有了很大程度的提高，操作起来熟练了非常多。而且通过染色在显微镜下能辨认的细菌也更多了，像球菌科的葡萄球菌感染、链球菌、淋球菌以及杆菌科的肠杆菌，真菌孢子在显微镜下也能一眼辨认；全片查找结核杆菌的阳性率也提高了。对什么类型的标本应做什么平板接种，培养温度等也有了进一步的掌握，比如：痰标本应接种在血平板，巧克力平板，沙保平板而且还要做涂片染色以监测痰标本的合格程度。血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态，沙保主要观察是否有念珠菌生长。

总之在微生物一个月的实习日子里感觉自己受教颇多，通过亲身实践操作把自己在学校学到的理论知识同实践很好的结合了起来，在带教老师的悉心指导下已熟悉掌握了各类标本的接种、细菌培养以及细菌的初步鉴定、细菌的药敏试验等。