阴道分泌物检查操作规程

【适应证】

1、阴道分泌物检查 主要用于常见阴道炎的鉴别诊断，常见的阴道炎有滴虫阴道炎、外阴阴道念珠菌病及细菌性阴道病。主要有悬滴法、PH测定和培养法。悬滴法及培养法用于检测三种常见阴道炎的病原体；PH测定是根据三者的病原体不同、阴道分泌物的PH不同，来检测阴道分泌物的PH值。

2、培养法 主要用于：①临床高度怀疑滴虫阴道炎或外阴阴道念珠菌病，但悬滴法检测滴虫或念珠菌阴性；②临床已诊断滴虫阴道炎或外阴阴道念珠菌病，但经过抗滴虫治疗或抗真菌治疗，疗效不佳，考虑有耐药发生。此外，复发性外阴阴道念珠菌病考虑有非白念珠菌感染的可能时，均应做分泌物培养，确定病原体。

【操作方法及程序】

1、悬滴法

（1）方法：悬滴法也称湿片法，有生理盐水悬滴法及10％氢氧化钾悬滴法。前者用于检测滴虫及线索细胞，后者用于检测念珠菌的芽胞及假菌丝。将1～2滴生理盐水及10％氢氧化钾混合，然后在显微镜下进行检查。

（2）诊断标准：在生理盐水的湿片上见到呈波浪状运动的滴虫及增多的白细胞，即可诊断滴虫性阴道炎。在10％氢氧化钾的湿片上见到芽胞及假菌丝可诊断为外阴阴道念珠菌病。在生理盐水的湿片上见到线索细胞，结合分泌物的其他特点，如白色，均质的分泌物，胺试验阳性，PH＞4.5，则可诊断细菌性阴道病。

2、PH测定

（1）方法：PH测定主要采用精密PH试纸（4～7）测定阴道分泌物的PH值。

（2）诊断标准：滴虫阴道炎的阴道分泌物＞4.5。外阴阴道念珠菌病的PH＜

4.5，若PH＞4.5，提示有混合感染，如同时有滴虫感染等。细菌性阴道病应PH

＞4.5。

3、培养法

（1）滴虫培养：取阴道分泌物放在肝浸汤培养基或大豆蛋白胨培养基中，37℃孵育48h后镜检有无滴虫生长。

（2）念珠菌培养：取阴道分泌物放在TTC沙保罗(Sabouraud)培养基上，置湿温或37℃温箱，3～4d后出现菌落。若菌落为白色，有可能为百念珠菌，若为红色、紫红色等其他颜色可能为非白念珠菌。若进一步对白念珠菌及非白念珠菌进行菌种鉴定，需在玉米－吐温培养基上进一步培养，25℃培养72h，显微镜下有假菌丝，中隔部伴有成簇的圆形分生孢子，顶端有厚壁的后膜孢子，芽管试验阳性，即为百念珠菌。不符合以上特征的即为非白念珠菌。其他非白念珠菌的菌株鉴定，须通过糖发酵及糖同化试验进一步鉴定。

无症状时不应做培养。

【注意事项】

做悬滴法检查时，注意取分泌物前24～48h避免性交、阴道灌洗或局部用药，取分泌物时窥器不涂润滑剂，分泌物取出后应及时送检，若怀疑滴虫，应注意保暖，尤其冬日，否则滴虫活动力减弱，造成辨认困难。

 

第二篇：阴道分泌物检查1

阴道分泌物检查

概念：阴道分泌物（vaginaldischarge）为女性生殖性系统分泌的液体，俗称“白带”。主要来自宫颈腺体、前庭大腺，此外还有子宫内膜、阴道粘膜的分泌物等。

一、标本采集

阴道标本采集前24小时，禁止性交，盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等，通常由妇产科医务人员用消毒拭子自阴道深部或阴道穹隆后部、宫颈管口等处取材，制成生理盐水悬液。

二、一般性状检查

1、外观  正常阴道分泌物为白色稀糊状，一般无气味，量多少不等其性状与雌激素水平高低及生殖器官充血情况有关，于近排卵期白带量多，清澈透明、稀薄似鸡蛋清，排卵期2-3天后白带混浊粘稠、量少、行经前量又增加。妊娠期白带量较多。白带异常可表现为色、质、量的改变：

①、大量无色透明粘白带常见于应用雌激素药物后及卵巢颗粒细胞瘤时。

②、脓性白带：黄色或黄绿色有臭味，多为滴虫或化脓性细菌性感染引起的；泡沫状脓性白带，常见于滴虫性阴道炎；其它脓性白带见于慢性宫颈炎、老年性阴道炎、子宫内膜炎、宫腔积液、阴道异物等。

③、豆腐渣样白带：呈豆腐渣样或凝乳状小碎块，为念珠菌阴道炎所特有，常伴有外阴瘙痒。

④、血性白带：内混有血液，血量多少不定，有特殊臭味。对这类白带应警惕恶性肿瘤的可能，如宫颈癌、宫体癌等，有时某些宫颈息肉、子宫粘膜下肌瘤、老年性阴道炎、重度慢性宫颈炎和宫内节育器引起的副反应也可在白带中见到血液。

⑤、黄色水样白带：由于病变组织的变性、坏死所致。常发生于子宫粘膜下肌瘤，宫颈癌、子宫体癌、输卵管癌等。

⑥、奶油状白带：见于阴道加德纳菌感染。

三、清洁度检查

（一）检测方法

将阴道分泌物加生理盐水作涂片，用高倍镜检查，主要依靠白细胞、上皮细胞、阴道杆菌与杂菌的多少划分清洁度，见表。

Ⅰ度 大量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞0-5/HPF，杂菌无或极少 正常

Ⅱ度 中等量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞10-15/HPF，杂菌少量 亦属正常

Ⅲ度 少量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞15-30/HPF，杂菌较多 提示有炎症

Ⅳ度 无阴道杆菌有少量上皮细胞，白细胞>30/HPF，大量杂菌 多见于严重的阴道炎

    卵巢功能不足、雌激素减低，阴道上皮增生较差时可见到阴道杆菌减少，易感染杂菌。单纯清洁度不好而未发现病原微生物，为非特异性阴道炎。当清洁度为Ⅲ～Ⅳ度时常可同时发现病原微生物，提示存在感染引起的阴道炎。

四、滴虫检查

可引起阴道感染的原虫主要有是阴道毛滴虫，可致滴虫性阴道炎。病人外阴灼热痛、瘙痒，阴道分泌物呈或泡沫状，将此分泌物采用生理盐水悬滴法置于低倍显微镜下观察，可见波动状或螺旋状运动的虫体将周围白细胞或上皮细胞推动。在高倍镜下可见虫体为8-45μm，呈倒置梨形，大小多为白细胞的2-3倍，虫体项端有前鞭毛4根，后端有后鞭毛一根，体侧有汉动膜，借以移动。此时阴道分泌物的清洁度为Ⅲ、Ⅳ度。

阴道毛滴虫生长繁殖的适宜温度为25-42摄氏度，故在检验时应注意保温，方可观察到阴道毛滴虫的活动。阴道分泌物中查到阴道滴虫是诊断滴虫性阴道炎的依据，近年来采用阴道毛滴虫单抗制剂的胶乳免疫凝聚法剂盒可提高滴虫性阴道炎的诊断率。

检测方法：直接涂片法  (最常用方法)。

    将阴道分泌物与少许生理盐水混合涂片，高倍镜下观察，或干燥后用革兰氏或瑞氏染色后油镜观察。

五、真菌检查

阴道真菌有时在阴道中存在而无害，在阴道抵抗力减低时容易发病，真菌性阴道炎找到真菌为诊断依据，阴道真菌多为白色假丝酵母菌，偶见阴道纤毛菌、放线菌等。采用悬滴法于低倍镜下可见到白色丝假酵母菌的卵圆形孢子和假菌丝。如取阴道分泌物涂片并行革兰氏染色后油观察，可见到卵圆形革兰氏阳性孢子或与出芽细胞相连接的假菌丝，成链状及分支状。

检测方法：湿片法：最常用方法同阴道滴虫检查，必要时革兰氏染色为革兰氏阳性菌。

六、淋病奈瑟菌

淋病是目前世界上发病率较高的性传播疾病之一。国内统计约占门诊性病患者的40%。人类是淋病奈瑟菌唯一的宿主。在性关系紊乱情况下造成在人群中的广泛传染及流行。临床上多见急性症状，少数为慢性过程。淋病奈瑟菌的检查首先采用涂片法，宫颈管内分泌物涂片的阳性率最高，为100%；阴道上1/3部分为84%；阴道口处为35%。一般需将宫颈表面脓液试去，用棉拭子插入宫颈管1厘米深处停留10-30s，旋转一周取出，将分泌物涂在玻片上，革兰氏染色后油镜检查，找革兰氏阴性双球菌，形似肾或咖啡豆状，凹面相对，除散在于白细胞之间外，还可见其被吞噬于中性粒细胞胞质之内，因淋病奈瑟菌对各种理化因子抵抗力弱，涂片法可被漏诊，必要时可进行淋病奈瑟菌培养，且有利于菌株分型和药物过敏试验。近年来采用单克隆抗体技术生产的淋病抗血清，可与受检查者宫颈分泌物中的淋病奈瑟菌结合，采用免疫荧光技术，在30分钟内即可准确得出结果。比培养法快，比涂片法准确，较易掌握。此外运用PCR技术也可对淋病奈瑟菌过少，杂菌过多的标本进行诊断。

对于淋病非显性感染者，其淋病奈瑟菌的镜检和培养检查常为阴性，但却是淋病的重要传染源。为此，近年来制备了多种检测淋病奈瑟菌的基因探针。大部分淋病奈瑟菌内含有多拷贝的4。2kb隐蔽性质粒，此外淋病奈瑟菌青霉素抗性主要是由编码β-骨酰胺酶的质粒决定的，用这两种质粒标记的探针与阴道分泌物进行斑点杂交可分别探测淋病奈瑟菌及其抗药性，其特异性敏感性均很高。目前还制备出淋病奈瑟菌DNA探针、菌毛探针和RNA探针，也建立了各种特异性高，敏感性强、简便快速的放射性标记的检测系统，成为淋病奈瑟菌及其抗药性检查的重要方法。

七、线索细胞及胺试验

阴道加德纳菌（Gardherellavaginalis;GV）和某些厌氧菌共同引起的细菌性阴道病亦属于性传播疾病之一。该菌还能以非性行为方式传播。除引起阴道病外，尚可引起早产、产褥热、新生儿败血症、绒毛膜羊膜炎、败血症和脓毒血症等。阴道加德纳菌产生高浓度的丙酮酸的氨基酸，可被阴道厌氧菌群脱羧基生成相应的胺，引起皮肤粘膜过敏。血管通透性增加，上皮细胞脱落，阴道分泌物呈奶油状大量排出，有恶臭。患者阴道分泌物革兰氏染色后可见阴性或染色不定有时可染成革兰氏阳性的小杆菌。大小为（1.5-2.5）μm×0.5μm,具有多形性，呈杆状或球杆状，阴道分泌物PH常大于4.5，胺试验阳性。

除对阴道加德纳菌形态学鉴别外，还可进行阴道菌群检查，由于细菌性阴道病时乳酸杆菌减少，加德纳氏菌的厌氧菌增加，可计算乳酸杆菌和加德纳菌的数量变化，作为本病诊断参考。一般取阴道分泌物涂片，革兰氏染色，用油镜观察3-5个视野，计算各种菌的数量。乳酸杆菌为革兰氏阳性大杆菌，（1-5）μm×1μm，常成双，单根、链状或栅状排列，非细菌性阴道病乳酸杆菌>5个/油视野仅见少许加德纳菌。细菌性阴道病不仅可见到加德纳菌，还有其它革兰氏阴性或阳性杆菌，无乳酸杆菌或小于5个/油镜视野。

寻找阴道分泌物中的线索细胞，是诊断加德纳菌性阴道病的重要指标。线索细胞为阴道鳞状上皮细胞粘附多数加德纳菌所致，生理盐水涂片可见该细胞边缘呈现锯齿状，细胞已有溶解，核模糊不清，其上附着大量加德纳菌及厌氧菌，使其表面毛糙，有斑点和大量的细小颗粒，亦用吖啶橙染色法或相差显微镜观察法检查线索细胞。此外还可用培养、荧光板、气液色谱分析和PCR方法等辅助诊断。

细菌性阴道炎诊断依据：①线索细胞；②PH>4.5；③胺试验阳性；④阴道分泌物稀薄均匀，凡有线索细胞，再加上述任意2条，诊断即成立。

胺试验：阴道分泌物中加入几滴10%氢氧化钾，产生鱼腥样臭味，即胺试验阳性。